湖北省恩施州巴东县民族医院 444324
【摘 要】中药通过不同炮制方法可以表现出不同甚至相反的药效，笔者结合多年从事中药炮制后质量分析控制和药效评价的亲身实践以及大量文献，总结了目前常用的中药炮制质量分析方法和以及与药效评价之间的关系，仅供同行业人员参考。
【关键词】中药；炮制；质量分析；药效评价
中草药在我国应用已有数千年的历史，同时我们的祖先又发现同一种中药经过不同的加工处理可以表现出不同的药效，经过几千年的实践和改进，中药加工已经逐渐形成了一门专业性很强的学科，即中药炮制学。中药炮制即利用中医基础理论和药材本身性质，通过一定加工方式，使药效达到临床需要的加工过程，最终实现药材的“增效减毒”[1]。传统中药炮制的质量分析是由人的经验决定的，虽然国家及各地区都制定了中药炮制规范，2010版中国药典也列出了“药材炮制通则”，但在实际炮制中，鲜有人按照规范和通则进行质量分析，而且规范和通则各有其弊病；另一方面，我国在中药炮制质量分析上的方法单一、落后，这也制约了中药炮制品质量的科学分析和控制。
基于此，我国中药炮制研究者进行了大量研究和实践，提出了中药炮制质量分析和药效评价的科学方法。笔者从现代仪器和技术的角度，总结目前常用的中药炮制质量分析方法和以及与药效评价之间的关系，供大家学习和参考。
1 质量分析方法
中药是通过其含有的部分化学成分联合发挥其药效的，经过炮制，中药的化学成分会发生一系列改变，中药本身的药效亦随之改变。而中药质量控制主要是对炮制前后的化学成分的种类和数量进行分析，中药指纹图谱是通过标示药物特征化学成分来检测中药和炮制品的化学成分，体现药物的稳定性、优良性。常见的用于指纹图谱分析的方法如下：
1.1 高效液相色谱法 高效液相色谱法（HPLC）是一种分离效率高、分析速度快且检测灵敏性高等特点。大多数中药的化学成分可以通过浸提的方式获得且可应用HPLC进行分析，该方法建立的指纹图谱能够很好地反映中药材在炮制前后的成分变化情况，可用于中药及其炮制品的鉴别和有效成分的测定。目前该方法已成为中药指纹图谱和质量分析的最主要方法。刘建平等通过HPLC方法建立了决明子及其炮制品的指纹图谱，比较炮制温度和时间对其化学成分种类和含量变化的影响。结果表明，与生品相比，炮制品中有4个色谱峰峰面积明显减少、1个色谱峰峰面积增大、4个色谱峰消失、出现了2个新色谱峰[2]。
1.2 气相色谱法 气相色谱（GC）具有快速、灵敏度高、重复性好的特点，受外界影响较少。该方法适用于分析含有易挥发但热稳定成分的物质，在分析富含挥发性有效成分的中药中具有重要的作用。朱妙琴利用气相色谱技术对天麻、人参、白术等12中动植物中药材建立了易挥发物质的指纹图谱[3]。
1.3 毛细管电泳法 毛细管电泳法（HPCE）是通过施加高压，使样品各组分在毛细管中出现流速和分配的差异，最终实现样品的分离。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆该方法所需样品量少，需要消耗的溶剂少，不易受到其他物质的污染，并且可以实现水溶液的直接快速分析。施婧妮等通过毛细管电泳法建立生鳖甲和醋鳖甲的指纹图谱，结果显示经过炮制鳖甲中Bj4活性肽含量升高，且出现了新的HGRFH活性肽[4]。
1.4 色谱质谱联用技术 该技术首先通过色谱法分离中药的化学成分，然后对其进行质谱分析，色质联用可以提供更多的物质成分的分子量信息，灵敏度高，可同时对多种化合物进行定性和定量分析。孙慧等通过高效液相色谱-质谱连用技术分析大黄及其不同炮制品的主要成分，结果显示与生品比较，各种炮制品中番泻苷A等二蒽酮含量出现极显著下降，结合蒽酮类化合物的含量也有所减少，研究也发现熟大黄较酒大黄和大黄炭的化学成分更接近于生品[5]。杨佰娟利用气相色谱-质谱联用的方法建立了川芎、当归、木香等3种中药材中挥发油有效成分的指纹图谱，发现了川芎挥发油成分中的9种内酯类化合物、当归挥发油成分中的6种内酯类化合物、木香挥发油成分中的9种倍半萜类化合物[6]。
