孔晓冬[1]2002年在《糖皮质激素诱导新生大鼠海马神经元凋亡的体外研究》文中研究指明目的 观察不同浓度地塞米松(Dex)作用不同时间，对体外培养的大鼠海马神经元影响。同时，探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、单唾液酸四己糖神经节苷酯(GM_1)、纳洛酮对糖皮质激素诱导的海马神经元凋亡的影响，并初步探讨其作用机制。方法 取新生大鼠海马组织细胞进行体外原代分离培养，应用倒置相差显微镜进行细胞形态学观察，MTT法进行细胞酶学分析、原位末端标记(TUNEL)法测定凋亡并用免疫组化法观察凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达，分组比较不同浓度及作用时间bFGF等药物对糖皮质激素诱导海马神经元凋亡的影响。结果 对于体外培养的神经胶质细胞，不同浓度Dex作用24h后，实验组与对照组形态学比较未见明显差别，各实验组与对照组之间MTT检测OD值差别无显着性意义；当终浓度≥10~(-7)mol／L的Dex处理海马神经元时，实验组对照组之间的OD值差别具有显着性意义，其中10~(-7)mol／L浓度Dex作用8小时即可观察到显着差异。TUNEL检测证实随浓度增加及作用时间的延长，凋亡细胞逐渐增多，且凋亡相关基因Bax蛋白表达也明显增高，而Bcl-2蛋白表达降低。10~(-7)mol／L浓度Dex作用下再用新鲜培养液于不同时间洗脱后，不同时间组的OD值与对照组之间的差别无显着性意义；在Dex作用的同时或一定时间后，应用bFGF(20ng／ml)、EGF(20ng／ml)、GM_1(1μg／ml)、纳洛酮(10~(-4)mol／L)可显着提高实验组OD值(P＜0.05)，而且凋亡相关基因Bax蛋白表达也明显减少。结论 海马神经元在Dex的作用下可发生凋亡，这种凋亡与Dex的浓度及作用时间密切相关。Dex诱导的海马神经元凋亡的过程可以被一定浓度的神经保护剂bFGF、EGF、GM_1和纳洛酮阻断，这些药物阻断糖皮质激素引起海马神经元凋亡的作用主要是通过减少Bax表达，从而调节Bcl-2／Bax比率而实现的。
夏颖华, 孔晓冬, 雷平, 张释双, 张明义[2]2017年在《神经生长因子对糖皮质激素诱导大鼠海马神经元凋亡的保护作用》文中指出目的探讨神经生长因子对糖皮质激素诱导的大鼠海马神经元凋亡的保护作用。方法体外分离原代培养18只新生Wister大鼠海马神经元,噻唑蓝法测定地塞米松诱导海马神经元凋亡的最低敏感剂量,观察不同质量浓度神经生长因子对地塞米松(0.10×10~(-6)mol/L)诱导海马神经元凋亡的保护作用。结果与阴性对照组相比,地塞米松Ⅰ组(10×10~(-6)mol/L)、Ⅱ组(1×10~(-6)mol/L)和Ⅲ组(0.10×10~(-6)mol/L)大鼠海马神经元活性均降低(P=0.000,0.000,0.000)。予不同质量浓度神经生长因子后,神经生长因子0.18 ng/ml组大鼠海马神经元活性低于阴性对照组(P=0.000)和阳性对照组(P=0.010),神经生长因子18 ng/ml组大鼠海马神经元活性高于阳性对照组(P=0.000)和神经生长因子0.18 ng/ml组(P=0.000)。结论糖皮质激素可以诱导体外培养的大鼠海马神经元凋亡,地塞米松0.10×10~(-6)mol/L是诱导海马神经元凋亡的最低敏感剂量,神经生长因子可以拮抗地塞米松诱导的大鼠海马神经元凋亡。
