韦浪 杨日芳 李桃山 王娜 梁永赞 何胜 张树球（通讯作者）
（右江民族医学院重金属与氟砷毒物研究实验室 广西百色 533000）
【摘要】目的 采用高效液相色谱(HPLC)测定海尔福口服液中甘草酸含量,并与甘草药材提取液进行对比分析。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱: Acclaim ? 120 C18 5 μm (4.6×250mm) 流动相: 甲醇-水-冰乙酸(71:28:1) 波长: 250nm 流速:1.0ml/min。结果 （1）甘草药材1醇提液甘草酸含量为28.900±0.221 mg/g生药；（2）甘草药材1水提液甘草酸为19.360±0.029mg/g生药；（3）旧甘草药材水提液甘草酸含量为13.217±0.064mg/g生药；（4）海尔福口服液中甘草酸含量为 11.887± 0.186mg/g生药；（5）甘草药材2水提液甘草酸为25.907±0.619mg/g生药；各样品甘草酸含量比较,p<0.01,差异均有统计学意义;加样回收试验平均为109.88%,进样20μl测定浓度在0.04—0.32mg/ml按峰高值计有良好线性关系,相关系数为R=0.9984,精密度RSD%=0.45%。结论 该法测定准确, 线性关系好,可用于海尔福口服液质量控制.
【关键词】 高效液相色谱(HPLC) 海尔福口服液 甘草酸
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）32-0095-02
Determination of Glycyrrhizic acid content in Hai er fu oral liquid by HPLC
Wei lang Yang Ri-fang Li Tao-shan Wang na Liang Yong-zan Zhang Shu-qiu
(Heavy metals and fluoride arsenic poison Research Laboratory, Youjiang Medical College For Nationalities, Baise,Guangxi,533000)
【Abstract】 Objective Determination of Glycyrrhizic acid content in Hai er fu oral
liquid by HPLC, and comparative analysis with Licorice extract. Method Using high-performance liquid chromatography, the determination was performed on an Acclaim ? 120 C18 5 μm (4.6×250mm) column, with the mobile phase was methanol - water -glacial acetic acid (71:28:1) at a flow rate of 1.0ml/min, and the detection wavelength was 250 nm. Result (1) The Glycyrrhizic acid content of Licorice 1 alcohol extract was 28.900±0.221 mg/g crude drug;(2) The water extract of licorice 1 Glycyrrhizic acid was 19.360±0.029mg/g crude drug ;(3) The Glycyrrhizic acid content of old licorice extract was 13.217±0.064mg/g crude drug;(4) The content of Glycyrrhizic acid in Hai er fu oral liquid was 11.887± 0.186mg/g crude drug;(5) The water extract of licorice 2 Glycyrrhizic acid was 25.907±0.619mg/g crude drug; compared the content of Glycyrrhizic acid in all samples, p<0.01, the differences were statistically significant; The results of recovery test for an average of 109.88%, Determination of the concentration of 20 μ l at 0.04- 0.32mg/ml according to the peak value meter had a good linear relationship between the sample, The correlation coefficient was R=0.9984, The precision of RSD% was 0.45%. Conclusion: This method has accurate determination and good linear relationship, can be used for the quality control of Hai er fu oral liquid.
