（湖北省武汉东湖新技术开发区左岭街社区卫生服务中心，妇科 430000）
【摘要】目的：对分离自复发型念珠菌性阴道炎患者的病原菌进行病原学及药物敏感性分析。方法：采用标准的鉴定方法对30株分离获得念珠菌进行鉴定；然后采用微量液基稀释法，检测氟康唑、伊曲康唑和制霉菌素对念珠菌的药物敏感性。结果：30株念珠菌中，念珠菌40%、光滑念珠菌46.6%、热带念珠菌10%及克柔念珠菌3%。氟康唑、伊曲康唑和制霉菌素对念珠菌的MIC50范围分别为：4-16ug/ml，1-2ug/ml，0.06-0.125ug/ml。结论：在本次研究中，光滑念珠菌及白念珠菌仍是主要致病菌。而氟康唑对它们的MIC普遍偏高，伊曲康唑和制霉菌素的MIC相对较低。
【关键词】复发型念珠菌性阴道炎；念珠菌；氟康唑；伊曲康唑；制霉菌素
Analysis the Pathology and Antifungal Susceptibiligy of the Pathogen of Recurrent Candidal Vaginitis
Zhang Mingxia
Department of Gynecology, Zuo Ling Street Community Health Service Center, East Lake New Technology Development Zone, Wuhan, Hubei Province
Abstract: Objectives: To analyze the infective pathogens which isolated from recurrent Candidal vaginitis by pathology and antifungal susceptibility test. Methods: By using to standard identify methods and microdilution drug susceptibility test method to identify the type and antifungal susceptibility of the 30 isolated stains. Results: In the 30 strains, there are 40% of Candida albicans, 46.6% of Candida glabrata, 10% of Candida tropicalis and 3% of Candida krusei. The MIC50 of fluconazole, itraconazole and nystatin were 4-16ug/ml, 1-2ug/ml, and 0.06-0.125ug/ml, respectively. Conclusions: From this study, the C. albicans and C. glabrata were the main pathogen of recurrent Candidal vaginitis. The MICs of fluconazole were relatively high, but the itraconazole and nystatin were more sensitive against the Candida spp.
Key words: Recurrent Candidal vaginitis; Candida; Fluconazole; Itraconazole; Nystatin
[ 中图分类号 ]R2[ 文献标号 ]A[ 文章编号 ]2095-7165（2018）21-0480-02
念珠菌性阴道炎是育龄期妇女的常见病，其中主要病原体为白念珠菌，占85-90%的病例；非白念珠菌感染主要是近平滑念珠菌、光滑念珠菌和热带念珠菌。念珠菌性阴道炎分为非复杂病例和复杂病例，通常白念珠菌引起的轻症感染多为非复杂病例[1]。复杂病例主要包括严重感染病例、孕期感染病例、继发于严重系统疾病的病例等[2,3]。而复发型的念珠菌性阴道炎也属于复杂病例的一种。复发型念珠菌性阴道炎主要为一年内发病4次及4次以上的病例[4]。据统计，5%-8%的念珠菌性阴道炎属于复发型，且多为光滑念珠菌及其他非白念珠菌感染引起[3,4]。本文对我院30株分离自复发型念珠菌性阴道炎患者的病原菌进行了菌种鉴定、药物敏感性检测，对复发型念珠菌性阴道炎从流行病学和病原学上进行初步分析。
实验材料与方法
1.病原学分析
