谢洋
汕头市新东方酒店用品有限公司
摘要：近年来，随着人们生活水平的提高，也对化妆品认识有所提高，采用高效液相色谱法，考察了温度、pH、提取溶剂以及共存金属离子等条件对芦荟提取液中芦荟苷稳定性的影响，并通过建立校正曲线测定芦荟化妆品中芦荟苷及其分解产物的含量。样品经5mL90%甲醇30℃超声提取20min后，以甲醇-乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相梯度洗脱，经C18柱分离，在356nm波长下随机选取了7种标明添加芦荟成分的化妆品样品进行检测，结果显示，抽检的7种市售芦荟化妆品样品中1件乳液含有芦荟大黄素和大黄酚，1件爽肤水中含有大黄酚，其余均未检出芦荟苷或芦荟苷分解产物。
关键词：化妆品；芦荟苷的测定；稳定性研究
引言
近年来化妆品行业受回归大自然趋势的影响，天然功效成分已成为国内外研究与开发的热点，芦荟提取物作为一种具有多种功效的天然组分也已被广泛应用。芦荟提取物为百合科植物芦荟叶的粉末状提取物。从化学成分看，主要含两大类物质:蒽醌类化合物和芦荟多糖。芦荟含有的芦荟素和芦荟苦素具有多方面美化皮肤的效能，在保湿、消炎、抑菌、止痒、抗过敏、软化皮肤、防粉刺、抑汗防臭等方面具有一定的作用，对紫外线也有强烈的吸收作用，可防止皮肤灼伤。芦荟有很好的配伍性，能很好地与各种化妆品原料配合，并能消除多种表面活性剂对皮肤的伤害。目前，国内外测定芦荟蒽醌类化合物含量的常用检测技术是薄层色谱法、分光光度法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、液相色谱-串联质谱法等。已有很多关于芦荟蒽醌类化合物的研究报道，但是以化妆品为研究对象的报道相对较少。由于化妆品种类较多，有些样品基质较复杂，用薄层色谱法、分光光度法检测灵敏度较低，且受干扰较大。最近几年高效液相色谱法的准确度有了大大提高，应用较普遍。而液相色谱-串联质谱法检测则具有更高的抗干扰能力和灵敏度。本研究采用高效液相色谱-串联质谱仪，建立了化妆品中3种芦荟蒽醌类化合物含量的测定方法，并应用本方法检测了实际样品中3种芦荟蒽醌类化合物的含量，结果准确可靠。
1化妆品中芦荟苷的测定
1.1标准溶液的配制
分别精确称取芦荟苷、芦荟大黄素、大黄酚25.8mg、21.6mg、25.4mg于100mL容量瓶中,用甲醇溶解定容,配制成质量浓度分别为0.258mg/mL、0.216mg/mL和0.254mg/mL的储备液。分别移取上述储备液2mL于10mL的容量瓶中,用甲醇定容,配制成混合标准溶液。再将得到的混合标准溶液逐级稀释,得到5个系列质量浓度的混合标准溶液,芦荟苷、芦荟大黄素、大黄酚的质量浓度分别为(μg/mL):20.64,17.28,20.32;10.32,8.64,10.16;5.16,4.32,5.08;2.064,1.728,2.032;1.032,0.864,1.016。
1.2仪器与试剂
TSQQuantumULTＲA三重四级杆串联质谱仪，美国Thermo公司;超声仪，美国KUDOS公司;GL-88B漩涡混合器，其林贝尔仪器制造有限公司产品;高速离心机，美国Beckman公司;Milli-Q超纯水发生器，美国Milli-Q公司。甲醇为色谱纯，水为超纯水。芦荟苷、芦荟大黄素、大黄酚标准品(纯度≥95%)。芦荟苷、芦荟大黄素和大黄酚标准溶液的配制:分别准确称取50．0mg的芦荟苷、芦荟大黄素、大黄酚标准品于50mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容，制备成1．0mg/mL标准储备液。
1.3试验方法
称取样品约1.00g于15mL具塞离心管中，加入甲醇至近10mL，漩涡振荡混匀，定容至10mL。水浴中超声提取20min，以10000r/min的转速离心分离10min。上清液经孔径0.22μm的滤膜过滤后，用液相色谱-串联质谱仪进行检测。
2化妆品中芦荟苷的稳定性研究
2.1液相条件的优化
