李景南[1]1999年在《蛙皮素对人胃粘膜上皮永生细胞系cyclin D1/CDK4的影响及在化学癌变中的作用初探》文中研究说明胃肠肽类激素的生长因子样效应对生长发育和肿瘤的影响已成为近年来研究的热点。蛙皮素(Bombensin)是由14个氨基酸组成的具有生长因子样作用的胃肠肽，对多种细胞和组织都有营养作用，尤其是对肿瘤细胞的促生长作用逐渐引起人们的关注。蛙皮素促进细胞生长及细胞转化的许多机制尚不清楚，与细胞周期调控因子之间的关系亦未见报道。本研究目的在于确证蛙皮素对正常胃粘膜上皮细胞的促生长作用及研究蛙皮素与细胞周期调控因子Cyclin D1和CDK4的关系，以期探索其促生长作用的机制，并在此基础上观察蛙皮素在化学致癌剂甲基硝基亚硝基胍(MNNG)诱发细胞癌变过程中的作用。 实验方法：用人胃粘膜上皮永生细胞株GES-1，采用MTT实验作为增殖指标，研究蛙皮素及受体拮抗剂([D-phe~6]BN(6-13)methyl ester)对GES-1细胞增殖的影响；用流式细胞仪观察不同浓度蛙皮素、相同浓度不同作用时间及蛙皮素与受体拮抗剂共同作用等不同条件对GES-1细胞cyclin D1表达的影响；利用Westem印迹和增强化学发光剂(ECL)自显影观察了蛙皮素对GES-1细胞作用不同时间后CDK4蛋白表达的变化；利用Sepharose微珠免疫沉淀方法检测蛙皮素作用不同时间对GES-1细胞CDK4活性的影响。在此基础上，我们使蛙皮素与化学致癌剂(MNNG)共同作用，观察经不同处理后各组细胞在光镜和电镜下的形态学改变、软
李景南, 陈元方, 钱家鸣, 陈原稼[2]2004年在《蛙皮素在人胃黏膜上皮永生细胞系化学癌变过程中的作用》文中认为背景:蛙皮素具有刺激多种正常和肿瘤细胞增殖的作用。目的:探讨蛙皮素在化学致癌剂N鄄甲基鄄N'鄄硝基鄄N鄄亚硝基胍(MNNG)诱发人胃黏膜上皮永生细胞系GES鄄1癌变过程中的作用。方法:经蛙皮素和(或)MNNG处理后,观察各组GES鄄1细胞的光镜和电镜下形态学改变,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖速度,软琼脂集落形成实验检测转化细胞的特性,流式细胞仪检测细胞周期蛋白(cyclin)D1的表达。结果:GES鄄1细胞经蛙皮素与MNNG共同处理后传至20代以上时,细胞增殖速度较MNNG单独处理的细胞加快,cyclinD1表达增高,而软琼脂集落形成率与MNNG单独处理的细胞相比无显著差异;蛙皮素与MNNG共同处理的GES鄄1细胞形态学表现为细胞排列紧密,细胞核增大,核仁增多,细胞质减少,较MNNG单独处理的细胞改变明显。结论:蛙皮素可与化学致癌剂协同促进正常上皮细胞癌变,其机制可能与cyclinD1的过表达有关。
参考文献：
[1]. 蛙皮素对人胃粘膜上皮永生细胞系cyclin D1/CDK4的影响及在化学癌变中的作用初探[D]. 李景南. 中国协和医科大学. 1999
[2]. 蛙皮素在人胃黏膜上皮永生细胞系化学癌变过程中的作用[J]. 李景南, 陈元方, 钱家鸣, 陈原稼. 胃肠病学. 2004