李小龙[1]2004年在《灯盏花素的心肌保护作用及其机制研究》文中指出缺血性心脏病是一种严重的心血管系统疾病，其发病机制复杂，与机体的很多系统有着密不可分的联系，从细胞和分子层面来看，心肌细胞的物质代谢系统、能量代谢系统和基因表达的各个环节都会或多或少的受到缺血缺氧的影响而发生改变，这种改变同时又参与了心肌缺血性疾病的发病过程。药物一直是防治缺血性心脏病最重要的手段之一。天然产物中许多活性物质具有抗心肌缺血、缺氧作用，因而从天然产物中寻找具有抗心肌缺血、缺氧生理活性的有效物质，是发现、开发新药的重要途径。 灯盏花素系中药灯盏花中提取的黄酮类成分，具有抗脑缺血损伤、改善器官血流动力学和微循环、改善学习记忆等多方面的作用，在临床上已比较广泛的应用，但国内外对灯盏花素心肌保护作用的实验研究的报道比较少，特别是在细胞水平灯盏花素对心肌细胞的保护作用研究。本研究的目的就是结合整体动物冠脉结扎所致心肌梗塞模型和体外的心肌细胞损伤的细胞模型等不同层次的心肌缺血缺氧损伤模型，在整体、组织、细胞以及分子等不同水平上对灯盏花素的心肌保护作用进行研究并探索其保护作用机制。 1、采用犬冠脉结扎后所导致的心肌梗塞模型，通过测定不同时间点心电图ST段总和(∑ST)心外膜电图心肌缺血范围(NST)，以及对心肌梗塞范围的定量组织学检测，研究了灯盏花素对心肌缺血程度和缺血范围的影响。测定了犬冠脉结扎前后血清LDH和CK的变化并观察了灯盏花素对其的影响。在离体心肌组织上测定了灯盏花素对心肌耗氧量的影响。研究结果显示，灯盏花素可显着降低犬冠脉结扎后心外膜电图心肌缺血的程度(∑ST)和范围(NST)，用N-BT染色法得到的结果也证明灯盏花素可减小冠脉结扎所致心肌梗塞的范围；而且灯盏花素可以降低犬冠脉结扎后血清LDH和CK活性的升高，减少心肌耗氧量。证明灯盏花素有良好的抗心肌缺血的作用。 2、用体外培养的乳鼠心肌细胞建立了体外缺氧和氧化(H_2O_2)损伤模型，在心肌细胞体外缺氧模型上，检测了心肌细胞体外缺氧后LDH渗漏，在心肌细胞体外氧化损伤模型上，检测了心肌细胞的代谢活性和超氧化物歧化酶(SOD)的活性变化，并观察了灯盏花素对这些指标的影响，研究了灯盏花素对心肌细胞的直接保护作用。研究发现灯盏花素可降低缺氧所致心肌细胞LDH的渗漏，浙红才学麟士学世触戈有很好的抗缺氧损伤的作用，并可提高活性氧损伤后心肌细胞代谢活性和SOD活性，显示出良好的抗活性氧自由基损伤的作用，证明灯盏花素对心肌细胞有直接的保护作用。 3、在心肌细胞体外缺氧和氧化(HZOZ)损伤模型上，用流式细胞技术结合内叻exinV-FITC护I染色技术检测了心肌细胞的凋亡和坏死，并研究了灯盏花素对其的作用，国内外未见报道。很多研究证明心肌细胞凋亡是心肌缺血性疾病的重要机制之一，心肌细胞凋亡是急性心肌梗塞引起细胞损害的主要方式，而坏死是继细胞凋亡之后梗塞区细胞进一步丧失的主要原因。实验结果表明灯盏花素可以显着降低体外缺氧损伤和氧化损伤所致心肌细胞凋亡和坏死比率，有良好的抗心肌细胞凋亡作用，说明抑制心肌细胞的凋亡是灯盏花素的心肌保护作用的重要机制之一。 4、在心肌细胞体外缺氧模型上，用共聚焦激光显微技术结合Flu。一3染色技术研究了灯盏花素对由缺氧所致心肌细胞内Ca，十水平的异常增高的影响，未见类似报道。研究发现灯盏花素可以抑制缺氧所致心肌细胞内Ca，十的增高，表明这也是灯盏花素心肌保护作用的重要机制之一，并且与抑制心肌细胞凋亡的作角密切相关。 5、在心肌细胞体外氧化(HZOZ)损伤模型上，用流式细胞技术结合特异性抗体荧光染色技术研究了灯盏花素对HZOZ损伤后凋亡相关基因Fas.和Bcl一2表达的影响，未见类似报道。研究发现损伤所致Fas表达升高的程度远远超过了Bcl一2表达升高的程度，灯盏花素可抑制损伤所致Fas表达的升高并增强Bd一2的表达，但其抑制Fas表达的作用要强于增强Bcl一2表达的作用。说明抑制Fas表达和增强Bcl一2表达是灯盏花素抑制心肌细胞凋亡的重要机制之一。 在以上研究结果的基础上，本研究得出灯盏花素心肌保护作用的作用机制可能与以下几个方面有关:(1)抑制心肌细胞内Ca2+水平的异常增高，从而减轻心肌缺血性疾病的发生过程中Ca，+超负荷所造成的对心肌细胞的各种损害。 (2)增强细胞的抗氧化功能，减轻活性氧自由基对心肌细胞的损伤。(3)通过抑制FaS的表达和轻度增强Bcl一2的表达，同时又在抑制细胞内CaZ+水平的异常增高和抗活性氧损伤等作用的参与下，抑制心肌缺血性疾病的发生过程中心肌细胞的凋亡和继发性的坏死，从而起到心肌保护作用。
