摘要:目的 探究直抗试验与交叉配血试验中采用微柱凝胶法的效果。方法 选取2310例本院输血科待输血患者的血液样本,采用卡式法、传统试管法以及聚凝胺法予以检测。结果 试管法阳性153例,阴性2157例;卡式法阳性155例,阴性2155例;卡式法主侧敏感性85.69%、次侧敏感性96.70%,主侧特异性99.89%、次侧特异性99.43%;凝聚胺法主侧敏感性85.69%、次侧敏感性84.41%,主侧特异性99.72%、次侧特异性99.39%。结论 卡式法具有较好的敏感性与特异性,操作简便、快捷,结果判断易于标准化,有较少的影响因素;卡式法交叉配血结果显示此侧敏感性比聚凝胺法高,其可以将临床没有意义抗体与自身冷凝集抗体影响有效排除,可以促使临床输血安全性的提高。
关键词:微柱凝胶法;直抗试验;交叉配血试验;应用效果
输血前受血人员需要和献血人员予以交叉配血,保证受血人员血清中未即刻或迟发性凝聚,也不具备可以破坏所输入的红细胞抗体,有助于确保输血的安全性[1]。本研究探究了直抗试验与交叉配血试验中采用微柱凝胶法的效果,现报告如下:
1资料与方法
1.1一般资料
选取2310例本院输血科待输血患者的血液样本,其中有男性1163例,女性1147例,平均年龄43.45岁。
1.2仪器与试剂
ABO血型定型试剂卡、不规则抗体检测试剂、局凝胺试剂盒、离心机以及倒置显微镜等。
1.3血型定型方法
根据卡式法说明书进行操作。
1.4直接抗人球蛋白试验
微柱凝胶卡法根据说明书进行抗人球蛋白试验操作;传统试管法把洗涤后待检测血样配制为3%浓度红细胞悬液,选择50μl加入试管内,随后加100μl抗人球蛋白试剂,充分混匀后1000rpm离心,时间为1分钟,取出轻摇对其结果予以观察,阴性结果需要予以确证试验。
1.5交叉配血试验
微柱凝胶卡法根据说明书进行抗人球蛋白试验操作;聚凝胺法根据凝聚胺试剂盒说明书进行操作;传统试管法在主侧管中将洗涤后的3%献血人员红细胞50μl与100μl受血人员血清加入,在次侧管中将将洗涤后的3%献血人员红细胞50μl与100μl受血人员血清加入,充分混匀,在37℃环境下孵育60分钟,取出采用生理盐水进行三次洗涤,加入抗人球蛋白试剂100μl,充分混匀后1000rpm离心,时间为60秒,取出轻摇对结果密切观察,阴性结果需要予以确证试验。
1.6不规则抗体筛查
利用抗人球蛋白检测卡筛查不规则抗体,根据说明书予以操作与判读。
2结果
2.1微柱凝胶卡法与试管法直接抗人球蛋白试验结果
直接抗人球蛋白试验结果:试管法阳性153例,阴性2157例;卡式法阳性155例,阴性2155例。
2.2微柱凝胶卡法、聚凝胺法与试管法交叉配血试验结果
试管法主侧阳性13例,次侧阳性121例;卡式法主侧阳性13例,次侧阳性129例;聚凝胺法主侧阳性17例,次侧阳性115例。
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2.3对比微柱凝胶卡法与聚凝胺法交叉配血结果
卡式法主侧真阳性11例,假阳性2例,真阴性2295例,假阴性2例;次侧真阳性117例,假阳性11例,真阴性2177例,假阴性4例;聚凝胺法主侧真阳性11例,假阳性6例,真阴性2291例,假阴性2例;次侧真阳性102例,假阳性13例,真阴性2176例,假阴性19例。
2.4对比微柱凝胶卡法与聚凝胺法交叉配血敏感性与特异性
卡式法主侧敏感性85.69%、次侧敏感性96.70%,主侧特异性99.89%、次侧特异性99.43%;凝聚胺法主侧敏感性85.69%、次侧敏感性84.41%,主侧特异性99.72%、次侧特异性99.39%。
2.5不规则抗体筛查结果
交叉配血主侧阳性者样本予以不规则抗体筛查试验。试管法检测主侧阳性13例,包括抗筛阳性12例与1例抗筛阴性;卡式法主侧假阳性2例中,样本血清中均有不规则抗体;聚凝胺法主侧6例假阳性样本中有2例抗筛结果阴性,3例有不规则抗体,以及1例血清中有IgM类临床没有意义抗体。
3讨论
临床输血工作的首要任务就是确保输血的安全。如果受血人员血清不规则抗体阳性,并输注了含有对应的抗原红细胞,会导致溶血性输血反应或者输注无效的情况出现。因为输血检测技术的不断发展,从ANO血型不合导致的溶血反应十分少见,临床上因为ABO系统以外的相关血型IgM类不完全抗体导致的迟发型输血反应最为[2]。
最近几年,交叉配血试验常用的两种方法有抗人球蛋白试验以及聚凝胺试验,微柱凝胶卡式配血法的作用原理与抗人球蛋白法相同。抗人球蛋白试验是一种重要的输血工作实验技术,但具有操作繁琐的特点,导致其应用受到一定限制,仅在一些特殊样本的确证试验中应用。凝聚胺技术属于高价阳离子季胺盐多聚物,溶解以后可以将红细胞表面的负电荷中和,使红细胞间的距离明显缩短,导致正常红细胞非特异性凝聚,在加入酸盐以后聚集情况会明显消散,抗体致敏的红细胞能够被聚凝胺进行不可逆的凝聚,此项技术具有操作简便的特点,但是很可能会引发一些抗体的漏检,比如抗-k等。微柱凝胶免疫试验是一种把抗原抗体和凝胶分子筛技术相结合,其本质就是血凝试验,红细胞抗原抗体在微柱腔的凝胶介质中出现肉眼可见的一种免疫凝集反应。此种技术具有操作简单、便捷、高灵敏度等特点,现阶段,在先进国家已经成为一种常用的红细胞血型血清学检测手段,在国内检测工作中的应用范围也明显扩大[3]。
本研究结果表明:微柱凝胶卡式法在操作的过程中不需要对红细胞进行洗涤,比传统试管法更加简便;聚凝胺法虽然操作时间较短,但因为其在室温下进行操作,不能将临床无异议抗体的影响有效排出,本身冷凝集样本也不能有效排出除。
为了全波临床输血安全性,需要采用具备较高灵敏度的方法,还可以采用几种方法联合的方式。伴随微柱凝胶法的持续发展,此项技术与抗人球蛋白试管法结合,属于现阶段临床实验室对IgG类抗体检测较适合的手段,进而促使临床输血具有安全性。
参考文献:
[1]李兰霞,郭改玲,马涛,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用研究[J].世界临床医学,2016,10(16):240-241.
[2]李凌波,王迪,王冬倩,等.微柱凝胶法在直抗试验及交叉配血试验中的应用[J].中国煤炭工业医学杂志,2015,18(6):936-939.
[3]王娜,陈玉娟.直抗阳性导致交叉配血次侧不合的肿瘤患者红细胞输注疗效观察[J].实验与检验医学,2016,34(4):431-434.
作者简介:王志富(1964年11月-)昭通镇雄,汉族,主管检验师,中专,主要从事临床检验和血库工作。
论文作者:王志富
论文发表刊物:《医师在线》2017年4月上第7期
论文发表时间:2017/6/14
标签:阳性论文; 抗体论文; 凝胶论文; 阴性论文; 红细胞论文; 球蛋白论文; 试管论文; 《医师在线》2017年4月上第7期论文;