试验中分别比较了乙腈-水、甲醇-水、甲醇-0.1%(体积分数)甲酸溶液作为流动相的体系，试验结果表明在这三种流动相体系下，芦荟苷、芦荟大黄素和大黄酚三种物质的色谱峰形都较好，由于芦荟大黄素、大黄酚在酸性条件下稳定性会变差，另外考虑到试剂的毒性和经济性，最终选择甲醇-水作为流动相体系。为了得到较满意的色谱分离度，试验又比较了甲醇-水的不同体积比，芦荟大黄素、大黄酚在等度洗脱时，色谱峰出峰较晚，不利于检测效率的提高，并且经梯度洗脱能有效地去除色谱柱中残留的杂质，故选择梯度洗脱的方式。
2.2准确度和精密度
方法的准确度用样品的标准加入回收率评价。取一定量的市售芦荟粉末样品进行3个水平的目标物加标回收试验，按照优化后的前处理条件制备供试溶液，并按1.3的色谱条件测定，每个水平平行测定6次。加标回收率和相对标准偏差计算结果。结果显示，4种芦荟蒽醌物质的平均加标回收率为94.70%~112.2%，RSD≤3.7%。表明方法具有良好的准确度与精密度。
2.3线性范围和检出限
准确量取芦荟苷、芦荟大黄素和大黄酚标准储备液适量，用甲醇稀释成10、20、50、80和100ng/mL系列浓度标准溶液，分别取20μL注入液质联用仪，记录色谱峰面积，以峰面积比(Y)对进样浓度X(ng/mL)作线性回归，得线性回归方程。试验结果表明，芦荟苷、芦荟大黄素和大黄酚在10～100ng/mL的范围内，峰面积比与进样浓度之间呈现良好的线性关系。以最低浓度峰与基线噪音峰比值为1∶3计算，测得最低检出限为3ng/mL，测定结果。
2.4样品测定
对市场上所收集到的样品进行相对含量测定,结果见表3。对标明含芦荟的7种化妆品进行测定,从结果可以看出,其中芦荟苷均没有检测到,这可能是由于其在储藏期间被氧化分解的缘故。有3种化妆品中没有检出芦荟大黄素,几乎每种化妆品中都检出了大黄酚,这可以说明化妆品中都添加了一定浓度的芦荟提取液,从而也可以对化妆品的质量起到一定的评价作用。
2.5温度对芦荟苷转化的影响
为保护芦荟中功能性成分的活性，在芦荟化妆品的生产中加入芦荟成分的温度需严格控制：制备芦荟护肤美容液和芦荟化妆水时，芦荟成分可在室温下加入；制备芦荟露时，芦荟成分约在35℃时加入；制备芦荟美容乳液时，在45~50℃加入芦荟成分。因此实验分别研究了4，30，40，50和60℃下芦荟水提溶液中芦荟苷的降解转化。鉴于同分异构体芦荟苷A与B可相互转化，此处的芦荟苷指芦荟苷总量，包括芦荟苷A和B，下同。实验验证了芦荟粉水提溶液在4，30，40，50和60℃下0~120h芦荟苷的转化率。可得出以下结论：芦荟苷的稳定性随温度的升高降低，温度越高，芦荟苷降解越快。30℃下放置5d，芦荟苷的转化率为18%；40℃下放置5d，芦荟苷转化率为50%；60℃时，26h芦荟苷几乎完全降解；而低温下芦荟苷基本稳定，4℃下保存5d，芦荟苷的转化率仅为2%。
2.6芦荟化妆品样品的测定
随机选取7种市售的标明添加芦荟成分的化妆品样品，包括爽肤水、乳液、面霜、护手霜、防晒霜、芦荟凝胶，结果显示，抽检的7种市售芦荟化妆品样品中均未检出芦荟苷成分；仅1件乳液中含有芦荟大黄素和大黄酚，其含量分别为4.85和3.22μg/g；1件爽肤水中含有大黄酚，其含量为5.97μg/g。
结束语
芦荟苷在水中、高温及碱性条件下稳定性差，极易水解成芦荟大黄素、大黄酚等产物。Fe3+，Mn2+和Cu2+的共存对芦荟苷的降解转化有一定促进作用，而Pb2+则对芦荟苷的转化有一定抑制作用。芦荟苷在芦荟化妆品中可能水解，若以芦荟苷作为芦荟产品的功效成分，在芦荟产品的生产及储存过程中可选择低温、酸性和乙醇介质，以最大限度保持芦荟苷的活性；反之若需去除芦荟产品中的芦荟苷，可选择在高温、碱性和水介质条件下，以减小芦荟苷带来的不良反应。
参考文献
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论文作者:谢洋
论文发表刊物:《中国西部科技》2019年第21期
论文发表时间:2019/11/26
标签：芦荟论文; 大黄论文; 化妆品论文; 甲醇论文; 色谱论文; 溶液论文; 样品论文; 《中国西部科技》2019年第21期论文;