朱坚胜[1]2001年在《急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究》文中提出近年来，肝病与内毒素血症的关系日益受到人们重视。大量动物实验及临床研究表明各种肝损伤均可发生内毒素血症，其中急性肝功能衰竭内毒素血症更为常见，发病率高达58-100％。预防肝病内毒素血症的形成是改善肝病患者预后的重要手段。本实验用硫代乙酸胺诱导建立急性肝功能衰竭大鼠模型，研究急性肝功能衰竭大鼠门静脉内毒素水平，并探讨内毒素升高的原因，同时观察胃肠粘膜保护剂思密达对急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的预防作用。 材料与方法1．实验动物 SD雌性大鼠65只，体重180-220g，随机分成3组，正常对照组15只，急性肝功能衰竭组25只，急性肝功能衰竭治疗组25只。2．主要材料和方法 硫代乙酰胺由上海化学试剂站中心化工厂生产，配成30mg/ml。思密达由博福一益普生制药有限公司生产，其主要成分为双八面体蒙脱石（一种硅酸铝盐），按3g/50ml配制。普通营养琼脂培养基、伊红美兰琼脂培养基由浙江省卫 生防疫站提供：O 急性肝功能衰竭组：硫代乙酚胺按300 mg从g，皮下注射， 每天 1次，连续 2天。急性肝功能衰竭治疗组：在急性肝功能 衰竭造模同时应用思密达灌胃，每次灌胃Zml，每天2次厂正常 对照组：用生理盐水作对照。3组同时实验，第3天剖腹进一 步实验，进一步实验前禁食12小时。 3。门静脉内毒素测定及胃肠细菌培养 无菌状态下抽取门静脉血D．sml，作内毒素定量测定（偶 氮显色法）。同时取全胃，近段空肠10cm，远段回肠10cm， 用生理盐水sml冲洗，取冲洗液备0·2 ml加入普通营养琼脂 培养基、伊红美蓝琼脂培养基分别作细菌菌落计数及肠杆菌 计数。 4．胃肠病理观察 先肉眼观察胃肠病理改变，并留取胃肠标本，10％福尔 马林固定，石蜡切片，染色镜检。 5．统计学分析 统计数据以 X土 S表示，采用 t检验。P＜0．05表示有显着 意义，P＜0．01表示有非常显着意义。 结果和讨论 1．动物观察： 急性肝功能衰竭组。急性肝功能衰竭治疗组大鼠在硫代 乙酚胺皮下注射1次后均出现不同程度精神萎靡、进食减少， 注射2次后，二组动物活动少，反应减退，部分不能进食，并 逐渐发展至嗜睡，尤以急性肝功能衰竭组明显，到剖腹实验 时，急性肝功能衰竭组有9只大鼠死亡，急性肝功能衰竭治 疗组有5只大鼠死亡。提示硫代乙酚胺皮下注射可诱导大鼠 急性肝功能衰竭。急性肝功能衰竭组大鼠临床表现相对较 2 重，死亡数略高于肝功能衰竭治疗组。 2．各组大鼠门静脉内毒素水平： 3组大鼠门静脉内毒素水平分别为：正常对照组为29．33 士 18．50ng／l，急性肝功能。衰竭组为 105．81土 18 ＊2 ＂g／l（与正 常对照组比较有非常显着差异，P（0刀1），急性肝功能衰 竭治疗组为 74．20士 ZI．3 8 ＂g／l（与急性肝功能衰竭组比较有 非常显着差异，P＜0刀1）。因门静脉内毒素来源于肠道， 因此门静脉内毒素水平可反映肠道－内毒素产生和吸收情况。 本研究结果可见急性肝功能衰竭大鼠八静脉内毒素水平明 显升高。提示肠道内毒素产生和吸收增多是急性肝功能衰竭 大鼠内毒素升高的主要原因。经胃肠粘膜保护剂思密达治疗 后大鼠门静脉内毒素水平明显降低，提示思密达对降低急性 肝功能衰竭大鼠门静脉内毒素水平有显着疗效。 3．