【Key words】 HPLC Hai er fu oral liquid Glycyrrhizic acid
一种预防和治疗氟铅汞砷中毒的药物及其生产方法（商品名:海尔福口服液,专利号:200410013166.3)是我校的专利项目,为复方中药制剂,含金银花,甘草,茯苓等中药,经水提取精制而成,具有清热解毒,促进重金属汞铅及氟砷等毒物排泄功能。有多种有效成分,甘草酸是其中之一。本实验采用高效液相色谱(HPLC)方法,研究测定其在产品中的含量,可作为质量控制的指标,现将实验方法和结果报道如下。
1 仪器与色谱条件
1.1 仪器
DIONEX UltiMate3000型高效液相色谱仪（戴安中国有限公司，美国产），SRD-3X00在线脱气试剂架（选配）、XPG-3X00系列泵、7725i手动进样/WPS-3000系列自动进样、TCC-3X00系列柱温箱(选配)、检测器(VWD-3X00紫外检测器/PDA-3000二极管阵列检测器/RI/ELSD/RF等)等；DL-180B智能超声波清洗器（上海之信仪器有限公司）；分析天平(型号TG328B，器号49050，上海精科天平)。
1.2 色谱条件[1]
固定相：色谱柱：Acclaim ? 120 C18 5 μm (4.6×250mm) ，柱温30℃[1][2]；流动相：甲醇：水：冰乙酸（71:28:1）[3][4]，测定前用超声波脱气10min，流速为1ml/min，检测：UV为250nm[5]，进样量20ul。
2 试剂与实验药材
甲醇(色谱纯,天津市大茂化学试剂厂)；冰乙酸(色谱纯,天津市津科精细化工研究所)；水(三重蒸馏去离子水)；甘草酸二钾对照品(装量100mg，中国药品生物制品检定所，批号100551-200401)；海尔福口服液,由本院海尔福研制中心提供的样品,由金银花、甘草、茯苓等中药组成。甘草药材，购自本市药店；旧甘草药材，购自本市药店，本实验室(室温)已保存十年以上。
3 试验方法[5]
3.1 甘草酸二钾对照品的制备 精密称取甘草酸二钾对照品10mg置25ml容量瓶中，加甲醇至刻度,摇匀，得储备液0.4mg/ml，精密量取1ml至10ml容量瓶，加甲醇至刻度，得对照品溶液0.04mg/ml。
3.2 供试品的制备[2]
3.2.1甘草药材1醇提液的制备[3]
精密称取甘草药材约2g，加75%乙醇水浴回流提取，30分钟，回流提取两次，合并提取液，浓缩，回收乙醇，浓缩液用乙醇溶解，用流动相稀释至10ml。精密量取2.5ml于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜过滤，即得供试品。
3.2.2 甘草药材1水提液的制备[4]
精密称取甘草药材约2g，加水回流提取，40分钟，回流提取两次，合并提取液，浓缩，浓缩液用乙醇溶解，用流动相稀释至10ml。精密量取2.5ml于10ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，用0.45μm滤膜过滤，即得供试品。甘草药材2水提液和旧甘草药材水提液依此法制备，得供试品。海尔福口服液,由本院海尔福研制中心提供的样品,由金银花、甘草、茯苓等中药组成,经水提取,醇沉,过滤,回收乙醇,定容,灌装密封,高压105℃灭菌等工艺制成.用时精密定量吸取口服液,用上述方法稀释定容, 用0.45μm滤膜过滤，即得供试品。
4 结果
4.1 系统适用性试验 分别取对照品溶液,样品(供试品)溶液注入色谱仪,记录图谱.对照品甘草酸二钾保留时间10.86min,理论塔板数2000以上; 供试品甘草酸保留时间10.86min,理论塔板数2000以上。
4.2 线性考察试验(标准曲线绘制)
从储备液中取甘草酸二钾对照品溶液1ml、2ml、4 ml、6ml,、8ml，分别加甲醇稀释至10ml（0.04、0.08、0.16、0.24、0.32mg/ml），摇匀，即得供试品，测定结果如下，见表1和图一：
图1.甘草酸标准峰,时间:10.85min 图2甘草酸标准曲线
表1 甘草酸二钾对照品测定结果（x-）
浓度 (mg/ml)0.040.080.160.240.32
峰高值 (h)5.71611.58923.39835.52644.367
峰面积(s)4.90110.38121.04031.88739.149
方差分析：R=0.9984
结果表明, 浓度 (mg/ml)在0.04-0.32范围内,有良好的线性关系。
4.3 精密度试验
将配好的甘草酸二钾对照品用高效液相进样测定，连续六次，测定其峰高，测得甘草酸二钾的RSD值为0.45%。说明该方法精密度较好。
4.4 加样回收试验
精密吸取三份甘草药材2水提液，再精密称取甘草酸二钾对照品三份，分别加入三份甘草药材2水提液中，即得供试品。根据结果计算，甘草酸二钾的平均回收率为109.875%.
