无锡市中医医院 江苏无锡 214000
摘要：目的：研究黄氏生肌散的抗炎镇痛作用。方法：通过小鼠耳廓二甲苯致肿、冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高实验观察该制剂的抗炎作用；通过冰醋酸所致ICR小鼠扭体反应实验观察该制剂的镇痛作用。结果：抗炎作用，各组对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响：黄氏生肌散组、锡类散组肿胀度均低于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.05），其中，黄氏生肌散肿胀度明显低于空白对照组（P<0.01），黄氏生肌散组、锡类散组比较，差异无统计学意义（P>0.05）；各组对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响：黄氏生肌散组、锡类散组OD值均低于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.01）；黄氏生肌散组、锡类散组比较，黄氏生肌散组OD值低于锡类散组，差异有统计学意义（P<0.05）。镇痛作用，对冰醋酸所致ICR小鼠扭体反应的影响：黄氏生肌散组、锡类散组扭体次数均低于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。黄氏生肌散组、锡类散组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：黄氏生肌散具有显著的抗炎、镇痛作用，对该药的进一步研发及临床推广提供了科学依据。
关键词：黄氏生肌散；抗炎；镇痛；药理
黄氏生肌散是无锡市中医医院黄氏喉科的自制制剂，是江苏省非物质文化遗产黄氏喉科祖传秘方，具有清热养阴、生肌止痛的功效，长期在临床应用中，疗效显著，但对其作用机理缺乏实验研究。笔者通过动物实验对其抗炎镇痛作用进行了观察研究，现总结报告如下。
1 抗炎作用
1.1 对小鼠耳廓二甲苯致肿的影响
1.1.1 实验动物：ICR小鼠30只，雌雄各半，体重18-25g，给药前后，实验小鼠雌雄分笼饲养。购自江苏省血吸虫防治研究所实验动物中心。
1.1.2 实验药物：黄氏生肌散，由无锡市中医医院喉科提供，研磨后过120目筛。锡类散，由南通精华制药有限公司生产，批号：51130704。二甲苯，由江苏省血吸虫防治研究所提供。
1.1.3 实验器材：无齿镊、眼科剪、铁锤、8mm打孔器、电子天平，由上海精科天平厂生产。
1.1.4 实验方法：将ICR小鼠30只随机分为3组，雌雄各半，每组10只。以上各组小鼠在右耳的前后两面涂布100%二甲苯0.02ml/只致炎，致炎30 min后，黄氏生肌散组及锡类散组分别于小鼠右耳炎症部位喷洒黄氏生肌散5mg和锡类散5mg，左耳不作任何处理。1h后颈椎脱臼处死动物，立即沿耳廓基线剪下左右耳片，洗去残留药粉，于相同部位用直径8mm打孔器冲下等面积左右耳片，用电子天平称重，精确到0.0001g。耳肿胀度=右耳片重-左耳片重，肿胀抑制率% =（空白对照组平均肿胀度-给药组平均肿胀度）/空白对照组平均肿胀度×100%，比较各组差异。[1][4]
1.1.5数据统计：各组数据以xˉ±s表示，作多样本均数方差分析（q检验），采用SPSS16.0软件进行统计学处理。
1.1.6实验结果：黄氏生肌散组、锡类散组肿胀度均低于空白对照组，差异有统计学意义（F=7.9365，P<0.05），其中，黄氏生肌散肿胀度明显低于空白对照组（P<0.01）。黄氏生肌散组、锡类散组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结果见表1。
1.2 对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响
1.2.1 实验动物：ICR小鼠30只，雌雄各半，体重18-25g，给药前后，实验小鼠雌雄分笼饲养。购自江苏省血吸虫防治研究所实验动物中心。
1.2.2 实验药物：黄氏生肌散，由无锡市中医医院喉科提供，研磨后过120目筛。锡类散，由南通精华制药有限公司生产，批号：51130704。半合成脂肪酸、生理盐水、伊文思蓝、冰醋酸，均由江苏省血吸虫防治研究所提供。将黄氏生肌散、锡类散均匀混于半合成脂肪酸，制成浓度0.68g/10ml的混悬溶液。并隔水融化摇匀，0.1ml/10g取药灌胃。
1.2.3 实验器材：TDL-5台式离心机，由上海安亭科学仪器厂生产；7550分光光度计，由惠普上海分析仪器有限公司生产。
1.2.4 实验方法：将ICR小鼠30只随机分为3组，雌雄各半，每组10只。黄氏生肌散组、锡类散组分别小鼠连续灌胃3天，每日2次，空白组不给药，末次给药后60min，各组小鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.1ml/10g，随即腹腔注射0.6%冰醋酸生理盐水溶液0.2ml/只，20min后处死，剪开腹壁肌肉，以5ml生理盐水洗涤腹腔，并吸出洗涤液，将吸出洗涤液合并后，3000rpm离心15min，取上清液于7550型分光光度计590nm波长处测定OD值，比较各组差异。[2][4]
