济宁医学院解剖学教研室 山东济宁 272067
摘要：目的 研究高盐饮水对小鼠学习记忆能力的影响。方法 选择健康小鼠48只，并将其随机分为4组，即高浓度组（以4%的氯化钠溶液为饮用水）、中浓度组（以3%的氯化钠溶液为饮用水）、低浓度组（以2%的氯化钠溶液为饮用水）和对照组。高盐摄入15天后，用Y型迷宫实验进行小鼠学习和记忆功能的测试。结果 与对照组比较，除低浓度组的正确反应率外，其余各浓度组的总电击时间、总训练次数、错误反应次数、正确反应率等表示学习功能的指标均存在显著性差异（P<0.05，P<0.01）。24小时后，重复Y型迷宫实验，各浓度组的总电击时间、错误反应次数、正确反应率等表示记忆功能的指标均较对照组存在显著性差异（P<0.05，P<0.01）。结论 短期高盐摄入可影响小鼠的学习与记忆功能。
关键词：高盐摄入；学习；记忆；小鼠
高盐饮食是指每天摄入的食盐量超过机体正常生理所需。高盐饮食及其对机体的危害已广受关注。研究发现，长期食盐摄入量过多（如每日超过10g以上），可增加高血压、心脏病、肾脏病、脑卒中、胃癌的发病率[1-3]。；增加钙的排出，影响骨骼的生长发育，极易发生骨质疏松甚至骨折；机体的防御能力会被抑制，易使病毒进入人体。学习和记忆是机体最重要和最基本的神经功能之一，是大脑对环境变化的终生适应，其目的是获得生存技巧，利用以更好的适应环境和改造环境。其出现异常或发生改变又是机体对外来毒物或有害因素早期（或亚临床）病理反应之一，学习和记忆的解剖基础位于海马区。目前有关高盐摄入对学习记忆功能影响的研究尚少。本研究以高浓度盐水摄入的方法，探讨高盐摄入对小鼠学习记忆功能的影响，为高盐饮食对机体危害的全面评价和防治提供基础资料。
1 对象与方法
1.1 实验动物与分组 健康昆明种小鼠48只，体重18～22 g，雌雄各半。将小鼠随机分为4组，即高浓度组、中浓度组、低浓度组3个实验组和1个对照组，每组12只，4个组的饲喂条件完全相同。喂养期间，动物室保持清洁安静，自由饮食。
1.2 方法
1.2.1高盐摄入实验 所有小鼠在实验室内正常饲喂5天后开始实验。高浓度组、中浓度组、低浓度组分别给予浓度为2%、3%和4%的氯化钠溶液作为其日常饮用水，让小鼠自由用。
对照组给予蒸馏水饮用。共15天。
1.2.2 Y型迷宫试验方法 Y型迷宫由相互夹角等于120°的三等分辐射式支臂和一个连接区组成，每臂底部设有铜栅。实验时，3个支臂交互通电，形成带电区和安全区，以小鼠在通电区逃向安全区的探索、逃避及其所用时间和正确逃避次数，反映小鼠的反应性、学习功能和记忆功能。
实验前，现将所有小鼠放入Y型迷宫中，将迷宫通电，观察小鼠反应，将反应迟钝和反应过于灵敏的小鼠剔除，用剩余小鼠进行本次试验研究。
学习功能测试：高盐摄入实验结束后进行。以小鼠受电击后从起步区逃至安全区的时间及点击次数为观察指标，所用时间越少、被电击次数越少，表示其学习功能越强。记录每只小鼠10次测试反应指标（总电击时间、总训练次数、错误反应次数、正确反应率）。
记忆功能测试：学习功能测试结束24小时后，重复进行Y型迷宫实验，以测试其记忆功能。记录每只小鼠10次测试的反应指标（总电击时间、错误反应次数、正确反应率）。
1.3统计学处理 用SPSS 13. 0统计软件包进行单因素方差分析。
2结果
2.1实验过程中小鼠一般情况
实验开始3天后，高浓度组小鼠出现精神萎靡、活动减少、进食量和饮水量下降的表现，中浓度组、低浓度组分别在实验开始后的第5天和第8天出现同样表现，且随着实验时间的延长，上述表现更加明显。无动物死亡。
2.2小鼠学习能力测试结果
各组小鼠学习功能测试的结果表明，总电击时间、总训练次数、错误反应次数、正确反应率等指标在总体上具有显著性差异（F=3.36～11.05，P=0.00～0.03）。与对照组比较，除低浓度组的正确反应率外，其余各浓度组的各指标均存在显著性差异（P<0.05，P<0.01），并随摄盐浓度的增高，差异更明显。见表1。
3讨论
有人发现[4]，高盐饮食可对小鼠行为学产生影响，如可加重小鼠更年期的焦虑程度，并降低其活动能力。但高盐饮食对其他神经行为功能影响的关系目前研究尚少。用Y型迷宫测试小鼠学习记忆功能，是基于动物条件反射的原理而设计的，它通过动物被动回避反应性，同时观察动物逃避条件反射和空间辨别的能力，是一种能较客观反映和评价空间学习记忆能力的测定方法，被广泛应用于动物神经行为功能的实验研究中[5]。
本实验研究表明，小鼠在短期高盐摄入后，除低浓度组的正确反应率外，其余各组的总电击时间、总训练次数、错误反应次数、正确反应率等表示学习功能的指标均较对照组存在显著性差异；24小时后重复测定，则总电击时间、错误反应次数、正确反应率等表示记忆功能的指标也较对照组存在显著性差异。且随摄盐浓度的增高，学习和记忆功能改变更明显。因此本结果表明，短期高盐摄入可降低小鼠的学习和记忆功能。高盐对小鼠学习记忆功能影响的可能是与以下因素有关：①损伤血管内皮，增强交感神经系统活性和激活肾素-血管紧张素系统，导致AngⅡ、ICAM-1、VCAM-1等缩血管、促进血管内小血栓形成、导致血管炎症的因子增高，而NO、CGRP等舒张血管的物质含量降低，而使海马区组织缺血缺氧。②高盐饮食可引发氧化应激的增强（如活性氧簇、炎性细胞因子），进而导致局部组织的损伤[6]。③Na+参与多种酶的稳定性、维持其活性，并参与某些蛋白质的合成，导致海马区C-fos蛋白表达异常，而后者正是与学习记忆功能相关的功能蛋白[7]。此外，高盐饮食导致的高钠血症可能影响海马区细胞膜上Na+-K+-ATP酶的活性[8]。
学习相当于行为的变化或改变。学习和记忆功能的改变常是机体出现器质性损伤的前期信号，有助于早期预防和干预措施的制订与实施。但本研究的结果是初步的，且与实际生活中人们慢性摄入高盐也有所不同。因此，高盐摄入是否会改变人类学习记忆功能及其确切机制，尚待进一步研究。
参考文献：
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论文作者:邓广耀,黄志诚（通讯作者）
论文发表刊物:《健康世界》2016年第20期
论文发表时间:2016/11/15
标签：小鼠论文; 功能论文; 记忆论文; 浓度论文; 次数论文; 饮食论文; 迷宫论文; 《健康世界》2016年第20期论文;