4.5 样品中甘草酸测定结果
将样品进样测定，进样量为20μl,测定结果如下，见表2，图3-7：
图7加样回收0.32mg甘草酸峰
表2 样品中甘草酸测定结果（x-±s）(N=3)
甘草药材1甘草药材1旧甘草药海尔福甘草药材2
醇提液(1)水提液（2）材水提液(3)口服液(4)水提液(5)
浓度(mg/g)28.90019.36013.21711.88725.907
S ±0.2210.0290.0640.1860.619
分析：t检验,(1)比(2)，p<0.01;(2)比(3),p<0.01;(2)比(4),p<0.01;(2)比(5),p<0.01.结果显示,醇提比水提高,旧甘草药明显下降,成品(混合水提取)比单一甘草提取低,甘草药材2比甘草药材1水提高,均有统计学意义。
5 讨论
5.1实验所得结果中精密度RSD%=0.45%,线性相关系数R=0.9984，平均回收率=109.875%，测定结果表明，浓度(mg/ml)在0.04-0.32范围内,有良好的线性关系.采用HPLC法测定海尔福口服液中甘草酸含量精密度高、准确性较好，可用于海尔福生产过程的质量控制。
5.2甘草药材1醇提液和甘草药材1水提液所得含量表明，用不同溶剂提取所得含量不同；甘草存放十年，其含量并没有明显降低；海尔福口服液中甘草酸含量明显低于单纯甘草提取液的甘草酸含量，同一溶剂中同时提取多种成分，成分之间相互抑制其溶出。通过测定和比较其含量，为生产提供有力的帮助，同时也为改进生产工艺提供参考。
参考文献
[1]那顺布和，包同力嘎.HPLC法测定蒙药止咳六味散中甘草酸的含量[J].中国民族医药杂质,2012,（12）:55-56.
[2]张娟，杨中林，李萍.甘草中甘草酸的制备工艺研究[J].中成药，2007,29（5）:686-689.
[3]杨辉.甘草及其制剂中甘草酸含量测定研究进展[J].中国药业，2008,17（10）：73-74.
[4]傅密宁，戴富宝，郑汗臣,等.高效液相法测定甘草中甘草酸的含含量[J].第二军医大学学报，1989,10（8）：257-260.
[5]徐秀珍，董文静，赵德华.栽培甘草中甘草酸的含量分析[J].宁夏医学院学报，2004,26（5）：351-352.
校创新项目XJACX2013； 教育厅项目, 桂教科研[200800ZL051].
饮食“八字口诀”在血液病合并糖尿病治疗中对血糖控制的作用
沈辉 王珊 解荣云 沈洁 （苏州大学附属第二医院血液科 215004）
【摘要】 血液病合并糖尿病，在治疗上有时相互影响，在饮食知识方面患者缺乏科学认识，同时血液病科的护士，糖尿病饮食知识相对薄弱、教育资源缺乏，导致患者糖尿病饮食知识知晓率、每餐量化合格率、遵医行为较为低下。我科采用糖尿病饮食“八字口诀”配图文并茂的健康教育处方进行饮食宣教，易于患者理解掌握，减少护士反复宣教的次数，达到事半功倍的效果。
【关键词】八字口诀 血糖控制 血液病合并糖尿病病人
【中图分类号】R587.1 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）32-0096-02
糖尿病发病率逐年增加，我国的糖尿病发病率已超过10%。血液病合并糖尿病也明显增多，尤其是白血病合并糖尿病是愈后不良的一个指标[1]。糖尿病本身饮食控制较严格、时间长、热量计算复杂、食品选择局限以及血液病在治疗过程中，因化疗等原因，饮食规律被打乱，最终导致血糖波动，血糖波动又影响治疗。针对这种情况，我们对血液病合并糖尿病的病人进行饮食口诀法的健康宣教：一斤蔬菜/日、二两主食/顿、三勺油、四种情况下吃水果、五种蛋白质、六克盐、七杯水、八戒烟戒酒保健康。[2]见表1,取得良好结果。
表1
八字口诀内容日常量化
1斤蔬菜/日（每日可食用时令蔬菜约1斤）
2两主食/顿（如中等碗一平碗为2两，米、面等可互为交换）
3勺油（每日摄油为三汤勺）
4种情况吃水果（1、血糖稳定的情况下2、糖分较低的水果3、两餐之间4算于总量）
5两蛋白质（1、一份牛奶（220ML）2、一个鸡蛋3、一两鱼（虾）4、一两肉5、一两豆制品）
6克盐（约等于一啤酒瓶盖 ）
7杯水（约2000ML）
8戒烟戒酒
1 对象与方法
1.1 对象
2011-02～2012-12我科收治了血液病（白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤）伴糖尿病患者56例，均符合WHO诊断标准。其中男 32例，女24例，年龄40～78岁。