张建宁, 孙红宇, 杨树源, 张卉, 张文治[3]2003年在《糖皮质激素对大鼠海马神经元影响的体外研究》文中研究表明目的 探讨在体外条件下糖皮质激素 (glucocorticoids ,GCs)对海马神经元的影响及其机制。方法 取新生大鼠海马组织进行原代分离培养 ,通过细胞形态学观察、细胞酶学噻唑蓝 (methylthiazolyl,MTT)测定、DNA原位末端标记 (TdT mediateddUTPNickEndLablelingmethod ,TUNEL)法以及凋亡相关蛋白Bcl 2、Bax的表达观察 0、10 - 9、10 - 8、10 - 7、10 - 6 、10 - 5mol/L不同浓度的地塞米松 (dexam ethasone ,DEX)作用 2 4h对大鼠海马神经元的影响。结果 高浓度的DEX可以引起明显的海马神经元形态变化 ,降低海马神经元的活性 ,并通过上调Bax的表达 ,下调Bcl 2的表达促进海马神经元的凋亡。结论 高浓度糖皮质激素可促进海马神经元的凋亡从而降低海马神经元的活性。
刘治娟[4]2006年在《糖皮质激素和苯并（a）芘对大鼠海马神经元的影响》文中研究说明早老性痴呆的主要病理改变之一是海马脑区β-淀粉样蛋白的沉积，而β-淀粉样蛋白会造成海马神经元会损伤。糖皮质激素为应激激素，也是临床常用药物，血浆中高水平的糖皮质激素持续作用可透过血脑屏障进入脑组织。在中枢神经系统中，海马富含糖皮质激素受体，故极易受到糖皮质激素的攻击。因此对于早老性痴呆病人，体内高水平的糖皮质激素水平是否会加重β-淀粉样蛋白引起的海马神经元损伤有待研究。 目的 在体外实验条件下，观察不同浓度的地塞米松和β-淀粉样蛋白对海马神经元的影响，以探讨糖皮质激素是否促进β-淀粉样蛋白对海马神经元的损伤。 方法 取孕18天SD大鼠胚胎的海马神经元进行体外原代分离培养，在细胞增长期分别加入不同浓度DEX(10~(-5)，10~(-6)，10~(-7)，10~(-8)M)和Aβ_(25-35)(1，5，10，20μM)作用24h后，遴选出接近损伤浓度和最低致损伤浓度用于联合实验。于联合实验中先加入DEX作用24h后，再加入Aβ_(25-35)作用24h后观察损伤情况。应用倒置显微镜、MTT法和LDH释放率法进行细胞形态及细胞活力分析；运用TUNEL法检测海马神经元的凋亡情况，观察其凋亡特征。 结果 MTT OD值和LDH释放率检测发现10~(-5) M DEX作用组和5，10，20μM Aβ_(25-35)作用组与对照组相比差异有显着性(P＜0.05)。DEX(10~(-5)，10~(-6)M)和Aβ_(25-35)(1，5μM)联合组，与对照组相比差异有显着性意义(P＜0.05)。TUNEL法检测显示正常培养的海马神经元TUNEL染色偶见阳性细胞(凋亡率为7.83±1.65％)，DEX(10~(-5)，10~(-6)
参考文献：
[1]. 糖皮质激素诱导新生大鼠海马神经元凋亡的体外研究[D]. 孔晓冬. 天津医科大学. 2002
[2]. 神经生长因子对糖皮质激素诱导大鼠海马神经元凋亡的保护作用[J]. 夏颖华, 孔晓冬, 雷平, 张释双, 张明义. 中国现代神经疾病杂志. 2017
[3]. 糖皮质激素对大鼠海马神经元影响的体外研究[J]. 张建宁, 孙红宇, 杨树源, 张卉, 张文治. 中国神经精神疾病杂志. 2003
[4]. 糖皮质激素和苯并（a）芘对大鼠海马神经元的影响[D]. 刘治娟. 安徽医科大学. 2006