河南科技大学医学院
【摘要】目的：探讨精子DNA碎片指数(DFI)对IVF/ICSI妊娠结局的影响。方法：收集240对接受用长方案超排卵治疗、行IVF/ICSI助孕的不孕夫妻。女方接受超排治疗方案，男方于取卵子当天采用手淫方式获得精液标本，采用SCD法测定DFI,根据DFI分为DFI<30％组105例和DFI≥30％组135例。比较两组的受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率。结果：DFI<30％组的受精率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率比DFI≥30％组明显升高(P<0.05)。DFI与IVF/ICSI的受精率、优胚率、可利用胚胎率、临床妊娠率优明显的负相关性。结论：DFI对IVF/ICSI的受精率、胚胎发育能力及临床妊娠率有一定的预测作用。
【关键词】精子DNA碎片指数; IVF/ICSI; 妊娠结局
【中图分类号】R714.8【文献标识码】A【文章编号】2096-0867（2016）12-013-02
近年来，因精子质量降低而使受精成功降低，同时使对精子DNA碎片的研究逐渐成为热点。男性精子DNA损伤与其不良生活习惯、环境污染、过多地接触某些化学物质等因素密切相关。即便卵子对部分精子DNA碎片有修复能力，但随着用辅助生殖技术(ART)助孕女性年龄的增长，卵子的自我修复能力亦可能降低，从而影响助孕成功率。本研究对接收体外受精(IVF)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)助孕治疗的男方精液标本240份进行精子DNA碎片指数(DFI)的测定，分析DFI对IVF和ICSI妊娠结局的影响，现报道如下。
1资料和方法
1.1 临床资料收集2014年10月至2015年12月240对在我院生殖中心接受用长方案超排卵治疗、行IVF/ICSI助孕的不孕夫妻。病例选择标准：男方可于取卵当日提供新鲜精液；女方年龄小于35岁，不孕因素仅仅为盆腔或输卵管因素所致。根据男方精液DFI检测结果分为DFI<30％组105例和DFI≥30％组135例。两组基本资料对比无统计学差异，具有可比性。
1.2超排方案女方在月经来潮第19～20d开始，肌注促性腺激素释放激素激动剂曲普瑞林0.1 mg,每日1次，连续治疗14d，待达到降调标准后肌注人绝经期促性腺激素150～300 U，连续用8～12 d。当主导卵泡内径为18 mm时肌注人绒毛膜促性腺激素1万U，36～38 h后获取卵子。
1.3精液采集及处理
男方禁欲2～7d，于取卵子当天采用手淫方式获得精液标本，即可置于36℃恒温水浴箱中使精液完全液化。取出完全液化的精液标本用密度梯度离心法处理，随后用SCD法测定精液悬液的DFI。
1.4受精、胚胎观察及移植
于取卵当天进行IVF或ICSI，受精16～18 h观察，三原核(3PN)或以上分裂的胚胎为异常受精；小于3PN者为正常受精胚胎。受精72 h观察胚胎：卵裂球6个或以上，细胞大小基本一致，无空泡，碎片小于20％为优质胚胎。选1～3枚胚胎移植，移植后第14d检测血清β-hCG判断生化妊娠；第28d行B超检查宫内是否存在妊娠囊以明确临床妊娠。
1.5 观察指标
观察两组的受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率。
1.6统计学处理分类数据用百分比表示，采用x2检验，DFI与IVF/ICSI受精率、卵裂率优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率的关系采用personman相关性分析，采用SPSS21.0软件进行处理。
2结果
2.1两组受精率、卵裂率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率比较情况 DFI<30％组的受精率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率比DFI≥30％组明显升高(P<0.05)，两组的卵裂率比较无统计学差异(P>0.05),见表1。
2.2 DFI与IVF/ICS各相关指标的关系 DFI与IVF/ICSI的受精率、优胚率、可利用胚胎率、临床妊娠率优明显的负相关性，见表2。
3讨论
