郑州市儿童医院检验科 河南郑州 450053
摘要：人类巨细胞病毒感染是造血干细胞移植患者早期的主要感染并发症及死亡原因，既往因巨细胞病毒感染导致的间质性肺炎死亡率高达80%以上。巨细胞病毒属于人类疱疹病毒乙组DNA病毒，在人群中感染非常普遍（80%一100%），正常人感染巨细胞病毒后，由于机体免疫功能正常，巨细胞病毒在感染细胞内复制水平低下，以一种潜伏整合状态存在，通常无临床症状。
关键词：巨细胞病毒；抗体检测；婴幼儿肺炎
一、前言
人巨细胞病毒属疱疹病毒科β病毒亚科，是一种双链线状DNA病毒，直径180~250 nm，具有潜伏性、活动性的生物学特征，人是其唯一的自然宿主，人巨细胞病毒是世界范围内婴幼儿中最常见的感染性疾病之一。巨细胞病毒的主要感染途径是与被感染病人有过接触史，包括接触被感染病人的唾液、生殖器分泌物、尿液和乳汁，同时也可通过胎盘传播或发生医源性传染（输血，移植手术）。巨细胞病毒在人群中普遍存在，一般呈潜伏性感染，多不发病，临床上容易误诊或漏诊而延误治疗。婴幼儿等人群免疫功能低下极易感染，感染以肺脏、肝脏受累多见，感染后临床表现缺乏特异性，通常以反复难治性肺炎为主，因此早期诊断 人巨细胞病毒感染能够及时有效进行抗病毒治疗，这是减少患儿并发症的关键。
本文研究目的：研究血清巨细胞病毒抗体检测在婴幼儿肺炎诊断中的意义；方法：对90例今年在我院确诊为婴幼儿肺炎的患儿进行外周血HCMV-IgM和尿液HCMV-DNA 的检测，分别采用酶联免疫捕获法（ELISA）、荧光定量聚合酶链反应（PCR）对收集的血清及尿液进行检测。结果90 例婴幼儿肺炎中确诊为HCMV感染的36例，其中27例血清HCMV-IgM检测阳性，阳性率占75%，31例尿液HCMV-DNA 检测阳性，阳性率占86%。对检测出巨细胞病毒的患儿进行临床跟踪调查发现用更昔洛韦等药物治疗后疗效显著。结论：婴幼儿肺炎中巨细胞病毒感染所占比率高，通过血清HCMV-IgM 及尿液HCMV-DNA 的联合检测能够给临床提供一个治疗依据，有助于早期诊断、早期治疗，对减少并发症及预后至关重要。
二、研究过程
（一）研究对象
收集90例今年在我院确诊为婴幼儿肺炎的患儿进行外周血HCMV-IgM和尿液HCMV-DNA 的检测，其中27例为血清HCMV-IgM阳性，31例尿液HCMV-DNA 检测阳性，36例确诊患儿中年龄小于6个月占50%，6~12月占 19%，1~2岁占17%，2岁以上占14%，从调查发现随年龄增长感染率下降但没发现有性别及种属特异性，对确诊 HCMV的患儿同时进WBC、ALT检测，其中WBC 下降、ALT升高占27.7%，仅WBC下降占66.7%，仅 ALT升高占40%，说明血生化及常规的检测对诊断人巨细胞病毒感染无特异性。
（二）所用检测试剂
采用的酶联免疫试验检测血清HCMV-IgM由郑州安图绿科生物工程有限公司提供；采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测尿液，HCMV-DNA 其试剂盒由广州中山达安基因公司提供，结果以 HCMV-DNA大于1×103；拷贝/ml为阳性。
（三）研究方法
所有患者血清均采用ELISA检测，尿液均由PCR检测，并严格按照试剂盒说明操作，血清样本收集后在室温放置不可超过8 h，如果在8 h之内不能检测需放置在2~8度冰箱内保存，尿液则留取新鲜晨尿3 ml于无菌干燥试管中，当天检测。
