结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的应用价值论文_王亚萍

结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的应用价值论文_王亚萍

牡丹江市康安医院结核七病区 157000

摘要:目的:探究结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的效果及其应用价值。方法:从在我院接受治疗的胸膜炎患者中选取诊断为结核性及非结核性胸膜炎的患者各25人,是为结核性胸膜炎组和非结核性胸膜炎组。分别对他们实行TB,T-SPOT及ADA检验,将患者的TB,T-SPOT及ADA检验结果进行对比分析。结果:TB,T-SPOT及ADA的敏感性分别为91.7%,86.5%,70.7%,TB,T-SPOT敏感度比ADA检验的敏感度高,据分析TB,T-SPOT与ADA敏感度间的差异不具有统计学意义(P>0.05),但是与结核性抗体敏感性间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TB,T-SPOT诊断结核性胸膜炎较一般方式更精准,对结核性胸膜炎早期的诊断很有帮助,结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的应用价值很高。

关键词:结核感染T细胞斑点试验;结核性胸膜炎

结核病是一种古老的慢性感染性疾病,是由结核分枝杆菌感染引起的疾病,它可以传播身体的许多脏器。我国的情况尤为严重,根据世界卫生组织的统计数据来看,目前我国每年约有130万结合病患,占全球疾病的15%,人数在世界上居第二位。结核性胸膜感染在肺外结核中最常见,但诊断结核性胸膜炎常规生化特征缺乏特异性。tb测试和t-spot测试利用结核分枝杆菌特异性抗原刺激外周血单核细胞,通过细胞因子干扰素的分泌检测抗原特异性T淋巴细胞反应,判断结核感染的状态,具有良好的特异性和敏感性,可协助诊断肺外结核杆菌。本研究主要探究结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的效果及其应用价值

1.资料与方法

1.1一般资料

从在我院接受治疗的胸膜炎患者中选取诊断为结核性及非结核性胸膜炎的患者各25人,是为结核性胸膜炎组和非结核性胸膜炎组。结合性胸膜炎组中男性14人,女性11人,年龄在50到68岁之间,平均年龄为(56±2.15)岁。非结合性胸膜炎中男性13人,女性12人,年龄在48到64岁之间,平均年龄为(55±2.78)岁。两组间性别,年龄等均无统计学差异,可以进行比较研究。

1.2方法

1.试剂:T-SPOT.TB试剂,ESAT6多肽(抗原A)、CFP10多肽(抗原B)、植物血凝素、底物显色剂、细胞培养液、人外周血淋巴细胞分离液、培养箱、酶联免疫斑点读板仪(德国AID公司)等。

2.检测程序:分离外周血淋巴细胞,制备单核型胸水核细胞,对有关酶联免疫斑点的检测结果进行,用酶联免疫斑纹阅读板进行斑点阅读。试验效果良好:空白对照孔中斑点数小于20,阳性对照孔中斑点数大于10。阳性结果的测定:测试孔的孔数小于8,空白控制孔的位置数大于8。

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2.结果

结核性疾病患者T-SPOT.TB检测结果:活动性结核与陈旧性结核病患者混合肽ESAT6和CFP10总SFC中位数分别为520个/106PBMCs和410个/108PBMCs,四分位数间距(P25,P75)分别为(271个/106PBMCs,1332个/106PBMCs)和(137个/106PBMCs,1274个/106PBMCs),两组间比较采用Wilcoxon秩和检验,差异无统计学意义(U=431.4,P=0.483)。肺结核与肺外结核患者混合肽ESAT6和CFP10总SFC中位数分别为465个/106PBMCs和582个/106PBMCs,四分位数间距(P25,P75)分别为(254个/108PBMCs,930个/106PBMCs)和(168个/106PBMCs,1233个/106PBMCs),两组间差异无统计学意义(U=1038.1,P=0.783)。