受精过程中，父方的遗传物质由精子携带进入卵子，故精子DNA损伤可能会影响胚胎的着床及妊娠的整个过程。一般而言，精子DNA碎片可出现在生精过程中任何阶段，亦可出现在男性基因转录过程。辅助生殖过程中，精子DNA碎片还因射精后精液暴露在外界高氧环境而引起。近期研究证实，精子DNA和染色质的损伤可引起男性不育和降低自然妊娠率[1]。等[2]报道，当DFI为20％～30％时，自然受孕率开始减低，当DFI>30％时，自然受孕率几乎为零。所以，当此类不育患者欲用ART助孕时，存在DNA损伤的精子所形成胚胎的质量及发育能力成为研究的热点。等[3]研究发现，DFI≤30％的宫内人工受精患者妊娠率明显高于DFI>30％患者。等[4]研究指出，在IVF中，精子DNA损伤与较低的临床妊娠率密切相关，其原因可能是，精子DNA碎片对辅助生殖中的受精率产生一定的影响。有研究采用末端转移酶标记技术(TUNEL)法对不育患者精子DFI进行检测，分析DFI与ART受精率间的关系，发现两者间存在负的相关性，推测精子顶体酶活性和精子穿透透明带并与卵黄膜融合的能力可能由于精子DNA碎片增加而减低，从而影响精子的受精能力[8]。但也有研究报道，DFI与ART受精率无明显相关性[5]。
DFI对胚胎质量也有一定影响，但有关精子DNA损伤对胚胎质量影响机制并未明确。然而目前多数研究认为精子染色质异常会引起胚胎质量降低。然而，一般而言，精子DNA在着床前胚胎发育后期开始表达，故认为精子DNA可能对胚胎质量无明显影响。
本研究结果显示，DFI<30％组的受精率、优胚率、可利用胚胎率及临床妊娠率比DFI≥30％组明显升高(P<0.05)，相关分析显示，DFI与IVF/ICSI的受精率、优胚率、可利用胚胎率、临床妊娠率优明显的负相关性，表明精子DFI对IVF/ICSI的妊娠结局产生一定影响，其原因可能是胚胎发育最初仅受母源基因组调控，受精与胚胎的早期发育都由卵子DNA完整性所决定。有研究对IVF助孕患者按DNA损伤程度分为正常组(DFI0～15％)、轻度损伤组(DFI 15％～30％)、重度损伤组(DFI≥30％)，分析各组的优胚率、卵裂率、植入率和临床妊娠率，结果显示随着DFI损伤程度的增加，患者的受精率、卵裂率、植入率和临床妊娠率逐渐降低[6]。本研究结果与之基本相符
综上所述，DFI对IVF/ICSI的受精率、胚胎发育能力及临床妊娠率有一定的预测作用。但也有不少研究报道，DFI与IVF/ICSI的受精率、胚胎发育能力及临床妊娠率无明显相关性，其原因可能是DNA损伤检测手段差异及受检样本量大小引起。因此DFI对IVF/ICSI妊娠结局是否存在影响尚需扩大样本选用更精确的检测手段加以研究证实。
参考文献
[1]RubesJ,RybarR,Prinosilova. Genetic polymorphisms influence the susceptibility of men to sperm DNA damage associated with exposure to air pollution.[J].Mutation Research: International Journal on Mutagenesis[J]., Chromosome Breakage and Related Subjects 2010,2(1/2)：45-51.
[2]王志强，杨杰，倪亚莉，等.精子DNA碎片与辅助生殖结局关系的研究进展[J].河北医科大学学报，2014，35(12):1485-1488.
[3]杨学农,徐琳,李红.男性不育患者精液活性氧对精子DNA损伤的研究进展[J].河北医科大学学报,2009,30(5):524-526.
[4]张俏忻,肖颖秀.精液白细胞异常增加对精子DNA氧化损伤的影响[J].癌变·畸变·突变,2015,27(5):383-385.
[5]李红,杨学农,赵萌.不育男性的精子DNA完整性与活性氧及尿酸的关系[J].中国计划生育学杂志,2010,18(3):149-152.
[6]陈芦地,吴金香,王正尧辅助生殖技术中锌抑制精子氧化损伤作用[J].中国男科学杂志,2015,29(10):8-11.
论文作者:郭威,李三强
论文发表刊物:《系统医学》2016年12期
论文发表时间:2016/10/8
标签：精子论文; 胚胎论文; 精液论文; 损伤论文; 碎片论文; 受精率论文; 可利用论文; 《系统医学》2016年12期论文;