摘要：根据国内外研究报导：B族溶血性链球菌（GBS），是引起新生儿肺炎，脑膜炎，脓毒性败血症的重要的病原菌之一（1）-（5）。它存在于正常健康成年女性的生殖道，胎儿可在分娩过程中感染GBS。或GBS直接间接通过胎盘绒毛侵入胎膜内感染胎儿（6）。由于GBS引起新生儿早发型败血症与晚发型感染临床进展迅速，死亡率高（2）-（5）。因此妊娠期对GBS感染的筛查，对阳性者采取有效的预防性治疗，对预防和降低新生儿早发型败血症和晚发型感染具有重要的意义。本试验检测了美中宜和妇儿医院和东方美华妇儿医院2010年1月至2011年12月共3559例孕期妇女生殖道分泌物，243例检出B族链球菌，细菌携带率为6.8%，共分离得到38个GBS菌株。药敏结果显示66%的GBS对青霉素敏感，中介占34%。80%对氨苄西林敏感，中介占20%。100% 和99%GBS对头孢呋辛，头孢唑啉敏感。对亚胺培南和美洛霉素敏感菌占100%和98%。GBS对 阿奇霉素、米诺环素、和四环素呈较高的耐药性，耐药菌占68%、77%、和80%。本研究提示细菌培养鉴定法是一个可靠的诊断GBS感染的方法。青霉素、氨苄青霉素可作为常规预防GBS感染的首选药物。本研究有助于指导GBS携带孕妇药物应用，对预防或降低新生儿早期GBS败血症有重要的意义。
关键词：B群链球菌；早发型败血症；新生儿感染；预防性治疗
材料与方法
一、材料来源
本试验检测美中宜和妇儿医院和东方美华妇儿医院2010年1月至2011年12月3559例孕期妇女生殖道分泌物GBS，行GBS增菌和分离培养。增菌液中的萘啶酸和多粘菌素B由北京陆桥技术有限责任公司提供。BAPI 20Strep链球菌鉴定试条由生物梅里埃中国有限公司-北京分公司制备，药敏纸片由北京天坛药物生物技术开发公司制备。羊血培养皿和羊血M-H培养皿由天津市金章科技发展有限公司制备。标准金黄色葡萄球菌ATCC25923，无乳链球菌ATCC12386由中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心提供。
二、方法（1）
1.B族链球菌增菌及分离培养
无菌操作下，用灭菌棉试纸取孕期阴道分泌物，加入已配制好的脑心侵液培养管中，此培养基中含奈啶酸和多粘菌素B以便抑制G-杆菌的生长，将管置5%-10%CO2培养箱，37C，24小时后分区划线法接种于Columbia羊血琼脂平板上，置上述培养箱中37C，24小时培养。观察菌落生长形态和溶血情况。选择特异形态菌落进行下一步试验。
2.触酶试验
加一滴3%过氧化氢溶液于载玻片上，用牙签取1-2个菌落置于溶液上观察有无气泡产生。有气泡产生为阳性，没有为阴性。
3.CAMP协同试验
用标准的链球菌株作为阳性对照和ATCC25923葡萄球菌菌株垂直画线接种于血琼脂培基上，两线不能相交，再将待测菌落平行接种于标准链球菌旁，37C，24小时后观察在葡萄球菌与链球菌交界处有无箭头型溶血区，有为阳性。协同试验同时进行链球菌纯培养。
4.API 20 STREP 链球菌鉴定试验。
取CAMP试验阳性的新鲜纯培养菌于无菌蒸馏水中制成细菌悬液，其浊度相当于0.5 McFarland标准混浊度，取适量细菌悬液接种于API 20Strep试验条上35-37C 培养4小时得到第一次结果，如需要可在24小时读第二次结果。
5.K-B纸片扩散法药敏鉴定
取上述细菌悬液0.5ml悬浮于一安瓶API20 Strep培养基中，均匀涂布于5%羊血M-H平板琼脂上3次，每次旋转60°角，最后沿平板内缘涂一周，待3-5分钟菌液干后，用无菌镊子将含药纸片均匀贴于涂布细菌的琼脂平皿上，35-37℃24小时读取。
三﹑结果
1.本文对3559例围产期妇女生殖道分泌物行B族链球菌分离培养，细菌鉴定，及药敏试验。243例分离得倒GBS。细菌携带阳性率为6.8%。共分离得到38个B族链球菌菌株。
四﹑讨论
1。国内外文献报导GBS是新生儿肺炎，脑膜炎，脓毒败血症等一系列感染的主要致病菌之一（2）（3）（4）。由于GBS引起的新生儿早发型感染与晚发型感染临床进展迅速，死亡率高。有文献报导GBS导致新生儿早发型败血症死亡率达68%（4）。因此围产期筛查GBS并预防性清除GBS对于预防和降低新生儿早发型和晚发型GBS感染有重要意义。美国CDC建议妇女在怀孕35周-37周常规筛查GBS（5）.本实验参考美国临床实验室标准协会关于抗菌药物敏感性试验标准第二十三版，按临床需要选用18种抗菌素进行药敏实验。本实验方法目前仍是诊断和鉴定GBS可靠易行的方法。
2。国内关于GBS携带率的报导存在很大的差异从4%到29%。（8）（9）国外报导“健康成年妇女生殖道GBS的检出率为28%左右”（4）（9）。最近PCR方法检测GBS阳性率为8%（10）本实验室报导为6.8%。造成这种差异的原因可能与人种不同，标本采集部位（6），标本采集方法，培养条件及鉴定方法不同有关。一些特殊人群 如肥胖、糖尿病、多次妊娠、低龄或高龄孕妇等带菌率较高（6）本人认为细菌培养法是检测诊断GBS可靠有效的方法。也有人把培养法与测序法作为检测GBS感染的金标准（10）。
3。本实验结果显示GBS对青霉素，氨苄西林敏感率分别为66%和80%。本试验提示青霉素与氨苄青霉素可作为GBS预防性用药的常规首选药物。但临床应用价值有待进一步探讨。青霉素过敏者可考虑选用其他种类的抗菌素如氧氟沙星，万古霉素等。GBS对头孢呋辛、头孢唑啉、亚胺培南、和美洛霉素有较高的敏感性可用于治疗新生儿早发型和晚发型GBS败血症。
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论文作者:张仪华1,董爱萍2
论文发表刊物:《健康世界》2015年5期
论文发表时间:2015/10/23
标签：链球菌论文; 新生儿论文; 败血症论文; 青霉素论文; 细菌论文; 方法论文; 阳性论文; 《健康世界》2015年5期论文;