（资阳市中心血站 四川 资阳 641300）
【摘要】目的：证实新引进的FAME24/20全自动酶免分析系统设备性能符合实验室要求。方法：选用实验室现用的7种酶联免疫（EIA）试剂盒，利用低浓度质控品、稀释质控品、商品化血清盘以及无偿献血者阴性标本对新引进设备进行精密性试验，分析灵敏度试验和性能比对试验。结果：精密性试验：板内<15%，板间<20%，符合实验室要求；分析灵敏度试验:经检测HBsAg试剂1、HBsAg试剂2、抗-HCV试剂1、抗-HCV试剂2、抗-HIV试剂1、抗-HIV试剂2、抗-TP试剂1在FAME2上的分析灵敏度分别为0.1IU/ML、0.05IU/ML、0.125NCU/ML、1NCU/ML、0.5NCU/ML、2NCU/ML、0.5NCU/ML；性能比对试验：新引进的FAME24/20全自动酶免分析系统与现用系统检测性能一致。结论：新引进的FAME24/20全自动酶免分析系统设备性能符合实验室要求。
【关键词】 精密度；分析灵敏度；性能比对；全自动酶免分析系统
【中图分类号】R197.3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）16-0035-03
Performance Verification of FAME24/20 Automatic Enzyme I mmunoassay System
Liao Yan.
(Ziyang Blood Center,Ziyang,Sichuan641300,China)
【Abstract】 Objective To confirm the performance of FAME24/20 automatic enzyme immunoassay system meet the laboratory requirements.Method Use low concentration of quality control products, diluted quality control products, commercialized serum, free blood donors’ negative serum to perform precision, sensitivity and comparison test of FAME24/20 by seven different EIA diagnostic kit. Results The new introduced FAME24/20 system get a well performance in both precision and sensitivity, and the total coincidence rate of two system(the new introduced one VS the current used one) was 100%.Conclusion This new introduced FAME24/20 system can meet the demand of our laboratory.
【Keywords】Precision;Sensitivity;Comparison test;Automatic enzyme immunoassay system
本实验室于2012年新引进一台全自动酶免分析系统FAME24/20（瑞士哈美顿公司），依据《血站技术操作规程》2012版4.3条款规定：“新的或者经过维修后可能影响检测检测结果的检测设备在正式投入正常使用之前应经过确认。新设备的确认应包括安装确认、运行确认和性能确认……本文主要对性能确认进行相关探讨。血站实验室方法确认活动的产生通常依赖于检测过程的变化，这些变化包括实验室首次引入的检测方法，如实验室从未使用过的试剂、仪器、质控品、校准品等，仪器设备性能确认属于检测方法确认的范畴。依据ISO/IEC17025，血站血液检测方法确认应遵循法定标准方法系统适应性实验原则，如实验室采用列入法规或技术标准的检测方法，没有任何改变，只需要选择重要的指标，对方法在本实验室的适用性做确认，ELISA是定性试验方法，是GB18467-2001《献血者健康检查要求》规定的用于血液检测的标准检测方法，性能确认通常包括精密性确认、分析灵敏度确认和与现用检测系统比较的确认。
1.材料与方法
1.1 仪器
全自动标本处理系统STAR 8CH、2009年购置的全自动酶免分析系统FAME24/20（FAME1)、新引进的全自动酶免分析系统FAME24/20(FAME2),均为瑞士哈美顿公司提供。
1.2 试剂
可将本实验室使用7种ELISA试剂分为两组。1组包括HBsAg试剂1、抗-HIV试剂1、抗-HCV试剂1、抗-TP试剂1，2组包括HBsAg试剂2、抗-HIV试剂2、抗-HCV试剂2,1组均为国产试剂，2组均为进口试剂。相关批号如下：1）HBsAg诊断试剂盒：试剂1批号：2011085122；试剂2批号：D047210。2）抗-HIV诊断试剂盒：试剂1批号：2011086615；试剂2批号：1J0199。3）抗-HCV 诊断试剂盒：试剂1批号：2011105823；试剂2批号：V900920。4）抗-TP诊断试剂盒：试剂1批号：2011097520。
1.3 质控品
HBsAg标准物质(0.2IU/mL,批号2011080030）抗-HCV标准物质(0.5NCU/mL,批号201105003；2NCU/mL,批号201103001）抗-HIV标准物质(INCU/mL,批号201009002；4NCU/mL,批号201104001)抗-TP标准物质(1NCU/mL,批号201107004），所有标准物质均由北京康彻思坦生物有限公司提供。
1.4 试验标本