胃小肠细菌培养结果： 叁组大鼠胃小肠细菌培养结果：细菌菌落总数：正常对 照组：胃 1．69土0．85（ig n／ml），空肠2．12土0＊4，口肠3．04 土0．58；急性肝功能衰竭组：胃 2．94土0．98，空肠3．60i．12， 口肠4．88土1．56（较正常对照组明显增多，P＜0．05），急性 肝功能衰竭治疗组：胃2．47士1．26，空肠3．17士0石7，口肠4石1 士0．76 较急性肝功能衰竭组细菌有所下降，P＞0．05） 肠杆菌数：正常对照组：胃0．83士0．59；空肠1．13土0刀8，口 肠2．13士1．442 急性肝功能衰竭组：胃2．48上1．06，空肠2．79、士0．35，回肠4．4士0．61（较正常对照组明显增多，其中胃、空 肠P＜O．05，口肠P＜0刀1）；急性肝功能衰竭治疗组：胃2．12 土l．18，空肠2．58士1．04，回肠3．98土0．6（较急性肝功能衰 竭组细菌有所下降，P＞0．05）。提示急性肝功能衰竭大鼠存 在肠道菌群紊乱，表现为肠道细菌明显上移、大量繁殖，细 菌菌落总数及肠杆菌数明显增多。经思密达治疗后，肠道细 3 菌菌落总数及肠杆菌数有所下降，提示思密达对急性肝功?
朱坚胜, 李兰娟, 傅素贞, 魏兰芬[2]2001年在《急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的防治研究》文中指出目的 观察胃肠粘膜保护剂思密达对肝衰竭大鼠内毒素血症的预防作用。方法 SD大鼠65只 ,随机分成3组 ,对照组15只 ,衰竭组25只 ,治疗组25只。衰竭组 :用硫代乙酰胺复制出急性肝衰竭大鼠模型。治疗组 :在肝功能衰竭造模同时应用思密达灌胃 (思密达3g加生理盐水50ml配制 ),每次灌胃2ml,每天2次。对照组 :用生理盐水作对照。3组同时实验 ,第3天剖腹作门静脉内毒素测定及胃肠冲洗液细菌培养 ,并观察胃肠道病理改变。结果 3组大鼠门静脉内毒素水平分别为 :对照组29.33±18.50ng/l;衰竭组105.81±18.82ng/l (较对照组明显升高P<0.01) ;治疗组74.20±21.38ng/l(较衰竭组有明显下降P<0.01)。叁组大鼠胃小肠细菌培养结果 :衰竭组较对照组细菌明显增多 (P<0.05) ,治疗组有所下降 ,但无比较意义 (P>0.05) ,胃肠病理改变 :肝功能衰竭组大鼠胃肠扩张明显 ,腔内见大量液体或气体 ,粘膜固有层变薄 ,部分胃粘膜糜烂 ,肝功能衰竭治疗组病变较轻。 结论 由硫代乙酰胺诱导的大鼠急性肝功能衰竭模型门静脉内毒素水平明显增高 ,胃肠道细菌培养提示细菌上移 ,菌落总数明显增多 ,胃肠道存在一定的病变 ,经思密达治疗后 ,门静脉内毒素水平有明显下降 ,细菌总数略有下降 ,胃肠粘膜病变改善
刘海[3]2011年在《SPV对重度创伤-失血性休克大鼠内毒素和TNF-а及肠损害的影响》文中研究指明目的:本研究根据内毒素是SIRS的触发剂理论与思密达、多粘菌素B、维生素B_6作用机理,制成一种以多粘菌素B、维生素B_6为亲和配基固定到呈层纹状结构的思密达载体上的新型内毒素亲和吸附剂(Smecta、polymyxin B、Vitamin B_6,简称SPV),经口服灌注后再复制大鼠重度创伤-失血性休克模型,然后通过测定不同时间窗大鼠血浆内毒素和TNF-α及同期对小肠黏膜病理形态学观察并计算肠黏膜损伤指数,以探讨SPV对重度创伤-失血性休克后肠源性内毒素和重要炎性介质TNF-α以及肠黏膜机械屏障的作用,探讨其临床应用可行性,为提高临床重度创伤-失血性休克救治率探索新的途径。