付光岗
四川省川中监狱医院 637100
【摘 要】目的 研究和了解特殊环境下结核分枝杆菌病犯痰涂片检出率的影响因素，对结核分枝杆菌进行耐药性分析，寻找结核病人治疗的更好方案。方法：对2016年6月—2018年6月在我院就医的196例结核病人，采用抗酸染色镜检，对培养菌进行药敏试验。结果：抗酸染色总体检出率为16.6%，A（干酪样痰）为72.4%、B（血样痰）为13.1%、C（粘液痰）为11.8%、D（水样痰（唾沫））为2.5%。对异烟肼耐药42.2%利福平耐药21.4%链霉素耐药3.8%总耐药率67.4%。结论：影响结核杆菌镜检的因素特别多如，采样的时间，检验师的能力，痰液的粘液性状，采取较好的标本对结核杆菌的检出率起到关键性的作用。
【关键词】结核病；痰涂片；耐药性
一、材料与方法
（一）标本来源
收集2016年6月—2018年6月我院胸片检查可疑结核病，来我院治疗的196例患者，年龄20-70岁，其中胸片显示在右上肺出现病灶142人，在双上肺出现病灶32，在左下肺出现病灶22人，初次接受实验室诊断治疗196人，其中经过痰液涂片抗酸染色阴性人数162人，阳性人数34。
（二）设备与材料
天平（灵敏度可达到0.01g），称量匙、称量纸、高压灭菌器、水浴锅、棕色瓶、培养箱。二级生物安全柜、漏斗、100ml烧杯、100ml量筒、2000ml烧杯。
（三）染色液配制
碱性复红液储存液，5%的石炭酸水溶液，石炭酸复红工作液经定性滤纸过滤的碱性复红储存液10ml与5%石炭酸水溶液90ml反复振荡混匀用定性滤纸过滤备用；盐酸乙醇脱色液；亚甲蓝储存液亚甲蓝复染液使用液。
（四）涂片染色
用接种环取1~2环高疑痰液，均匀的使其涂抹于载玻片上，涂片后自然干燥后用火焰快速固定，滴加石炭酸复红染液，盖满痰膜加热至出现蒸汽为止，后再染色5分钟。用清水从一端缓慢冲洗后脱色15s后用流水冲洗，滴加亚甲蓝复染后30秒用流水冲洗，然后干燥镜检。
（五）分枝杆菌培养法
培养基 按照《结核病诊断细菌学检验规程》［3］ 改良罗氏培养基，KH2PO4 2.4g，MgSO4﹒7H2O 0.24g，柠檬酸美0.6gL-天冬酰胺12ml，去离子水600ml鸡蛋匀液1000ml孔雀绿20ml。
（六）方法 196例阳性涂片标本检查出结核杆菌并分析不同标本阳性检出率
1．涂片染色
196例涂片染色所有标本使用改良罗氏培养基培养所取痰液标本，对阳性标本同时培养两份，对患者所送阴性标本选择两份性状良好符合要求的标本进行培养，对其中培养出的阳性标本培养进行药敏实验，得出相应的药敏实验结果。将所有的患者所送痰标本按物理性状分为四类，A（干酪样痰）B（血样痰）C（粘液痰）D（水样痰（唾沫））分别计算各种样本的检出率。
2．药敏试验
根据《结核病细菌学诊断操作规程》中的要求步骤对196例患者培养出阳性的标本分别进行药敏分析。采用扩散法检测异烟肼（INH）、链霉素（SM）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）、卡那霉素（KM）、氧氟沙星（OFX）。
3．耐药性判断
在含有药物的纸片观察药物环大小。
二、结果
196例胸片检查可疑结核病患者中在右上肺出现病灶所占比率为73.9%，在双上肺出现病灶所占比率21.2%，在左下肺出现病灶所占比率为4.9%。在196例痰液涂片34例阳性中在右上肺出现病灶并且痰液涂片抗酸染色阳性26人，所占比率为75.2%，在双上肺出现病灶并且抗酸染色阳性7人，所占比例19.9%，在左下肺出现病灶并且抗酸染色阳性1人，所占比率4.9%。196例胸片可疑肺结核患者中145人右上肺出现病灶并且实验室抗酸染色检查阳性所占比率15.1%，双上肺出现病灶42人，实验室抗酸染色检查阳性所占比例13.7%，其中在左下肺出现病灶，实验室抗酸染色检查9人所占比例11.5%。34份阳性标本。
（一）涂片阳性痰液物理性状比较
196例初诊病人抗酸染色镜检34例阳性阳性所占百分比率14.5%A（干酪样痰）涂阳标本人数24人为70.4%、B（血样痰）涂阳标本人数4人12.1%、C（粘液痰）涂阳标本人数5人14.8%、D（水样痰（唾沫））涂阳标本人数1人2.5%。
表2-1 74例涂片阳性各物理性状结果比较
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（四）耐多药情况
196例标本中39例阳性标本耐多药异烟肼（INH）、链霉素（SM）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）、卡那霉素（KM）、异烟肼（INH）、链霉素（SM）、利福平（RFP）、乙胺丁醇（EMB）、卡那霉素（KM）、氧氟沙星（OFX）均耐药为1人（3.9%）。
三、讨论
在影像学检查，胸片显示结核病的病患，通过实验室染色检查阳性率很低。影像学阳性实验室检查阴性，这就说明这两种方法还存在很大的差异，只有通过改进检测方法才能使检查结果的特异性和灵敏度提高。通过调查研究显示我们实验室抗酸染色镜检，镜下查见结核杆菌检出率为14.6%，结果显示我们镜检的检出率太低，这将是我们必须克服的一个难题，我们对所送标本镜检阳性按各自性状分析。A（干酪样痰）检出率为72.4%、B（血样痰）检出率为13.1%、C（粘液痰）检出率为11.8%、D（水样痰（唾沫））检出率为2.5%，结果显示标本的性状也是影响检出率的一个重要因素。
四、结论
综上所述结核分枝杆菌抗酸染色镜检灵敏度不高，影响检查率的主要因素为所采集的痰液标本性状与采样时间有关，以及进行抗结核相关治疗后L型变异是抗酸染色不易着色，为了提高检出率，须采集夜晚和早晨的干酪样痰标本最佳，或者对采集的标本进行L型细菌培养基培养一段时间在进行镜检以提高检出率。
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论文作者:付光岗
论文发表刊物:《中国结合医学杂志》2019年13期
论文发表时间:2020/1/10
标签：标本论文; 阳性论文; 涂片论文; 检出论文; 病灶论文; 性状论文; 所占论文; 《中国结合医学杂志》2019年13期论文;