胡薇[1]2006年在《逆转录病毒载体介导的胸苷激酶靶向治疗肿瘤的研究》文中研究说明癌症是一种死亡率极高,发病率逐年递增的疾病。由于传统化疗、放疗、手术疗法的效果仍不够理想而且副作用较大,基因治疗作为一种新型的治疗手段正日益受到重视。人的端粒酶催化亚单位(Human telomerase catalytic subunite,hTERT)是端粒酶的核心成分,是迄今发现的一个最为广泛的肿瘤新标志物。在生理条件下,正常人细胞大都没有hTERT活性;而在85%～90%左右的人肿瘤细胞中hTERT活性较高,并且其活性高低与肿瘤的恶性程度相关,这预示着端粒酶可以作为肿瘤基因治疗的理想靶点。 本实验克隆了端粒酶催化亚单位核心启动子(hTERT)和血管内皮生长因子增强子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)及治疗基因胸苷激酶(Thymidine Kinase,TK),构建复合转录调控序列[VEGF]hTERT。并利用绿色荧光蛋白表达载体对[VEGF]hTERT复合转录调控序列的转录活性进行了初步的鉴定。结果表明,复合转录调控序列[VEGF]hTERT能启动绿色荧光蛋白在肺癌细胞A549内正确表达,而在人的正常肝细胞内不表达,在低氧诱导情况下,VEGF增强子能够提高hTERT核心启动子的转录活性。分别构建由复合转录调控序列[VEGF]hTERT和hTERT核心启动子调控的胸苷激酶重组逆转录病毒载体,G418筛选携带该载体的包装细胞,并进一步感染人肺癌细胞A549。结果显示,肺癌细胞A549的增殖皆受到抑制,细胞早期凋亡率和细胞周期均发生一定程度的改变,尤其是在低氧的条件下,肿瘤细胞受到抑制的程度更为明显。本实验首次进行在低氧条件下由复合转录调控序列调控治疗基因在肿瘤细胞内表达及抑制肿瘤效果方面的研究。
牛洪欣[2]2007年在《WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移抑制作用的实验研究》文中进行了进一步梳理目的研究WTp53基因联合TK／GCV、CD／5-Fc系统对结肠癌肝转移的抑制作用。方法脂质体介导WTp53基因，逆转录病毒载体基因转移系统介导TK、CD基因转染SW480细胞，G418筛选稳定转染的SW480／p53细胞、SW480／TK-CD细胞，RT-PCR鉴定目的基因整合表达。将48只裸鼠随机分为6组，脾内注射法建立结肠癌肝转移动物模型，第1组：脾内注射SW480细胞(对照组)；第2组：脾内注射SW480／p53细胞；第3组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV；第4组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射5-Fc；第5组：脾内注射SW480／TK-CD细胞，腹腔注射GCV、5-Fc；第6组：脾内注射SW480／p53与SW480／TK-CD等比例混合细胞，腹腔注射GCV、5-Fc。观察各组裸鼠的一般状况、肝转移率、肝转移瘤数目、常规病理、电镜下肿瘤组织病理学变化、肿瘤细胞凋亡指数(AI)、生存期等指标。结果WTp53基因和TK、CD基因转染顺利，成功筛选出稳定转染SW480／p53和SW480／TK-CD细胞，RT-PCR分别显示546bp、1.19kb、1.31 kb的p53、TK、CD阳性条带。各治疗组裸鼠肝转移的发生率下降，平均肝转移瘤数减少，其动物的生存期延长，肝转移瘤内的癌细胞凋亡率增高。联合基因治疗组效果最好，且WTp53与TK／GCV、CD／5-Fc有交互协同作用。结论WTp53基因和TK／GCV、CD／5-Fc系统联合应用具有协同效应，可有效地抑制结肠癌肝转移的形成。
参考文献：
[1]. 逆转录病毒载体介导的胸苷激酶靶向治疗肿瘤的研究[D]. 胡薇. 吉林大学. 2006
[2]. WTp53基因联合TK/GCV、CD/5-Fc系统对结肠癌肝转移抑制作用的实验研究[D]. 牛洪欣. 山东大学. 2007