3.讨论

临床上,胸腔积液和结核性胸膜炎最为常见。TBP是一种常见的肺外结核,有3%到5%的结核性胸腔积液患者可能有结核性胸膜的症状,因此对治疗方法的选择和患者预后的判断是否准确非常重要。TBP诊断主要依赖于检查,但检查中胸片的敏感性较差。经皮胸膜穿刺活检是高度敏感的,但眼盲较大,材料有限,有气胸等并发症。外科胸腔镜在对无菌操作要求高的发展中国家并没有得到广泛的发展,只有部分呼吸内科医生接受了相关训练。医学胸腔镜视野狭窄,容易误诊。MTB是诊断结核病的“金标准”[1],但它需要很长时间,而且阳性率很低。

PPD测试很常见也很简单,但特异性较差。一种简单而有效的检测胸腔积液活动的方法可以反映出局部细胞的免疫状态,但ADA的增加并不是TB的具体表现。研究表明,TBP的敏感性为46.52%,特异性为84%。影响ADA的因素很多,研究表明年龄和吸烟可以减少ADA,这也会影响诊断解释。因此,诊断TBP仍然困难,迫切需要寻求新的、高效的、快速的、实用的检测方法,以提高TBP的诊断准确性。在活动性结核中,抗原特异性T淋巴细胞快速增殖,并被检测到到感染部位释放了许多的IFN[2]。TB是在区域编码的cfp-10和esat-6的T细胞特异性刺激,它应该由ELISPOT技术建立,以检测MTB外周血中IFN-T细胞的特异性释放。不像产后抑郁症,结核病不受卡介苗接种的影响,对绝大多数结核分枝杆菌具有较低的交叉免疫反应,操作简单,检测周期短,也可用于胸腔积液、肺泡灌洗液气管痰、脑脊液标本和腹腔积液。临床应用价值高。

研究结果表明,结核诊断的综合敏感性为91%,特异性为95%。但它是关于T-SPOT的,真正关于结核病诊断的大样本的临床研究并不多,这项研究比较了外周血。应用结核和胸腔积液对TBP的诊断价值进行分析,并对其应用前景进行评价。结果表明TBP具有较高的特异性(81.6%,93.8%),但在TBP中发现了斑点。TB更敏感(89.8%,90.9%),联合检测灵敏度高达94.3%,因此这两项检测方法在临床工作检查测量方法中的结合使用,可以进一步提高TBP的诊断水平。TB检测阴性预测值为80.5%,阴性似然比为0.14,说明阴性结果可帮助消除TBP。本研究在测试中进行的(有胸腔积液的ADA活性检测出现 假阴性病例(3/25/25),分析原因可能和早期T细胞在炎性反应中尚未敏感化,免疫功能下降,年龄因素增多等等相关。其次,PBMCs的分离、计数和SFCs的准确计数均为t[3]。因此,结核检测的任何链路错误都可能导致假阳性和假阴性。

此外,效应T细胞的活性将受到血液收集时间的延长的影响。结核病检测到假阳性病例(4/25),其中2例为恶性胸腔入侵,2例胸腔积液患者的肺炎和分析可能导致一些肿瘤效应T细胞计和蛋白质刺激增加。在2例结核接触史或既往结核患者中,无MTB潜伏感染。在NTBP组,两名患者在胸腔积液中接受假阳性检测,其中一例为淋巴瘤患者,一例为肺尘埃沉着病患者,该结果可能是由于淋巴细胞活性增强所致。本研究表明,TBP组ESR和CRP增加,提示两者在TBP诊断中有一定的辅助作用。总之,结核感染T细胞斑点试验诊断结核性胸膜炎的应用价值很高。

参考文献:

[1]全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组.2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告[J].中国防痨杂志,2014

[2]王晓林.赵晓.肖慧霞,等.2010年宁夏结核病流行病学抽样调查分析[J].宁夏医学杂志,2014

[3]中华医学会结核病学分会《中华结核和呼吸杂志》编辑委员会.γ-干扰素释放试验在中国应用的建议[J].中华结核和呼吸杂志,2015

论文作者:王亚萍

论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第16期

论文发表时间:2018/8/9

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