细菌的形态检查主要有哪几种方法论文_ 罗怀芳

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说起细菌,大家都不陌生,随着科技的高速发展,细菌逐渐走进了人们的生活,无论是男女老少,对于细菌都或多或少知道一些常识。例如面团需要发酵,则需要酵母;酸奶需要乳酸菌才能变得可口;酒在醋酸菌的作用下才能成为调味品——醋;而腹泻是因为大肠杆菌作祟等等。更有文章指出人类身体表面细菌覆盖率高达90%!可见,细菌与人们的生活关系十分密切,那么细菌究竟是何方神圣呢?

细菌最早是被科学家列文虎克在一位从未刷过牙的老人牙垢上所发现的,只不过那时人们认为细菌是自然界已有的生物。直到后来,在巴斯德实验之后,人们才知道,细菌是由空气中已有细菌产生的,而不是自行产生,人们才慢慢终于揭开了这位神秘人物的面纱。

1 细菌的构造及其繁殖

细菌的结构包括基本结构和特殊结构。细菌都具有的普遍结构即基本结构,如细胞壁、细胞膜、细胞质以及核质。而某些细菌特有的结构称为特殊结构,包括细菌的荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢等。每一种结构都各司其职,有其独特的作用,例如鞭毛是某些细菌的“双腿”。可以让细菌来去自如;荚膜可以保护细菌不被白细胞吞噬,抵御外部的不利环境等。

按照不同的分类依据,细菌可以被分成许多类型。按细菌的生活方式来分类,细菌可以分成自养菌和异养菌,其中异养菌包括腐生菌和寄生菌;根据形状可以分为球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧菌、螺菌、螺杆菌);按细菌生存温度分类,可分为喜冷、常温和喜高温三类。

另外,细菌的繁殖速度极快,这是由它们独特的繁殖方式所决定的,即无性二分裂(裂殖):细菌生长到一定时期,在细胞中间逐渐形成横隔,由一个母细胞分裂为两个大小相等的子细胞。一般细菌约20到30分钟便分裂一次,即为一代。不难想象,若是环境适宜,且时间充分的条件下,细菌的繁殖会有多么迅速!用不了多久,世界都是细菌的“殖民地”了。

2 细菌的形态检查方法

什么是细菌形态检查?细菌形态检查就是对细菌的菌体形态和菌群的形态进行观察,进而对所检查的细菌的类型进行归属和划分菌属的检查方法。检查目的是为了从形态上识别细菌,作为细菌分类与鉴别的基础,此外还能检测被检标本中有无细菌,若直接从标本中观察到某些细菌,还可以对少数疾病作初步诊断(如结核,脑膜炎等)。细菌形态学检查主要有以下几种方法:

(1)显微镜法:别看细菌结构不少,其实它十分微小,只有在显微镜下才能被人们看见。显微镜又包括普通光学显微镜、电子显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等。暗视野显微镜常用于检测活的微生物的动力检测,相差显微镜用于检测活菌的内部形态等。不同显微镜针对的特性不一样,需要根据细菌特点来使用。

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(2)不染色细菌标本检查法:这种方法只用于细菌动力的观察,可以看到细菌的动力及运动等活体状况,但由于细菌的折光性不强,不能清楚的看到细菌的形态特征和结构。这种方法多被用来区分细菌的运动和布朗运动的异同。

(3)细菌染色标本检查法:细菌为什么能被染色呢?有很多种原因。可能因为毛细管现象、染料具有一定的渗透作用、染料的溶解和吸收作用使染料进入细胞内,或由于电荷的吸附和结合使细菌着色,也可能与细菌细胞内的化学成分有关。此外细菌的染色性与细菌细胞膜的通透性、细胞结构的完整性,以及培养基的种类、菌龄,染色液的离子强度、pH,染色温度等密切相关。

染色法是目前最常用的一种细菌形态检查方法。一般情况下,染色的基本步骤是涂片(干燥情况下进行)、固定、染色、复染(若有必要的话)。染料大多是人工合成的含有苯环或苯的有机物,分为碱性染料、酸性染料、复合染料、单纯染料。碱性染料有美兰,结晶紫,碱性复红等;酸性染料有伊红,酸性复红,刚果红,但是细菌一般情况下都带负电荷,所以酸性染料一般不着色;复合染料是碱性染料或酸性染料按照一定比例的的混合染料,如姬姆萨染料,可与细胞浆结合;单纯染料:大多是偶氮化合物,亲和力低,不溶于水,溶于脂溶剂。

染色方法包括单染法以及复染法。两者的区别在于是用一种染料还是多种,后者为两种及以上染料进行染色。其中复染法中较出名的是由丹麦科学家首创的革兰染色法,其染液由革兰结晶紫染液、革兰碘液、95%酒精和稀释石炭酸复红(沙黄)组成。革兰阳性菌为紫色,革兰阴性菌呈红色。除了以上两种方法以外,还有特殊染色法,如细胞壁染色法、鞭毛染色法、荚膜染色法异染颗粒染色法、芽孢染色法等。

最后,染色是极容易失败的一个关键步骤,其影响因素有许多,例如涂片过厚将使脱色不完全,酒精脱色时间过长导致过度脱色;染液储存过久会由于蒸发而影响浓度,特别是碘液久存或见光而形成碘酸,失去作用;95%浓度的酒精如果密封不佳则易挥发,失去脱色作用;细菌若菌龄太长也会影响检查结果。

3 细菌形态检查的意义

细菌与人类生活关系十分密切,两者之间有正面影响,也有负面影响。众所周知,细菌是许多疾病的病原体,包括肺结核、淋病、炭疽病、梅毒、鼠疫、沙眼等。另一方面,人类也时常利用细菌的特点,给自己的生活创造便利,如同文章开头所述,许多生活必需品的制作都离不开细菌。此外,部分抗生素的制造、废水污水的处理等,细菌也都起到了不可替代的作用。在生物科技领域中,细菌也已经被广泛的运用。因此细菌形态检查对于人类进一步了解、研究细菌来说,是十分重要的。

论文作者: 罗怀芳

论文发表刊物:《健康世界》2019年第12期

论文发表时间:2020/1/6

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