齐叁利[2]2009年在《灯盏花素联合预适应对兔缺血再灌注心肌TNF-α、NF-κB的影响》文中研究指明目的观察在体新西兰大白兔缺血再灌注心肌中TNF-α、NF-κB蛋白表达情况,初步探讨灯盏花素在缺血再灌注损伤中的作用。方法采用在体兔心肌缺血再灌注损伤模型,将36只新西兰大白兔随机分为4组。⑴假手术组(Sham组):麻醉开胸后,左室支结扎处只穿线不结扎;⑵心肌缺血再灌注组(IR组):麻醉开胸后,左室支阻断30min,再灌注120min;⑶缺血预适应组(IP组):麻醉开胸后,左室支阻断5min,继灌注5min,再循环2次后,左室支阻断30min,再灌注120min;⑷灯盏花素+缺血预适应组(BI组):麻醉开胸后,经左颈外静脉注入灯盏花素5mg·Kg-1,15分钟后同IP组。每组9只,各组分别于缺血前5min、缺血30min及再灌注2h时抽取血样进行心肌酶学CK、LDH检查,并于实验结束时取结扎线以下的左室游离壁及心尖部心肌组织采用伊文思蓝(EB)/氯化叁苯基四氮唑(TTC)测定梗死面积,取梗死危险区心肌分别进行HE染色及免疫组化染色后检测TNF-α及NF-κB蛋白表达水平,并采用Garcia评分法进行半定量分析。结果(1)再灌注2h后,心肌梗死面积(%),sham组:0;IR组:52.00±1.13;IP组:32.83±1.81;BI组:24.30±1.47。IR、IP及BI组较Sham组均有明显的心肌梗死(P < 0.01),IP、BI组较IR组心肌梗死面积明显缩小(P < 0.01),且BI组较IP组梗死面积缩小更明显(P < 0.05);(2)心肌酶学:缺血前5min,sham组:CK 2125.33±148.35,LDH 173.58±16.85; IR组:CK 2151.42±88.86,LDH 176.25±15.95;IP组:CK 2088.67±68.86,LDH 172.33±14.21;BI组:CK 2104.00±78.27,LDH 168.50±15.68。缺血30min , sham组: CK 2088.42±69.32 , LDH 176.42±15.79;IR组:CK 3617.50±97.43,LDH 466.50±26.42;IP组:CK 2559.00±103.31,LDH 332.08±20.68;BI组:CK 2459.83±92.35,LDH 310.25±23.16。再灌注2h,sham组:CK 2148.67±63.53,LDH 177.42±16.94;IR组:CK 4676.33±78.61,LDH 591.17±25.67;IP组:CK 3011.83±79.98,LDH 362.08±12.99;BI组:CK 2936.58±80.08,LDH 339.50±24.96。IR、IP及BI组较Sham组均能明显升高心肌酶(P < 0.01),IP、BI组各时间点CK和LDH均较IR组明显降低(P < 0.01),且BI组较IP组降低更明显(P < 0.05);(3)NF-κB蛋白表达评分:sham组:0.73±0.32;IR组:3.51±0.58;IP组:2.62±0.69;BI组:2.01±0.62。IR、IP及BI组较Sham组NF-κB蛋白表达均明显增加(P < 0.01);IP组、BI组NF-κB蛋白表达均较IR组显着较少(P < 0.01),且BI组较IP组更明显(P < 0.05)。(4)TNF-α蛋白表达评分:sham组:0.81±0.30;IR组:4.06±0.59;IP组:3.01±0.48;BI组:2.60±0.27。IR、IP及BI组较Sham组TNF-α蛋白表达均明显增加(P < 0.01);IP组、BI组TNF-α蛋白表达均较IR组显着较少(P < 0.01),且BI组较IP组更明显(P < 0.05)。结论心肌缺血再灌注可以导致心肌组织的再灌注损伤,而缺血预适应及灯盏花素联合预适应均显着缩小心肌梗死面积,降低心肌酶,减少心肌细胞内TNF-α、NF-κB蛋白的表达。其对缺血再灌注损伤心肌的保护作用机制可能与减轻再灌注心肌的炎性损伤有关。
