（云南省中西医结合医院，云南昆明，650031）
【摘要】目的 研究P16和Ki-67蛋白在宫颈组织中的表达，探讨它们在宫颈病变中的诊断价值。方法 采用免疫组化Envision法，观察研究P16和Ki-67在宫颈不同病变中的表达,其中宫颈炎46例，上皮内瘤变(CIN)82例，鳞状细胞癌5例。结果 P16和Ki-67在正常宫颈组织中的阳性表达率明显低于CIN及宫颈癌，且随着CIN级别的增高，表达逐渐增强。结论 联合运用P16和Ki-67蛋白能很好的鉴别宫颈良性病变、CIN及宫颈癌，有助于CIN的分级。
【关键词】 P16;Ki-67; 宫颈上皮内瘤变;宫颈癌
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）19-0407-01
宫颈癌是妇科常见的三大恶性肿瘤之一，全球每年有新发病例近50万，中国每年新发病例13万多，其病死率居各类妇科肿瘤之首[1]。宫颈癌最常见的组织学类型是鳞状细胞癌，目前研究证明几乎所有的宫颈浸润性鳞状细胞癌都要经过宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）阶段，因此，早期准确诊断、治疗CIN对预防或减少宫颈癌具有十分重要的意义[2]。本文通过观察P16与Ki-67蛋白在宫颈病变中的表达情况，探讨它们在宫颈病变，特别是CIN中的病理诊断价值。
1 资料与方法
1.1一般资料 收集2014年1月1日至2014年12月31日云南省第二人民医院活检或锥切宫颈病例133例，年龄27—68岁，全部行病理检查，其中慢性宫颈炎（上皮增生鳞化）46例，CINI级38例，CINII级33例，CINIII级11例，宫颈鳞状细胞癌5例。大部分病例无明显临床症状，因常规妇科检查发现，有临床症状者多表现为接触性出血或白带异常（量多、味臭、带血丝等），仅1例表现为阴道流液。
1.2方法 所有标本均经10%的中性福尔马林固定液固定，常规石蜡包埋，连续切
孙蕊，女，云南省中西医结合医院
1．通讯作者：谢余澄 昆明市儿童医院病理科，邮箱，718721574@qq.com，电话：15911549154
2. 谢翩 云南省第二人民医院病理科
片5μm厚，进行HE及免疫组化染色，采用Envision两步法，PH6.0柠檬酸缓冲液高压修复，DAB显色。以已知阳性对照片为阳性对照，以PBS液代替一抗作为空白对照。
1.3结果判定 P16阳性判定标准：定位于细胞核和细胞质，呈淡黄色、棕黄色或棕褐色颗粒，分布于局灶或局限于鳞状上皮基底层为（+）；分布于鳞状上皮下1/3-2/3为(++)；下2/3-全层为（+++）。Ki-67阳性表达于细胞核，呈棕黄色颗粒或棕黑色颗粒，阳性细胞仅限于鳞状上皮基底、副基底层为（-）；阳性细胞≤25%的为（+）；（26-50）%的为（++）： （51-75）%的为（+++）：≥75%的为（++++）
2 结果
P16蛋白在正常宫颈组织中几乎不表达，随着CIN级别增加，表达逐渐增强，在宫颈癌中过度表达，详见表1
表1 P16、Ki-67在宫颈病变中的表达
3 讨论
宫颈癌的发生是从CIN、原位癌、浸润癌的渐进过程，早期筛查和诊断是降低发生率的关键[4]。CIN是宫颈癌癌前病变，是宫颈癌发生、发展过程中相关的敏感指标，发现并治疗CIN对阻断癌前病变的发展、减少宫颈癌的发生，有着重要的意义。同时，CIN的级别不同，其自然转归和具体治疗方案也不同[3]，所以，准确鉴定CIN级别也很重要。
P16基因定位于人第9号染色体短臂2区1带，由3个外显子和2个内含子组成，是细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂，直接参与细胞周期的调控[5],阻止细胞从G1期进入S期，抑制细胞增殖。当P16失活时，容易导致恶性肿瘤的发生，P16蛋白是子宫颈上皮细胞异型的标记物[6]。Ki-67定位于人第9号染色体，是一类与细胞周期高度相关的细胞核非组蛋白，于1983年首次发现，在增殖细胞的G1、S、G2、M期表达，是一种敏感的细胞增殖相关核抗原，Ki-67的表达量可以简单、准确地分析细胞的增殖情况，与肿瘤的分化程度、浸润转移及预后密切相关，对预测癌前病变向恶性病变转化有重要的参考价值，对恶性肿瘤的早期诊断，早期治疗有指导意义[7，8]。
P16在正常宫颈组织至CIN，直至最终发展为宫颈癌的过程中，呈现一个渐进表达过程，与肿瘤细胞生长失控有密切的关系；“正常”宫颈组织、CIN和宫颈癌组织中的Ki-67阳性表达有显著差异，表明宫颈癌的发生，发展与细胞增殖有密切关系。此外，宫颈癌及CIN中P16的表达强度与Ki-67指数间呈现正相关。
4 结论
P16、Ki-67蛋白表达的强度与CIN的分级明显相关，联合检测可以鉴别在组织学中易与CIN病变相混淆的老年萎缩性改变，鳞状上皮化生及一些良性鳞状上皮增生性病变；同时，依据它们的表达强度，为CIN的级别判定提供客观性指标，为临床诊疗对策的制定提供确实有效的帮助。不仅对病理形态学的诊断很有帮助，而且对帮助临床制定合理的治疗方案，降低宫颈癌的发生率和死亡率都有很重要的意义！
参考文献
1.曹泽毅.中华妇产科学.第二版，北京：人民卫生出版社，2004，11：2012
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5. Khoo CM , Carrasco DR , Bosenberg MW, et al. Ink4a/Arf tumor suppressor does not modulate the degenerative conditions or tumor spectnun of the telomerase-deficient mouse . Proc Natl Acad Sci USA, 2007，104(10):3931-6.
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7.Tawfik k,kimler BF,Davis MK,etal.Ki-67 expression in axillary lymph node metastases in brest cancer is prognostieally significant.Hum Pathol,2013,44(1):39-46
8.Salit IE,Tinmouth J,Chong S,et al. Screening for HIV-associated anal cancer. correlation of HPV genotypes, P16, and E6 transcripts with anal pathology. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2009，18 ( 7 ) :1986-92.
论文作者:孙蕊,谢余澄1,谢翩2
论文发表刊物:《医师在线》2018年10月19期
论文发表时间:2019/3/20
标签：宫颈癌论文; 宫颈论文; 细胞论文; 阳性论文; 蛋白论文; 云南省论文; 病理论文; 《医师在线》2018年10月19期论文;