1.2.5 数据统计：各组数据以xˉ±s表示，作多样本均数方差分析（q检验），采用SPSS16.0软件进行统计学处理。
1.2.6 实验结果：黄氏生肌散组、锡类散组OD值均低于空白对照组，差异有统计学意义（F=32.062，P<0.01）。黄氏生肌散组、锡类散组比较，黄氏生肌散组OD值低于锡类散组，差异有统计学意义（P<0.05）。结果见表2。
2 镇痛作用
2.1 实验动物：ICR小鼠30只，雌雄各半，体重18-25g，给药前后，实验小鼠雌雄分笼饲养。购自江苏省血吸虫防治研究所实验动物中心。
2.2 实验药物：黄氏生肌散，由无锡市中医医院喉科提供，研磨后过120目筛。锡类散，由南通精华制药有限公司生产，批号：51130704。半合成脂肪酸、生理盐水、冰醋酸，均由江苏省血吸虫防治研究所提供。将黄氏生肌散、锡类散均匀混于半合成脂肪酸，制成浓度0.68g/10ml的混悬溶液。并隔水融化摇匀，0.1ml/10g取药灌胃。
2.3 实验方法：对冰醋酸所致ICR小鼠扭体反应的影响 将ICR小鼠30只，雌雄各半，随机分为3组，每组10只。黄氏生肌散组、锡类散组分别小鼠连续灌胃3天，每日2次，空白组不给药，于末次给药45min后，各鼠腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只，记录各组小鼠注射冰醋酸后15min内扭体次数。[3][4]
2.4 数据统计：各组数据以xˉ±s表示，作多样本均数方差分析（q检验），采用SPSS16.0软件进行统计学处理。
2.5实验结果：黄氏生肌散组、锡类散组扭体次数均低于空白对照组，差异有统计学意义（F=27.001，P<0.01）。黄氏生肌散组、锡类散组比较，扭体次数差异无统计学意义（P>0.05）。结果见表3。
3 讨论
口腔溃疡是一种常见的发生于口腔粘膜的溃疡性损伤病变，是口腔粘膜的炎症反应，发作时局部疼痛明显，所以抗炎和镇痛是基本的治疗原则。
黄氏生肌散是无锡黄氏喉科祖传秘方，始用于清康熙年间，数百年的临床应用提示该药对口腔溃疡的疗效稳定、可靠、可信。本制剂由雄黄、煅石膏、青黛、黄柏、蒲黄、黄精、甘草、冰片等组成。方中的雄黄是具有解毒杀虫作用的矿物药；黄柏有清热燥湿、解毒疗疮的功效；青黛清热解毒凉血；煅石膏生肌敛疮止血；黄精则益气养阴；甘草清热解毒、缓急止痛；冰片通诸窍、消肿止痛。诸药合用共奏清热养阴、生肌止痛等功效。吹在患处，药直达病所，起效迅速。现代药理研究表明雄黄、青黛有抗菌、抗病毒作用；煅石膏能增加巨噬细胞吞噬能力；黄柏有抗病毒、抗菌、抗炎、抗溃疡、抗氧化、调节免疫等作用；蒲黄具有抗炎作用；黄精对免疫系统有调节作用；甘草有肾上腺皮质激素样作用、抗消化道溃疡、抗炎、调节免疫、抑菌抗病毒；冰片抗炎镇痛。[5]
二甲苯致小鼠耳肿胀实验是将二甲苯涂于小鼠耳部皮肤，因其局部刺激作用，导致局部毛细血管通透性亢进、渗出和水肿。本实验中黄氏生肌散抑制了小鼠耳肿胀，反应了黄氏生肌散的抗炎作用。而冰醋酸致腹腔毛细血管通透性增加中，黄氏生肌散减轻了冰醋酸致腹腔毛细血管通透性的增加，降低伊文思蓝从毛细血管向腹腔内渗出，具有抑制炎症早期毛细血管通透性增高的作用，提示黄氏生肌散具有明显的抗炎作用。本实验还表明黄氏生肌散对醋酸所致小鼠疼痛（扭体法）有明显抑制作用，证明该制剂有明确的镇痛作用。[4][6]
本实验中对照组所选用药锡类散源于清代·尤在泾的《金匮翼》一书，由象牙屑、珍珠、牛黄、青黛、冰片、壁钱、人指甲7味药组成，主治咽喉糜烂、唇舌肿痛。全方具有清热解毒、消肿敛疮、祛腐生肌、消炎止痛功效。[6]是治疗口腔溃疡的国药准字号药物，临床疗效确切，与实验药物剂型一致，同为散剂。本实验结果表明，黄氏生肌散与锡类散在抑制小鼠耳廓肿胀和镇痛作用方面，两者之间无差异；在对冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的抑制作用上，黄氏生肌散优于锡类散，说明黄氏生肌散的抗炎作用稍优于锡类散。
本实验研究结果提示该药具有显著的抗炎、镇痛作用，对该药的进一步研发及临床推广提供了科学依据。
参考文献：
[1]刘运磊，景蓉，李宝莉.龙眼核组方镇痛抗炎作用的机理性研究[J].陕西中医，2015，36（11）：566-1567.
[2]王正国.胆可宁丸抗炎、镇痛作用的实验研究[J].光明中医，2012，27（l2）：2432-2434.
[3]徐华明，江国荣，张露蓉，等.金黄乳膏抗炎镇痛作用的实验研究[J].中医正骨，2011，23（9）：14-16.
[4]陈奇.中药药理研究方法学[M].第3版.北京：人民卫生出版社，2011：37—49，706—712．
[5]侯家玉.中药药理学[M].北京：中国中医药出版社，2002：24－220．
[6]高月平，倪荷芳，朱萱萱，等.锡类散治疗慢性宫颈炎的机理研究[J].中华中医药学刊，2007，25（8）：1617-1619.
基金项目：无锡市卫生局青年项目（Q201205）江苏省中医药管理局项目（LB13006）
作者简介：刘赟（1981～），女，江苏靖江人，副主任中医师，主要从事口腔黏膜病的中医研究。
论文作者:刘赟,任思秀,季红健,晏英
论文发表刊物:《健康世界》2017年20期
论文发表时间:2017/11/30
标签：小鼠论文; 黄氏论文; 作用论文; 冰醋酸论文; 统计学论文; 抗炎论文; 差异论文; 《健康世界》2017年20期论文;