吉林省消防总队医院 口腔科 吉林长春 130061
摘要：目的：研究白芍总苷治疗RAU患者临床效果，研究RAU致病免疫学机理。方法：实验选取30例RAU患者，采集血样进行体液及细胞免疫功能检测并记录结果，应用白芍总苷治疗RAU，连续服药2月后复查外周血体液及细胞免疫功能再次记录结果。结果：治疗后RAU患者血清免疫球蛋白IgG，IgA降低（P>0.01）；IgM也有升高（P>0.05）；补体C3、补体C4升高（P>0.01）。RAU患者外周血淋巴细胞转化率治疗后较治疗前升高（P<0.01）；T细胞亚群治疗后较治疗前CD4+、CD4+/CD8+升高、CD8+降低护（P<0.01）。结论：通过白芍总苷治疗RAU能通过调节RAU患者细胞免疫功能明显改善疾病状态，免疫功能紊乱在RAU发病中起直接作用，在RAU临床治疗中应重点关注免疫系统功能的调节和改善。
关键词：复发性阿弗他溃疡；白芍总苷；临床治疗；免疫
1 绪论
复发性阿弗他溃疡（Recurrent Aphthous Ulcer，简称RAU）发病机制目前尚不明确。研究表明免疫因素、精神因素、激素水平均可诱导RAU发作，系统性疾病在RAU的发生发展中也起到重要作用。实验研究表明RAU的致病过程与TNF-α有关，TNF-α可增加T细胞的增殖，并可增强IL-2R表达及其与IL-2结合的敏感性，上调T细胞的活力，可介导黏膜上皮细胞生长并召集炎性细胞至上皮损害处，因此TNF-α与以T细胞为主介导的自身免疫疾病RAU密切相关[1，2]。本项目研究白芍总苷治疗RAU患者，在副作用减小的前提下增强药效，使机体在溃疡发作期及勃膜糜烂期能够快速做出反应，增强或减弱免疫应答，从而稳定机体免疫水平，观察临床症状改善情况。同时通过观察RAU患者服用白芍总苷配伍枸杞治疗前后免疫功能指标情况，探讨RAU的免疫学致病机理。
2临床实验
2.1 实验对象
应用白芍总苷治疗阿弗他溃疡患者治疗前后外周血样本30例。选择至少有2次RAU发病史、且有1年以上病史、口腔溃疡每月发作至少2次[3]。30例RAU患者，男12例，女18例，年龄22～63岁，平均年龄为（47±6.32）岁。排除标准：白塞病、贫血、消化性溃疡、克隆病、急性感染性疾病、自身免疫性疾病；24h内使用镇痛药，1月内使用抗生素、消炎药，3个月内全身使用皮质类固醇激素、免疫抑制剂；3个月内吸烟，嗜酒者；肿瘤患者；妊娠妇女；对治疗不适应、不能坚持者。
2.2 研究方法
采集复发性阿弗他溃疡患者血样，进行体液及细胞免疫功能检测并记录结果，给予帕夫林（白芍总苷）（浙江宁波立华制药有限公司，规格0.3g/粒）口服，0.6g/次，2次/口。连续服药2个月后复查外周血体液及细胞免疫功能再次记录结果。
2.3 观察内容
一般临床资料；个人信息、病程、病情、全身状况及用药情况。观察指标包括体液免疫功能：免疫球蛋白IgG，IgA，IgM，补体C3、C4，细胞免疫功能：淋巴细胞转化率，T细胞亚群（包括总T淋巴细胞（CD3+）比率、T+B+NK比率、辅助/诱导T细胞比值（CD4+/CD8+）、总淋B巴细胞（CD19+）、辅助/诱导T细胞（CD4+）比率、抑制/细胞毒T细胞（CD8+）比率、NK细胞（CD16+CD56+）比率。
2.4 实验室方法
体液免疫功能检测方法：采用免疫球蛋白、补体免疫散射比浊法。
抽取2ml外周静脉血，肝素抗凝，以2500-3000转/min离心6~10min。分离血清上机测定（德国西门子SIEMENS原装配套试剂），采用西门子蛋白分析仪获取分析数据。