韩凤伟, 龚明玉, 杨杰[3]2012年在《灯盏花素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及STAT表达的影响》文中研究说明目的观察灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注细胞凋亡和信号转导及转录激活因子(STAT)表达的影响,初步探讨其可能的作用机制。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。将40只SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组,灯盏花素1组[25 mg/(kg.d)],灯盏花素2组[50 mg/(kg.d)]。缺血30min、再灌注2 h后,原位末端标记法测定组织中心肌细胞凋亡率,免疫组化SP法检测心肌组织中STAT蛋白的表达。结果与假手术组相比,缺血再灌注组细胞凋亡率明显升高(P<0.01),SP染色见STAT1蛋白表达显着增强(P<0.05或<0.01),但STAT3蛋白表达显着减少(P<0.05或<0.01);与缺血再灌注组相比,灯盏花素1、2组细胞凋亡率明显下降(P<0.01),STAT1蛋白表达显着减少(P<0.05或<0.01),但STAT3蛋白表达显着增强(P<0.05或<0.01)。结论灯盏花素能够减轻缺血再灌注造成的心肌损伤,其机制可能与灯盏花素干预STAT蛋白表达,从而减少心肌细胞凋亡有关;STAT途径可能是灯盏花素抑制细胞凋亡的途径之一。
贾俊海, 陈素仙, 苏一星, 范廷潞, 张茜[4]2006年在《灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用》文中研究指明目的:观察大鼠心肌缺血再灌注(M IR)时AngⅡ、ALD、IGF-1、ICAM-1和自由基代谢的变化及灯盏花素对其影响,探讨大鼠M IR损伤的机制。方法:SD大鼠30只,分为假手术对照(sham)组,M IR组和灯盏花素+M IR组,放免法检测血浆AngⅡ、ALD和血清IGF-1水平。免疫组织化学法检测心肌ICAM-1蛋白表达。检测血清、心肌组织SOD、MDA和GSH-PX及心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性。结果:与sham组相比,M IR组血浆AngⅡ、ALD明显升高,血清IGF-1含量明显降低;灯盏花素干预后血浆AngⅡ、ALD低于M IR组,血清IGF-1水平高于M IR组。与sham组相比,M IR组心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性明显下降;灯盏花素干预后心肌线粒体Na+,K+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-ATP酶活性明显升高。与sham组相比,M IR组血清、心肌MDA明显升高,血清、心肌SOD和GSH-PX明显降低;灯盏花素干预后血清、心肌MDA低于M IR组,心肌SOD和GSH-PX水平高于M IR组。与sham组相比,M IR组心肌ICAM-1蛋白表达明显升高;灯盏花素干预后心肌ICAM-1蛋白表达低于M IR组。结论:AngⅡ、ALD增高和IGF-1减低可能共同参与了M IR的发生。M IR时存在自由基代谢异常,补充灯盏花素后,可通过提高SOD活性,增高GSH-PX水平,降低MDA含量,减轻脂质过氧化和自由基损伤,改善心肌组织功能。M IR时有大量ICAM-1蛋白表达,与心肌损伤关系密切。灯盏花素可通过减少ICAM-1蛋白表达,起到心肌保护作用。