方法:(1)通过创伤、放血制造大鼠重度创伤-失血性休克模型。(2)将88只SD大鼠随机分为对照组(Group-Ⅰ,n=8)、休克组(Group-Ⅱ, n=40)、SPV干预复苏组(Group-Ⅲ,n=40)。Group-Ⅱ又依休克1h,2h,4h,8h,16h分为Ⅱ-A,Ⅱ-B,Ⅱ-C,Ⅱ-D,Ⅱ-E五个亚组,Group-Ⅲ又依干预复苏后1h,2h,4h,8h,16h分为Ⅲ-A,Ⅲ-B,Ⅲ-C,Ⅲ-D,Ⅲ-E五个亚组,每组均为8只大鼠。(3)SPV干预复苏组:在休克模型复制前30min,给予SPV合剂(思密达0.3g+多粘菌素B 1mg+维生素B_6 10mg+生理盐水3ml)灌胃,休克模型成功复制并稳定30min后,经股静脉30min内以1.0～1.5ml/min的速度回输全部血液和2倍的林格氏液,以血压恢复至放血前的90%或以上。对照组仅行颈动静脉和股静脉穿刺插管,不放血仅取材;其他两组在达到重度创伤-失血性休克后的各实验相和干预复苏后的各实验相取材。(4)用光度法测定内毒素;放射免疫法测定TNF-α;HE染色观察肠道绒毛的形态变化并计算肠黏膜损伤指数。(5)所有数据均由SPSS 17.0软件处理,有关统计结果以均数±标准差((X|-)±S)表示。结果:(1)内毒素:重度创伤-失血性休克后,休克组大鼠血浆内毒素于1h即急剧上升,达到正常值的30余倍,并随着休克时间的延长而增加,于创伤后4小时达到高峰,8小时仍维持在较高水平。SPV干预复苏组1小时到4小时期间血浆内毒素水平有所降低,4小时后急速下降,16小时几乎接近正常含量。(2)TNF-α:重度创伤-失血性休克后,休克组大鼠血浆TNF-α随着休克时间的延长而逐渐增加,于创伤后8小时达到高峰。SPV干预复苏组早期血浆TNF-α水平有所降低,4小时后明显降低,8小时到16小时几乎接近正常含量。(3)肠黏膜损伤指数:重度-创伤失血性休克1小时后,肠黏膜损伤指数就急剧上升,达到了2.38,8小时达到了4.25,16小时达到最高峰。SPV干预复苏组损伤指数4h后急剧下降,16小时基本恢复正常。(4)TNF-α、肠黏膜损伤指数均值分别与重度创伤失血性休克大鼠血浆内毒素呈非常显著正相关(P值均小于0.01)。(5)病理变化:大鼠小肠黏膜形态病理改变随休克时间延长而逐渐加重。小肠绒毛数量减少、高度降低,出现绒毛断裂现象;黏膜厚度变薄、肠腺呈萎缩样变。与之相比,SPV干预复苏组绒毛有修复现象,小肠绒毛病理改变较轻。结论:(1)SPV混合液是一种以多粘菌素B、维生素B_6为亲和配基固定到呈层纹状结构的思密达载体上的新型内毒素亲和吸附剂,具有保护肠道黏膜、中和吸附内毒素、不被肠黏膜吸收、不易造成肝肾功能损害等药理作用。(2)重度创伤-失血性休克后炎性介质TNF-a的升高,与血浆内毒素水平直接正相关。(3)SPV可以明显改善内毒素血症,有效降低血浆TNF-a水平,减轻全身炎症反应,可能是SPV对于肠道组织结构、形态都有机械屏障保护作用的结果。由此推测,SPV可能成为今后重度创伤-失血性休克并发内毒素血症辅助治疗手段之一。
参考文献：
[1]. 急性肝衰竭大鼠内毒素血症及思密达的应用研究[D]. 朱坚胜. 浙江大学. 2001
[2]. 急性肝功能衰竭大鼠内毒素血症的防治研究[J]. 朱坚胜, 李兰娟, 傅素贞, 魏兰芬. 浙江临床医学. 2001
[3]. SPV对重度创伤-失血性休克大鼠内毒素和TNF-а及肠损害的影响[D]. 刘海. 河北联合大学. 2011