天津市血液中心 天津 300110
摘要：目的 分析全自动血液成分分离机制备浓缩血小板、富血小板白膜后的悬浮红细胞能否替代洗涤红细胞。方法 检测并计算分离机制备浓缩血小板、富血小板白膜后的悬浮红细胞的血容量、血红蛋白含量、上清蛋白含量、溶血率，并与手工制备的洗涤红细胞进行比较。结果 制备浓缩血小板后悬浮组和制备富血小板白膜后悬浮组均符合洗涤红细胞标准（GB18469-2012 《全血及成分血质量要求》），但洗涤红细胞的上清蛋白的含量要更低（p<0.05）。结论 虽然全自动血液成分分离机制备血小板、富血小板白膜后的悬浮红细胞上清蛋白含量比洗涤红细胞要高，但其完全符合洗涤红细胞标准，可以在应急情况下替代洗涤红细胞。
关键词：洗涤红细胞；全自动血液成分分离机；制备富血小板白膜；浓缩血小板后的悬浮红细胞
Abstract：Objective：To analysis the suspended red blood cells isolated off platelets or buffy coat by automatic blood components extractor could be used to replace the WRBC. Methods To calculat the blood volume，hemoglobin content，protein content and hemolysis rate of the suspended red blood cells isolated off platelets or buffy coat by automatic blood components extractor. Results the suspended red blood cells isolated off platelets or buffy coat by automatic blood components extractor met the WRBCstandard（GB18469-2012Blood and component blood quality requirements. Conclusion The suspended red blood cells isolated off platelets or buffy coat by automatic blood components extractor could be used to replace the WRBC
Key word：WRBC；automatic blood components extractor；buffy coat；platelets
洗涤红细胞保存期为24小时，一般不提前制备，在紧急情况下应用洗涤红细胞，合血和制备时间过长一直没有很好的解决。MAP保存液可以应用于洗涤红细胞的保存[1]，但是由于洗涤红细胞制品的特殊性，MAP保存液所含成份可能是患者应用洗涤红细胞时所不需要的，血细胞在保存的过程中存在自然凋亡，随着保存期的延长，所产生的代谢产物也较多，长期保存洗涤红细胞，从理论上失去了洗涤红细胞的部分意义[2]，所以保存洗涤红细胞应用不广。目前随着新一代全自动血液成分分离机的普及应用，分离成分的质量和稳定性大大提高。在制备浓缩血小板和富血小板白膜时，分离机进行了去血浆和去膜层的步骤，我们尝试用全自动血液成分分离机去血浆及去白膜层后所得的近期悬浮红细胞（储存<24h）替代洗涤红细胞，下面就其研究情况作一介绍。
1材料与方法
1.1 仪器：compomat-G5全自动血液成分分离机；SORVALLRC3BP离心机；库尔特全自动血细胞分析仪；热合机；电子称.UV -2550紫外可见分光光度计、微量总蛋白测定试剂盒（邻苯三酚红比色法）
1.2 试剂：库尔特清洗液；库尔特稀释液；库尔特溶血素；血浆游离血红蛋白测定试剂盒；
1.3 血液来源：均来自本市街头无偿献血者。
1.3 实验方法：
全血成分分离机制备浓缩血小板、富血小板白膜后悬浮红细胞和手工洗涤红细胞的比较
1.3.1将制备浓缩血小板后悬浮红细胞设定为A组：随机抽取无菌采集的ACD-B的抗凝全血（400ml）50袋，用分离机制备血小板，然后将制备后的悬浮红细胞混匀称重并留取一段合血管留样。（离心条件：第一次离心：2600g /14min，第二次离心：183g/10min，22±2℃）。
1.3.2将分离富血小板白膜后悬浮红细胞设定为B组：随机抽取无菌采集的CPD的抗凝全血（400ml）50袋，用分离机制备白膜，然后将制备后的悬浮红细胞混匀称重并留取一段合血管留样。（离心条件4600g/10min，22±2℃）。