1.5 光谱法 物质结构不同，其光谱也不同。中药炮制前后的化学成分种类和含量发生改变，光谱学特性也会发生相应改变。目前常用的光谱法有紫外-可见分光光度法和红外光谱法。值得注意的是，光谱法提供的信息较色谱法少，因此不发得到各种成分的特有信息，在中药指纹图谱中的应用有一定的限制。
1.6 代谢组学 代谢组学是通过分析代谢产物的变化进而分析药材生化状态的改变，常用的方法是色质联用。Toh等采用超高效液相色谱-质谱联用技术分析了三七生品和蒸品的代谢衍生物，结果发现二者之间存在146个有明显含量变化的特征离子；蒸制后有5种人参皂甙和1种三七皂甙含量下降，部分人参皂甙含量增加。基于代谢组学的进步和发展，人们期望采用该项技术建立现代中药炮制的研究系统，继而达到整体控制和评价中药炮制品质量的目的。
1.7 分子生物学法 该方法是通过PCR技术扩增得到中药中的DNA片断，这些片段的大小、数量都具有生物特异性，因此可以用于评价中药炮制前后的质量，被称为DNA指纹图谱。DNA指纹图谱具有重复性好、灵敏度高等优点。限制性内切酶片段长度多态性（RFLP）是最目前最常用的构建DNA指纹图谱的方法，但该法操作繁琐、时间过长，实际应用中受到一定限制。随机扩增多态DNA（RAPD）技术在不清楚中药特异 DNA序列的情况下也可以检测DNA的多态性，是一种新的方法，应用前景较好。扩增片段长度多态性DNA（AFLP）技术是一种新兴的用于指纹图谱构建的方法，具有重复性好、灵敏度高的优点。罗志勇等采用AFLP技术，分析了人参、西洋参基因 DNA指纹图谱，结果表明该方法得到的DNA指纹多态性较RAPD和RFLP高得多，3次重复试验得到的结果一致。
2 药效评价研究
中药炮制的根本目的是用于疾病治疗，而通过炮制药物的化学成分多有改变，药效亦随之发生变化。炮制可以在以下几方面改变药效和临床效果：①改变药物的表里作用；②改变药物的寒热温良性质；③改变药物作用部位；④改变药物对疾病的虚实作用。因此必须对中药炮制后的药效进行评价。目前药效评价多集中在炮制前后药效的变化和比较。
3 讨论
中药药效通过其自身化学成分的协同作用，多靶点治疗疾病。炮制可以改变中药的化学成分，特别是其有效成分，且同一中药经不同炮制方法可以发生不同的改变。对中药炮制品进行质量控制是实现中药有效治疗的基础，指纹图谱是近年来应用在中药质量分析和控制的良好方法。中药炮制的目的是为了改变药物的某些特性，实现“增效减毒”，因此，中药在炮制前后前后的质量分析不能脱离药物的药效分析。中药种类繁多，目前已建立指纹图谱和进行要药效评价的种类还很少，这需要广大科研工作者为此付出极大的努力和劳动。
参考文献：
[1] 肖永庆，张村，李丽. 中药炮制研究回顾与展望[J]. 世界科学技术（中医药现代化），2009，11（4）：536-540.
[2] 刘建平，王少云. 决明子炮制前后色谱图的变化[J]. 中药材，2009，32（9）：1364-1366.
[3] 朱妙琴. 天麻等中药材的裂解-气相色谱指纹鉴别[J]. 中国现代应用药学杂志，2005，22（4）：295-297.
[4] 施婧妮，陈进文，高建蓉. 鳖甲炮制前后抗肝纤维化有效物质部位HPCE指纹图谱的比较研究[J]. 中国中医药信息杂志，2011，18（2）：63-66.
[5] 孙慧，朱超，章弘扬. 大黄及其炮制品的液质联用分析及物质基础比较[J]. 中成药，2009，31（3）：420-425.
[6] 杨佰娟. 几种典型中药挥发油成分的气相色谱质谱指纹图谱方法学研究[D]. 国家海洋局第一海洋研究所，2007.
论文作者:田海林
论文发表刊物:《航空军医》2016年第14期
论文发表时间:2016/9/1
标签：中药论文; 药效论文; 指纹论文; 图谱论文; 方法论文; 色谱论文; 化学成分论文; 《航空军医》2016年第14期论文;