李生娇[1]2001年在《内分泌紊乱与牙周炎发病关系的实验研究》文中指出目的：牙周炎是口腔科的常见病之一，到目前为止其病因和发病机理并不十分清楚。以 近年来国内外对牙周炎的研究和现代生理学的发展为依据，我们推测：机体的 内分泌状况可能会在牙周炎的发生发展中起一定的作用。本实验旨在探讨机体 内分泌紊乱对牙周炎发生发展的影响，从而拓宽对牙周炎发病机理的认识，为 牙周炎的治疗提供新的理论依据。方法：1.第一部分（大鼠内分泌紊乱模型的建立）：SD雄性大鼠20只，体质量250g±， 分为对照组和激素组，激素组大鼠肌注醋酸可的松混悬液，4周后检测其静脉血 中皮质醇、促肾上腺皮质激素、睾酮及甲状腺素的含量。 2.第二部分（内分泌紊乱在牙周炎发病中的作用）：SD雄性大鼠64只，体质量 250g±。随机分为4组：空白对照组、单纯结扎组、单纯激素组、激素+结扎组； 于实验4周、6周、8周、10周分别处死4只大鼠，取下颌标本，检测牙周组织 的病理变化。观察指标： 第一部分： 激素水平：实验4周时静脉血中皮质醇、促肾上腺皮质激素、睾酮及甲状腺素的 含量。 第二部分： ①肉眼观察：观察牙周炎的发病情况；测量牙周袋深度（Periodontal deep，PD）， 并作统计学分析。 ②X线片观察：观察牙槽骨吸收情况；测量近中牙槽骨高度，进行统计学分析。 ③组织学观察：观察H-E染色组织片牙周组织的病理变化；破骨细胞计数并分析。 ④透射电镜观察：观察牙周组织中牙龈上皮细胞、牙周膜成纤维细胞、牙槽骨成 骨细胞、破骨细胞及骨细胞的超微结构。结果：1大鼠肌注醋酸可的松4周后可检测出血中皮质醇含量明显增高、促肾上腺皮质 第二军医大学 中文拘要 硕士学位论文 激素及睾酮含量明显陶氏，而甲状腺素的含量未见明显改变。 二单纯结扎组和激素＋结扎组牙周炎的表现明显；单纯激素组牙周炎的表现不明 显，但病理切片见牙槽骨稀疏湿着；激影结扎组的PD值、病理切片中的破 e胞数及近中牙栅的驱与其余 3组相比差异显着帜o 00，a PD值 随时间延长呈上升趋势，电镜见：牙＆是上皮细胞水肿，细胞之间连接疏松，桥 粒少，可贝台u＄1Kllg断裂，上皮内及上皮下结缔组织中有中性粒细胞或淋巴细 胞浸润；牙周膜中胶原疏松，成纤维细胞中粗面内质网和线粒体较少，牙周膜 中血管扩张充血：牙槽骨中骨4傈稀疏，骨表面成骨细胞少，并可见成骨细胞 的变性及骨细胞的溶解；破骨细胞中含较多溶酶体、线粒体和粗面内质网。 结论：1．醋酸可的松反馈抑帘幌肾上腺皮质激素分泌并使静脉血中睾酮含量下降 2．在细菌存在的 出上，机体内分泌摹活贿剖回驻牙周炎的发展 3．内分泌紊8［，nx－－＊ru＊＊周炎的影响是通过机体修复sgb的陶氏而实现的 4．内分泌紊8［，rs－－－－ra＊周炎发展的影响与时间呈正相关性
李生娇, 曹志中, 周中华[2]2002年在《糖皮质激素对牙周炎发病作用的实验研究》文中研究指明目的 探讨糖皮质激素对牙周炎发生发展的影响。方法 SD雄性大鼠 6 4只 ,分为对照组、单纯结扎组、单纯激素组及激素 +结扎组。肌注醋酸可的松混悬液致内分泌紊乱 ,15天后用牙颈部丝线结扎法[1] 诱发牙周炎 ,观察牙周组织的变化。结果 激素 +结扎组牙周炎的表现最明显 ,牙周袋深度及破骨细胞数与其余 3组相比均有显着差异 (P <0 .0 1) ,电镜观察发现成纤维细胞及成骨细胞功能不活跃 ,而破骨细胞功能活跃。结论 糖皮质激素能加速牙周炎的发展 ,与其引起的组织修复能力降低有关
杨倩[3]2008年在《人参皂甙Rg1对人牙周膜细胞生物学活性及大鼠牙周组织相关细胞因子表达的影响》文中研究指明目的:1、研究玻片覆盖法原代培养人牙周膜细胞的成功率及生物学性状;在此基础上研究人参皂甙Rg1对原代培养的人牙周膜细胞生物学活性的影响。2、通过给Wistar大鼠肌注糖皮质激素及牙间结扎钢丝建立一种近似人类临床牙周炎的动物模型,研究人参皂甙Rg1对大鼠实验性牙周炎模型的牙周组织中白介素6(IL-6)、骨钙素(BGP)表达的影响。方法:1、利用形态学、免疫组化方法来观察玻片覆盖法原代培养人牙周膜细胞的成功率及其生物学特性,并鉴定其来源。2、在体外培养人牙周膜细胞的基础上,采用噻唑蓝(MTT)比色法、考马斯亮蓝法、酶动力学方法探讨人参皂甙Rg1对原代培养的人牙周膜细胞增殖活性、蛋白合成、碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。