赵国安, 张叁强, 陈志刚, 殷国田, 孙海燕[5]2006年在《灯盏花素对家兔缺血预适应心肌保护作用的影响》文中认为目的探讨灯盏花素(Bre)对家兔缺血预适应(IP)心肌保护作用的影响。方法32只新西兰大耳白兔通过左冠状动脉左室支穿以丝线造成心肌缺血再灌注(R),随机分为心肌缺血再灌注(I/R)组、Bre+I/R组、IP组和Bre+IP组,测定各组动物的心肌梗死面积及心肌酶、血浆内皮素(ET)和一氧化氮(NO)含量变化。结果Bre和IP可减少心肌梗死范围,降低肌酸激酶、乳酸脱氢酶和ET含量,增加NO含量,联合应用Bre+IP可进一步加强心肌保护作用。结论Bre可以对缺血心肌产生保护作用,联合应用Bre可以加强IP对心肌的保护作用。
杨颖婷[6]2012年在《灯盏花素对糖尿病大鼠心肌保护作用的实验研究》文中进行了进一步梳理目的通过观察灯盏花素对糖尿病大鼠心肌结构和心脏功能的影响，探讨灯盏花素对糖尿病大鼠心肌的保护作用及可能机制。方法健康SD大鼠30只，随机选取20只尾静脉注射链脲佐菌素（Streptozocin,STZ），造模成功后随机分为糖尿病组（Diabetes Mellitus,DM组）和灯盏花素治疗组（Breviscapine treatment,Bre组），余10只作为正常对照组（Normal Control,NC组）。Bre组给予灯盏花素注射液20mg·kg~(-1)·d-（120mg/5ml）腹腔内注射，DM组和NC组等量生理盐水腹腔内注射，12周后，尾静脉取血测各组大鼠血糖；测定大鼠血流动力学；计算全心及左心指数；光镜观察各组心肌结构改变，Masson胶原染色观察间质胶原沉积情况；电镜观察心肌超微结构改变；免疫组化法检测各组大鼠心肌TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白表达水平变化；RT-PCR检测各组大鼠心肌TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA含量变化。采用SPSS13.0统计软件对实验数据进行统计学分析处理。结果与对照组相比，糖尿病组和灯盏花素组血糖值明显升高（P﹤0.01）；全心及左心指数增加、血流动力学指标左室内压最大上升和下降速率（±dp/dtmax）、左室收缩压（Left ventricular systolic blood pressure,LVSP）明显下降，左室舒张末压（Left ventricular end-diastolic pressure,LVEDP）明显升高（P<0.01）；间质胶原沉积增多（P﹤0.01）；TGF-β_1、Smad3蛋白表达水平及mRNA含量均明显升高（P﹤0.01），Smad7蛋白表达水平及mRNA含量降低（P﹤0.01）；电镜下肌丝排列紊乱，溶解，线粒体增多，部分空泡状；与糖尿病组相比，灯盏花素组实验末血糖值无明显差异（P﹥0.05）；左心及全心指数、血流动力学指标±dp/dtmax、LVSP升高，LVEDP下降（P<0.05或P<0.01）、间质胶原沉积均改善（P﹤0.01）；TGF-β_1、Smad3蛋白表达及其mRNA含量降低（P﹤0.01），Smad7蛋白表达及其mRNA含量显着升高（P﹤0.01）；灯盏花素组光镜、电镜下心肌病理变化均明显改善。结论灯盏花素可减轻糖尿病大鼠心肌的病理改变，保护糖尿病大鼠心脏功能，其机制可能是通过调节心肌组织中TGF-β_1、Smad3、Smad7蛋白及mRNA的表达水平，从而抑制糖尿病大鼠心肌的纤维化来发挥对糖尿病大鼠心脏的保护作用。
董超, 王海松, 李素杰, 周瑾, 龚明玉[7]2011年在《灯盏花素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡相关基因表达的影响》文中认为心肌缺血再灌注损伤是心脏缺血性疾病和心脏外科围术期常见的一种病理生理现象,临床常见到再灌注后心律失常、心肌顿抑等。近年研究表明,在再灌注时细胞凋亡
徐雯霞, 杨淑艳, 钟秀宏, 王玮瑶, 张以忠[8]2015年在《灯盏花素防治心肌缺血再灌注损伤的研究现状》文中提出灯盏花素具有散寒解表、通经活络、止痛消积等功效,是一味高效的活血化瘀药。临床主要用于治疗心脑血管等疾病。近年研究表明,灯盏花素可作用于心肌缺血再灌注损伤的多个环节发挥心肌保护作用,其主要作用机制与清除自由基、抑制细胞凋亡、降低细胞因子的释放、增加心肌内ATP含量和ATP酶活性等有关。