临床特征：感染人巨细胞病毒患儿多表现为咳嗽，气喘，呼吸困难，厌食或拒食及持续的发热，病程长，平均约12天。
（四）检测结果
在确诊的36例阳性患儿中，血清HCMV-IgM阳性27例，尿液HCMV-DNA 阳性31例，两者均阳性的为25例，两者均阴性的为3例，血清HCMV-IgM阳性而尿液 HCMV-DNA阴性的2例，尿液HCMV-DNA 阳性血清HCMV-IgM阴性6例。如下表所示。
三、结果讨论
人巨细胞病毒感染广泛流行，常使婴幼儿及免疫力低下的人群中致病，随年龄增长患病率下降，症状减轻，病程渐短，人巨细胞病毒感染后可累及身体各个器官，可引起儿童发育迟滞、听力障碍。在本组病例中肺和肝脏是受累最多的器官，累及肺脏常表现为间质性肺炎，人巨细胞病毒肺炎临床表现缺乏特异性，故在诊断治疗中易误诊，漏诊，并且合并WBC增高的患儿对抗生素治疗效果并不明显。临床上要考虑人巨细胞病毒感染的可能。但人巨细胞病毒感染也可同时合并肺炎支原体，衣原体及其他病菌的感染，所以确诊人巨细胞病毒感染十分重要。病毒分离培养和抗原检测是诊断人巨细胞病毒感染的最直接的方法，但是这种方法样本提取困难、检测时间长、操作复杂，不易普及，酶联免疫捕获法（ELISA）检测HCMV-IgM是应用最多的检测技术之一，是评估活动性人巨细胞病毒感染的指标，但其在感染后到产生抗体有一 “窗口期”，由于HCMV-IgM抗体产生本身具有滞后性，尤其是婴幼儿免疫系统发育尚不完善，不能产生被检测数量的特异性HCMV-IgM或滞后产生 HCMV-IgM抗体，易造成假阴性结果，而且HCMV-IgM检测不易用于病毒自身复制情况的监测，PCR是目前最为准确和快速的病毒定量检测方法，能更早检测到病毒感染，甚至比出现临床症状的时间提前3~6天，而且取样方便且可进行抗病毒治疗效果的监测，感染的诊断灵敏度高和特异性强，如ELISA与PCR联合检测可进一步提高病毒的检出率。
四、结论
小儿肺炎不同病原体分布与发病年龄有相关性。病毒性肺炎主要见于婴幼儿，肺炎支原体肺炎主要见于学龄前儿童。小儿肺炎不同病原体与中医证型分布无相关性。但有一定特点，肺炎支原体肺炎以发热时间长，剧烈咳嗽为主要表现，临床以风热闭肺证多见；呼吸道合胞病毒肺炎以喘憋为主，肺气闭塞显著，临床多以痰热闭肺证多见；腺病毒肺炎多以高热为多见，早期即可出现热入营血证，可辩为风热闭肺证或毒热闭肺证。
由于正常健康人群常存在巨细胞病毒或肺炎支原体感染而导致相关病原学或血清学抗体检测呈阳性，但该人群属于隐性感染，无任何临床症状及不良表现，该现象与本结果相符合。因此单纯针对巨细胞病毒或肺炎支原体抗体进行检测，即使检测结果阳性，并无实际临床意义。因此单纯针对血清巨细胞病毒或肺炎支原体抗体进行检测不值得临床采用。本结果亦显示，双阳性的检出率在患病人群和健康人群间存在显著差异。因此，对可疑呼吸道感染患儿进行上述全面检测，若检测值均为阳性，可基本确诊相关致病生物并给予针对性用药治疗。总之，双阳性检出率具有重要的临床意义和治疗价值，值得临床大力推广应用。
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论文作者:葛丽丽
论文发表刊物:《健康世界》2015年29期供稿
论文发表时间:2016/4/14
标签：肺炎论文; 病毒论文; 巨细胞论文; 阳性论文; 尿液论文; 血清论文; 婴幼儿论文; 《健康世界》2015年29期供稿论文;