3、采用流式细胞技术观察人参皂甙Rg1对体外培养人牙周膜细胞细胞周期的影响。4、体外培养人牙周膜细胞经钙荧光指示剂Fluo-3负载后,用激光扫描共聚焦显微镜测定人参皂甙Rg1影响前后的细胞内游离钙离子浓度随时间变化情况。5、选用100只体重160-200g Wistar大白鼠,随机分成10组,每组10只。A组:正常对照组,于实验开始(0周)时处死。B-E组:人参皂甙Rg1治疗组。F-J组:牙周炎对照组。B-E组分别于牙周炎模型建立并给药后第1、2、3、4周处死,每次一组。F-J组分别于牙周炎模型建立后第0、1、2、3、4周处死,每次一组。切取大鼠上颌磨牙牙周组织标本作切片,免疫组织化学方法对IL-6、BGP进行染色,光镜观察,测量灰度值,进行统计学分析。结果:1、玻片覆盖法可显着提高人牙周膜细胞原代培养的成功率。2、人参皂甙Rg1对牙周膜细胞生长增殖的影响与对照组相比人参皂甙Rg10.005μmol/L,0.01μmol/L,0.05μmol/L,0.1μmol/L,1μmol/L组均能明显促进细胞增殖(P＜0.05),且在0.01-0.05μmol/L浓度范围内作用时间最长。3、人参皂甙Rg1对牙周膜细胞蛋白含量的影响与对照组相比人参皂甙Rg10.01μmol/L,0.05μmol/L,0.1μmol/L组72小时细胞培养液中蛋白含量均明显高于对照组(P＜0.05)。4、人参皂甙Rg1对牙周膜细胞ALP活性的影响:与对照组相比人参皂甙Rg10.01μmol/L,0.05μmol/L,0.1μmol/L组72小时细胞培养液中ALP活性均明显高于对照组(P＜0.05)。5、人参皂甙Rg1对牙周膜细胞内游离钙离子浓度的影响:人参皂甙Rg1(0.01μmol/L)使人牙周膜细胞内游离钙离子降低,最后维持在比加药前低的静息钙水平上。6、人参皂甙Rg1对细胞周期的影响:FCM检测显示经0.01μmol/L人参皂甙Rg1作用48h后,牙周膜细胞G_1期细胞降低(P＜0.05),S期细胞升高且细胞增殖指数PrI值(S+G_2/M)%显着增高(P＜0.05)。7、大鼠实验性牙周炎动物模型的成功建立:动物采用牙间结扎加激素注射第4天后便出现了进食减少、倦怠少动等表现,符合中医肾虚的症状,并且出现了牙槽骨疏松、牙槽嵴吸收、牙周袋形成等病理性改变。正常组大鼠则无上述表现。牙周炎组牙周组织中BGP表达明显低于正常组,IL-6表达明显高于正常组(P＜0.05)。8、人参皂甙Rg1对大鼠牙周组织中有关细胞因子表达的影响:从治疗第二周起,治疗组较牙周炎对照组牙周组织中的BGP水平明显升高(P＜0.05);治疗第叁周起,治疗组较对照组牙周组织中的IL-6水平显着降低(P＜0.05),经治疗后的实验动物全身状况也显着改善。结论:玻片覆盖法可显着提高人牙周膜细胞原代培养的成功率。人参皂甙Rg1在一定浓度范围内能提高牙周膜细胞的增殖活性、蛋白合成及碱性磷酸酶活性。人参皂甙Rg1使牙周膜细胞G_1期细胞减少,S期细胞增加,细胞增殖指数PrI值(S+G_2/M)%增高,促进更多的细胞进人增殖状态,且人参皂甙Rg1可能通过改变细胞内游离钙离子的浓度,达到其促进细胞增殖的作用。牙间结扎加糖皮质激素注射的方法可成功地建立近似于人类临床牙周炎的动物模型,为下一步研究中药防治牙周炎提供了很好的实验基础。大鼠实验性牙周炎模型牙周组织中IL-6含量较正常对照组明显升高,BGP含量较正常对照组明显降低,应用人参皂甙Rg1能显着抑制实验性牙周炎模型牙周组织中IL-6的表达,同时升高BGP的含量。根据上述结果证实人参皂甙Rg1可促进创伤愈合和组织再生,具有治疗牙周炎并改善全身状况的作用,从而为人参皂甙Rg1治疗牙周病的临床合理用药提供科学依据。
参考文献：
[1]. 内分泌紊乱与牙周炎发病关系的实验研究[D]. 李生娇. 第二军医大学. 2001
[2]. 糖皮质激素对牙周炎发病作用的实验研究[J]. 李生娇, 曹志中, 周中华. 临床口腔医学杂志. 2002
[3]. 人参皂甙Rg1对人牙周膜细胞生物学活性及大鼠牙周组织相关细胞因子表达的影响[D]. 杨倩. 兰州大学. 2008