1）常规标本：本血站于2012年6月采集的符合《GB18467-2001献血者健康检查要求》的无偿献血者鲜血液标本40人份（EDTA-K2抗凝，4℃保存）。2）血清盘：采用商品化血清盘，HBsAg血清盘（阳性标本20份、阴性标本20份,批号201110002）；HCV血清盘（阳性标本20份、阴性标本20份，批号201110002）；抗-HIV血清盘（阳性标本20份、阴性标本20份，批号201110002）；抗-TP血清盘（阳性标本26份、阴性标本20份，批号201110002），血清盘均由北京康彻思坦生物有限公司提供。
1.5 精密性试验
采用S/CO为CUTOFF值2～4倍的质控品进行精密度确认。1）板内精密度：每个项目板内连续做20孔质控品检测，收集各项目数据，计算CV值。2）板间精密度：每个项目每天做1次室内质控品检测，连续检测20天，分别收集数据，计算CV值。
1.6 分析灵敏度试验
对各项目质控品按照1倍、2倍、4倍稀释，再用7种EIA试剂在FAME2上进行检测，每个稀释倍数重复检测5次，以检测出最低浓度质控品的稀释度为分析灵度。
1.7 性能比对试验
用同一台STAR全自动标本处理系统处理各项血清盘标本，然后分别用FAME1、FAME2和7种EIA试剂检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP血清盘和40人份常规献血者标本，应用χ2检验和Kappa检验比较2台全自动酶免检测系统检测结果的一致性。
2.结果
2.1 精密度
7种EIA试剂的精密度见表1，判断标准为：板内精密度<15%、板间精密度<20%。
3.讨论
根据《血站技术操作规程》2012版，精密性实验可接受标准为：批内变异系数在15%以内，批间变异系数在20%以内。HBsAg试剂1、HBsAg试剂2、抗-HCV试剂1、抗-HCV试剂2、抗-HIV试剂1、抗-HIV试剂2、抗-TP试剂1共7种试剂在FAME2上的板内变异系数分别为：4.21%、5.82%、8.84%、10.4%、5.25%、6.43%、4.44%/.板间：6.13%、7.65%、11.46%、12.28%、7.49%、6.88%、4.89%。抗-HCV试剂1、抗-HCV试剂2的精密度与其它试剂相比较略差些，分析原因可能与2种抗-HCV试剂加样量少有关系，与仪器性能无关。上述变异系数板内<15%，板间<20%,7种试剂在FAME2上的精密度在可接受范围内，符合实验室的要求，即FAME2精密度性能可以接受，可用于常规标本检测。
分析灵敏度可以在一定程度上反映检测方法对低浓度标本的检测能力，可以用倍比稀释的方式稀释有明确诊断结果的阳性标本，然后对稀释标本进行检测，以可检出的最低浓度标本的稀释度为分析灵敏度，由于阳性标本浓度未知，本实验室采用已知浓度的质控品标本进行1倍、2倍、4倍稀释，检测稀释后标本的S/CO值，以S/CO值大于接近1的稀释度为分析灵敏度，经检测HBsAg试剂1、HBsAg试剂2、抗-HCV试剂1、抗-HCV试剂2、抗-HIV试剂1、抗-HIV试剂2、抗-TP试剂1在FAME2上的分析灵敏度分别为0.1IU/ML、0.05IU/ML、0.125NCU/ML、1NCU/ML、0.5NCU/ML、2NCU/ML、0.5NCU/ML。
实验室针对不同检测设备性能的分析比较是当今医学实验室质量管理和质量控制的基本要求，血站血液检测实验室是以防止输血相关感染为目的的一类医学实验室，其质量管理和控制要求遵从医学实验室的管理原则。目前各国医学实验室相关法规已将设备性能比较纳入实验室管理要求，新引进的FAME2与现用FAME1全自动酶免分析系统性能比较试验采用7种经国家食品药品监督管理部门批准的EIA试剂、参考血清盘、无偿献血者阴性标本：2台设备的试验结果在血清盘试验、无偿献血者阴性标本试验中一致性较好，P>0.05，K=1，尽管个别血清盘试验正确率未达到100%，但分析原因或是由于某一试剂对血清盘中HBsAg的变异株检出能力有限或是某一试剂在检测抗-HCV血清盘中临界值标本的过程中结果存在波动所致，抗-HIV血清盘、抗-TP血清盘试验正确率均为100%，说明2台FAME的检测能力是一致的，不正确的原因在于标本与试剂的匹配，与设备性能无关。
通过精密性试验、分析灵敏度试验，性能比较试验以及无偿献血者阴性标本比对试验证实新引进的FAME全自动酶免分析系统满足实验室要求，可以投入使用。
【参考文献】
[1] CLSI/NCCLS.User protocol for evaluation of qualitative test performance；approved guideline(2nd ed).CLSI/NCCLS documentEP12-A2.2010.
[2] ISO/IEC 17025-2005:检测和校准实验室能力认可准则.
[3]中华人民共和国卫生部.血站实验室质量管理规范2007:01-01.
[4]葛红卫，王鸿捷.医药邻域的确认指南对血站实施确认活动的启示.中国输血杂志，2011,24（10）：915-920.
[5]中华人民共和国卫生部.血站技术操作规程.2012-06-01.
[6]胡晓彬.全自动酶免分析系统检测HBsAg、抗-HCV与手工操作方法的比较.疑难病杂志，2004.3(5):262.
[7] ISO/IEC 15189-2008:医学实验室质量和能力认可准则.
[8]魏寿芳，施昌彦.对《测量仪器比对规范》有关问题的说明.中国计量，2004.12（1）：32-33.
论文作者:廖燕
论文发表刊物:《医药前沿》2017年6月第16期
论文发表时间:2017/6/19
标签：试剂论文; 标本论文; 批号论文; 血清论文; 实验室论文; 精密度论文; 性能论文; 《医药前沿》2017年6月第16期论文;