赵喜娟, 许霞, 张厚霞[9]2016年在《灯盏花素联合预适应对心肌缺血-再灌注损伤兔心肌组织炎症因子的影响》文中进行了进一步梳理目的研究灯盏花素联合预适应对心肌缺血-再灌注损伤兔心肌组织炎症因子的影响。方法选取60只新西兰大白兔作为研究对象,分为正常组、模型组、预适应组、灯盏花素组和联合处理组,通过结扎冠脉前降支40min后解除的方法建立缺血再灌注损伤模型,分别给予预适应、灯盏花素注射等处理条件。检测心肌酶谱指标和炎症因子含量。结果 (1)心肌酶谱:模型组的心肌酶谱含量低于对照组,灯盏花素组、预适应组和联合处理组的心肌酶谱含量低于模型组,联合处理组的心肌酶谱含量低于灯盏花素组和预适应组(P<0.05);(2)炎症因子:模型组的炎症因子含量低于对照组,灯盏花素组、预适应组和联合处理组的炎症因子含量低于模型组,联合处理组的炎症因子含量低于灯盏花素组和预适应组(P<0.05)。结论灯盏花素联合预适应有助于减少心肌损伤、降低心肌酶谱含量和缓解炎症反应,保护缺血-再灌注损伤心肌。
石建, 曾安宁, 熊德高[10]2016年在《灯盏花素改善应激性心肌病大鼠心功能异常的机制》文中进行了进一步梳理目的探讨灯盏花素改善应激性心肌病心功能异常的机制。方法 48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、灯盏花素组和JAK通路抑制剂AT9283组(n=12)。采用束缚加点击符合应激法制备应激性大鼠模型,并进行灯盏花素干预治疗,分析各组大鼠心脏功能变化及JAK通路蛋白的表达变化。结果应激性大鼠左心室收缩压明显降低(P<0.01),左心室舒张压、心脏指数和心肌组织羟脯氨酸含量明显升高(P<0.01);同时,细胞凋亡蛋白Bax、Caspase3和Caspase6及JAK1、JAK2、JAK3、TIMP1、TIMP2、TIMP4、GRP78和CHOP蛋白表达水平明显升高(P<0.01),TGFβ、Bcl2蛋白表达明显降低(P<0.01)。经灯盏花素干预后上述异常得到明显的恢复(P<0.01)。结论灯盏花素改善应激性大鼠心肌病心功能异常可能与其调控JAK通路异常激活和细胞凋亡过程有关。
参考文献：
[1]. 灯盏花素的心肌保护作用及其机制研究[D]. 李小龙. 浙江大学. 2004
[2]. 灯盏花素联合预适应对兔缺血再灌注心肌TNF-α、NF-κB的影响[D]. 齐叁利. 新乡医学院. 2009
[3]. 灯盏花素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及STAT表达的影响[J]. 韩凤伟, 龚明玉, 杨杰. 山东医药. 2012
[4]. 灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用[J]. 贾俊海, 陈素仙, 苏一星, 范廷潞, 张茜. 江苏大学学报(医学版). 2006
[5]. 灯盏花素对家兔缺血预适应心肌保护作用的影响[J]. 赵国安, 张叁强, 陈志刚, 殷国田, 孙海燕. 中国康复理论与实践. 2006
[6]. 灯盏花素对糖尿病大鼠心肌保护作用的实验研究[D]. 杨颖婷. 辽宁医学院. 2012
[7]. 灯盏花素对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡相关基因表达的影响[J]. 董超, 王海松, 李素杰, 周瑾, 龚明玉. 承德医学院学报. 2011
[8]. 灯盏花素防治心肌缺血再灌注损伤的研究现状[J]. 徐雯霞, 杨淑艳, 钟秀宏, 王玮瑶, 张以忠. 吉林医药学院学报. 2015
[9]. 灯盏花素联合预适应对心肌缺血-再灌注损伤兔心肌组织炎症因子的影响[J]. 赵喜娟, 许霞, 张厚霞. 西北药学杂志. 2016
[10]. 灯盏花素改善应激性心肌病大鼠心功能异常的机制[J]. 石建, 曾安宁, 熊德高. 中国老年学杂志. 2016