对分离获得的30株念珠菌进行菌种鉴定：采用CHROMagar念珠菌显色培养基(郑州博塞生物工程有限公司)和APl20CAUX酵母菌鉴定系统(法国生物梅里埃公司产品，批号769802103)，两种方法进行鉴定。
2.药物敏感性检测
采用美国CLSI-M27 A2方案[5]中的微量液基稀释法进行氟康唑、制霉菌素、伊曲康唑的药物敏感性检测。所有抗真菌药物均购自上海MedChem Express公司。按照方案推荐方法配制培养基，用经三氮吗啡丙磺酸钠缓冲（pH7.0）的 RPMI 1640 液体培养基过滤灭菌。收集念珠菌孢子，以血细胞计数板调整孢子量为（1- 5）×106 CFU/ml；然后以 RPMI 1640液体培养基稀释 100倍，接种终浓度为（1 -5）×104CFU/ml。倍比稀释后，将2倍终浓度的受试药物加入 96 孔板，每孔加入100 μl，再加入100 μl 稀释后的菌悬液，同时设立生长对照（无药孔）和阴性对照（无菌孔），35 ℃孵育 24 h。伊曲康唑和氟康唑的工作浓度范围均为 0.03 -16mg/L，制霉菌素为0.03 - 4 mg/L。肉眼观察判读结果，伊曲康唑和氟康唑最低抑菌浓度（MIC）定义为肉眼观察到50%真菌生长的最低浓度，制霉菌素（MIC）定义为肉眼观察到无真菌生长的最低浓度。所有的药敏试验均重复操作2次。
实验结果
1.经过鉴定，分离获得的30株念珠菌中有12株白念珠菌，14株光滑念珠菌，3株热带念珠菌，1株克柔念珠菌。
2.药物敏感性检测结果：氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素对白念珠菌的MIC分别为：2-16ug/ml、0.5-4ug/ml、0.03-0.25ug/ml；氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素对光滑念珠菌的MIC分别为：8-16ug/ml、0.5-2ug/ml、0.06-0.25ug/ml；氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素对热带念珠菌的MIC分别为：4-8ug/ml、0.5-2ug/ml、0.125-0.25ug/ml；氟康唑、伊曲康唑、制霉菌素对克柔念珠菌MIC分别为：16ug/ml、2ug/ml、0.125ug/ml。具体见表1。
表1：抗真菌药物对30株念珠菌的药物敏感性（ug/ml）
讨论
念珠菌是女性外阴的常见定植菌，1/3的成年女性可分离获得念珠菌[6]。在患者免疫力下降、局部微环境改变、激素水平的变化时，会让定植的念珠菌增殖活跃，从而变为感染状态，引起念珠菌性阴道炎[3,4]。引起念珠菌性阴道炎的最常见的病原体为白念珠菌，最主要的治疗药物包括口服的氟康唑及外用唑类或多烯类抗真菌药物[4]。然后随着抗真菌药物的广泛应用，流行病学的改变，使得部分致病菌菌种改变或药物敏感性改变，进而导致复发型念珠菌性阴道炎[6]。在本研究中，我们收集了本院分离来自复发型念珠菌性阴道炎患者的病原菌，并对这些病原菌进行菌株鉴定、药物敏感性分析。菌种分析结果显示，白念珠菌40%、光滑念珠菌46.6%、热带念珠菌10%及克柔念珠菌3%。光滑念珠菌及白念珠菌仍是主要致病菌。通过药物敏感性检测结果发现氟康唑的MIC普遍偏高，可能是导致临床治疗后反复复发的重要因素之一。而伊曲康唑MIC50为1-2ug/ml，提示其可以作为复发型念珠菌性阴道炎阴道炎的口服治疗药物。而制霉菌素仍是最有效的杀伤药物，提示其能作为治疗复发型念珠菌性阴道炎的关键外用药物。通过本次的研究，我们初步对我院的复发型念珠菌性阴道炎进行了病原学和流行病学分析。为临床经验治疗提供一定的参考价值。
参考文献：
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6.Peters BM, Yano J, Noverr MC, et al.Candida vaginitis: when opportunism knocks, the host responds[J]. PLoS Pathog. 2010;10(4):e1003965.
作者简介：张明霞，1977年，女，主要从事妇产科护理工作. E-mail：363164425@qq.com
论文作者:张明霞
论文发表刊物:《医师在线》2018年11月21期
论文发表时间:2019/3/26
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