1.2 方法
56例患者随机分成观察组和对照组，观察组32例，对照组24例。对照组正常给予化疗、降糖治疗及糖尿病饮食知识的宣教1小时，观察组同样给予化疗、八字口诀降糖具体内容的宣教以及记忆技巧1小时，并配形象的图片，加深病人的理解与记忆。2天后动态观察两组患者的饮食内容知晓率、每餐量化合格率、遵医行为及血糖变化（非化疗期），用快速血糖仪测定，观察空腹及餐后2小时血糖及1个月后测定糖化血红蛋白的变化（部分病人门诊化验）。
1.3 统计学处理
2 结果
2.1 两组患者饮食知识知晓率、饮食自我控制能力、遵医行为的比较。见表2
表2 两组患者饮食内容知晓率、每餐量化合格率、遵医行为的比较
[例（%）]
组别例数饮食知识知晓率每餐量化合格率遵医行为并发症
对照组2462.566.762.545.8
观察组3284.478.181.334.4
P值<0.01<0.05<0.01<0.05
2.2 两组患者糖代谢指标检测结果 见表3
表3 两组患者糖代谢指标检测结果
组别空腹血糖(mmol/L)P2hBG(mmol/L)Hbalt(%)（含门诊随访）
对照组7.811.37.2
观察组7.29.86.7
3 讨论
3.1 饮食健康教育的重要性 由于糖尿病患者本身要求调整饮食以控制血糖，而血液病患者又需加强营养。一般患者在饮食知识方面缺乏科学认识，不知如何控制各类食品量的摄入，易走入两个极端，导致血糖波动，严重者影响预后，这些矛盾导致患者对饮食与营养需求迫切[3]。我们针对该情况，采用糖尿病八字口诀及相应图文并茂的健康教育处方，便于患者理解及记忆。患者经过“八字口诀”的健康宣教，不仅纠正患者饮食营养误区，提高了对营养的认识，而且控制了血糖的波动，有利于血液病化疗的进行及防止并发症的发生。观察组血糖变化及糖代谢指标明显好于对照组。
3.2 血液病合并糖尿病的饮食特殊性 在治疗过程中，饮食控制和血液病的饮食支持是一对非常突出的矛盾[4]。血液病是消耗性疾病，如果没有足够的外源性能力供应，就会使机体增加自身蛋白质的分解而加重营养不良，致抵抗力下降[5]。适当增加每日供给的总热量，不过分限制碳水化合物的摄入，因增加蛋白质的摄入量至1.5g/（kg.d），禁食高嘌呤食物，饮水量保证在2000ml以上及碱化尿液。采用糖尿病“八字口诀”后，患者能掌握饮食标准的基线。
3.3 非内分泌科的护士，糖尿病饮食知识相对薄弱 在糖尿病饮食知识的宣教时，护士讲解不清或重点未突出或照本宣读，造成患者费解及记不住，饮食知识宣教效果欠佳。患者常常认为饮食控制就是饥饿疗法，或者认为少食主食不限食蔬菜荤菜，或者服用了降糖药就可以不控制饮食，进食食物种类及控制食物总量随意性很大。而采用糖尿病“八字口诀”进行饮食宣教后，观察组的饮食知识知晓率、每餐量化合格率、遵医行为明显好于对照组。
3.4 教育方法 非内分泌科糖尿病教育资源缺乏，没有各类食物的实物展示、没有糖尿病厨房、没有糖尿病教室等多种形式的护患互动。而且血液病患者免疫力低下，也不适合集体授课。
3.5 糖尿病“八字口诀”的易掌握性 患者对相关健康教育内容的掌握程度直接影响疾病的预后[6]。我们现在采用“八字口诀”进行饮食宣教，该口诀通俗易懂便于记忆，护士讲解简单清晰，尤其配上相应“八字口诀”健康教育处方，使得识字患者更容易记忆，不识字患者也能看图并在护士的讲解下掌握相关知识，减少反复宣教的次数，达到事半功倍的效果；患者容易理解、便于记忆，方便日常应用，对防止饮食不当引起血糖波动，能达到内分泌科控制血糖相似的水平。
参考文献
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[4]黄孟瑶，杨建英.恶性肿瘤病人伴糖尿病的饮食问题探讨[J].护士进修杂志，2001，16（9）：653-654
[5]孟照英.老年食管癌合并糖尿病手术期护理[J].护士进修杂志，2005，20（6）：540-541.
[6]李玉芬，张宝华.内科患者健康教育效果量化评价方法探讨[J].中国实用护理杂志，2004，20（4B）：15-16.
论文作者:韦浪,杨日芳,李桃山,王娜,梁永赞,何胜,张树球
论文发表刊物:《医药前沿》2013年11月第32期供稿
论文发表时间:2014-1-3
标签：甘草论文; 饮食论文; 甘草酸论文; 药材论文; 糖尿病论文; 海尔论文; 患者论文; 《医药前沿》2013年11月第32期供稿论文;