细胞免疫功能检测方法：
1）淋巴细胞转化率。取肝素抗凝血0.1ml置密塞培养瓶或管内，无菌加入分离的单个核细胞与植物血凝素混合体外培养3天，部分T细1.8m1的RPMI1640培养基，再加0.1m1PHA液，于370C培养3天，每天摇动1次，取出后吸出大部分上清，加入氯化按溶液4m1，混匀后置于37度水浴10min，取出以2500转/min离心，弃上清，沉淀加5ml固定液（甲醛9份冰醋酸1份），置室温10min后离心弃上清，留0.2m1沉淀，轻轻混匀滴加于一洁净片上，使其均匀铺开，自然干燥后用姬姆萨染色，油镜下观察后计数200个淋巴细胞，计算转化母细胞的百分数。
2）T细胞亚群。抽取2 ml外周静脉血，肝素抗凝。
设6支检测管，分别加入20u1 FITC和PE双色荧光标记的单克隆抗体：IgGl/IgG2a、CD45/CD14、CD3/CD4、CD3/CD8、CD3/CD19、CD3/CD16+56每管加入100u1血标本，混匀后室温避光反应20 min，加入2m1溶血素，混匀和室温避光反应10min，离心1000r/min，5 min，弃上清，加入2ml PBS洗涤，离心1000r/min，5min，弃上清，加入500uI PBS，上机测定。（美国BD公司试剂），采用流式细胞仪（FACSCalibur，美国BD公司）中Simul SET软件获取和分析数据。
2.5 统计学分析
应用SPSS 11.0专业统计软件处理、比较数据，计量资料准差（Mean±SD）表示，治疗前后结果的比较采用配对t检验异有统计学意义。采用均数士标以P≤0.05为差异有统计学意义。
3 结果与讨论
体液免疫功能测定结果见表1所示，与治疗前相比，治疗后RAU患者血清免疫球蛋白IgG，IgA降低（P>0.01），差别有显著性；IgM也有升高（P>0.05，差异无统计意义；补体C3、补体C4升高（P>0.01），差别有显著性。细胞免疫功能测定结果见表2所示，RAU患者外周血淋巴细胞转化率治疗后较治疗前升高（P<0.01），差异显著；T细胞亚群治疗后较治疗前CD4+、CD4+/CD8+升高、CD8+降低（P<0.01），差别有显著性。实现说明免疫应答的通过调节占有优势，即免疫应答增强。T淋巴细胞在复发性口腔溃疡的发病中起重要作用，RAU患者的T细胞免疫功能异常，RAU患者体液免疫功能增强，细胞免疫水平处于抑制状态，说明白芍总苷治疗RAU可调节患者的体液免疫功能。
4 结论
通过白芍总苷治疗RAU能通过调节RAU患者细胞免疫功能明显改善疾病状态。同时病理检查可推断RAU致病机理与免疫因素有关。进一步研究认为免疫功能紊乱在RAU发病中起直接作用，并且占较大比重。在RAU临床治疗中应重点关注免疫系统功能的调节和改善。
参考文献：
[1]王婷婷，张新，王蜻妓.白芍总营和维生素B2治疗复发性阿弗他溃疡的疗效评定[J].实用口腔医学杂志，2013，29（5）：686-689
[2]张延琳，林敏霞，王嘉陵.不同剂量沙利度胺片治疗复发性阿弗它溃疡的疗效比较[J].中国医院药学杂志，2010，30（19）：1679-1681
[3]杜芹，田鳃，廖楚航.复发性阿弗他溃疡Thl /Th2细胞因子的检测[J].成都医学院学报，2013，8（6）：657-660
论文作者:雷鸣
论文发表刊物:《健康世界》2015年30期供稿
论文发表时间:2016/4/12
标签：免疫论文; 细胞论文; 白芍论文; 患者论文; 功能论文; 体液论文; 淋巴细胞论文; 《健康世界》2015年30期供稿论文;