1.3.3将手工洗涤设定为C组：随机抽取50袋手工制备的洗涤红细胞，混匀后并留取一段合血管留样。
将以上3组血样分别检测并计算血容量、血红蛋白含量、上清蛋白含量、溶血率。
1.4测定方法
用库尔特全自动血细胞分析仪及其配套试剂测定HGB计算血红蛋白含量
用测定上清蛋白浓度计算上清蛋白含量
用测定游离血红蛋白计算溶血率
1.5数据计算：
血容量=悬浮红细胞重量/1.06
血红蛋白含量=HGB*血容量/1000
上清蛋白含量=蛋白浓度*血容量/1000
溶血率=（1-HCT/100）*游离血红蛋白*100/HGB
1.6：统计学方法
采用t检验
2 结果：
表1全自动血液成分分离机制备浓缩血小板后的悬浮红细胞（A组）、富血小板白膜后的悬浮红细胞（B组）和手工洗涤红细胞（C组）的比较
按洗涤红细胞标准合格率100%100%100%
注：*A组与C组比较**B组与C组比较***A组与B组比较
2.1血容量：A组、B组都明显高于C组，A组与B组之间没有显著差异。
2.2血红蛋白含量：A组、B组与C组没有显著差异。
2.3上清蛋白含量：C组明显低于其他两组，A组与B悬浮组之间没有显著差异。
2.4溶血率：A组明显高于B组和C组，B组和C组没有明显差异。
3讨论
洗涤红细胞是将保存期内的全血、悬浮红细胞用等渗溶液洗涤，去除几乎所有血浆成分和部分非红细胞成分，并将红细胞悬浮在氯化钠注射液或红细胞添加液中所制成的红细胞成分血[3]，主要用于输入全血或血浆后发生过敏反应的病人；自身免疫性溶血性贫血病人；高钾血症及肝、肾功能障碍需要输血的病人；新生儿溶血病输血及需要宫内输血的患者、反复输血或妊娠已产生白细胞或血小板抗体引起输血发热反应的病人。[4]为减少输血反应，临床应用洗涤红细胞的比例越来越高，但由于合血和制备时间过长，紧急情况下应用洗涤红细胞受到影响。
新一代全自动血液成分分离机的普及，给我们带来了新的思路，分离机在制备浓缩血小板和富血小板白膜时进行了去血浆和去白膜层步骤，能最大量地稳定地将离心后析出的血浆、血小板和白细胞层从全血中分离出来。若进行此步骤后所得的近期悬浮红细胞能达到洗涤红细胞的国家标准[3]，就能够在紧急情况下替代洗涤红细胞，减少输血反应，节约血液资源，争取抢救时间。
从本实验结果可以看出：全自动血液成分分离机制备浓缩血小板、富血小板白膜后所得的悬浮红细胞均能达到洗涤红细胞的国家标准[3]。
其中（1）血容量：A组、B组都明显高于C组，这是由于悬浮红细胞的保养液是固定100ml，而洗涤红细胞则用约50ml生理盐水补充至250g（2U洗涤红细胞标准量）
（2）血红蛋白含量：A组、B组与C组没有显著差异。是由于分离机在分离白膜层时有挡板分割红细胞和白膜层，并进行冲洗，可以在保证分离出白膜层后最大限度的保留红细胞，所以其红细胞损失并不比手工大。
（3）上清蛋白含量：A组、B组明显高于C组是因为洗涤红细胞进行了3次盐水洗涤，上清蛋白已经几乎完全清除，而A组、B组只是在分离机的作用下将离心后析出的血浆完全去除，A组明显高于B组是由于分离血小板的第一次离心力低于分离富血小板白膜的离心力，血浆析出的不够彻底。但此两组上清蛋白完全符合洗涤红细胞国家标准（GB18469-2012 《全血及成分血质量要求》）
（4）溶血率：A组明显高B组和C组，是由于制备浓缩血小板所有全血需采集后置于20℃-24℃保存和运输24小时内，在室温下进行制备[3]。红细胞在保存后再进行成分分离红细胞的破损会多一些，但溶血率依然符合洗涤红细胞标准（GB18469-2012 《全血及成分血质量要求》）
以上指标提示我们，在紧急情况下，储存期低于24小时的全自动血液成分分离机制备浓缩血小板、富血小板白膜后的悬浮红细胞可以替代洗涤红细胞，由于洗涤红细胞在上清蛋白含量的优势不可比拟，常规制备洗涤红细胞仍然是不可替代的。
参考文献：
[1]李健民，沈莉，张义兵，等.MAP洗涤和保存红细胞的效果观察.中国输血杂志[J].2003，16（2）：105.
[2]李运琴.洗涤红细胞简化制备方法探讨. 当代医学[J].2010.16（34）：27
[3]全血及成分血质量要求[S].GB18469-2012：8.
[4]陈书芳.去白与不去白红细胞悬液洗涤后的质量比较.临床输血与检验[J]，2016，18（2）：160-162
论文作者:康娜,张锡敏, 纪蓉蓉
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2017年第12期
论文发表时间:2017/9/12
标签：红细胞论文; 血小板论文; 成分论文; 分离机论文; 血红蛋白论文; 蛋白论文; 含量论文; 《中国误诊学杂志》2017年第12期论文;