1，青岛市胸科医院 胸二科 266043
2，青岛疗养院 体检中心 266000
摘要：目的 探究结核性胸膜炎患者胸腔积液T淋巴细胞亚群动态变化的临床意义。方法 随机选取2015年4月~2016年6月来我院就诊并且已经确诊为渗出性的结核性胸膜炎患者50例作为观察组，另选取50例正常患者作为对照组。
对比观察组和对照组患者中的外周静脉血以及胸液中的T细胞亚群改变差异。结果 观察组患者的CD3＋、CD8＋T细胞数量显著性高于对照组（P<0.05），CD4＋T细胞观察组和对照组无显著性差异（P>0.05），CD4＋/CD8＋的比例则对照组显著性高于观察组（P<0.05）。化学治疗后，观察组的CD8＋T细胞显著性降低（P<0.05）；CD4＋/CD8＋比例显著性升高（P<0.05）；CD3＋、CD4＋则无显著性差异（P>0.05）。结论 对患者的静脉血以及胸水中的淋巴细胞亚群可以加强对结核性胸膜炎的鉴别，化学治疗后，对患者的细胞免疫抑制状态可以有着显著性改善。
关键词：结核性胸膜炎；胸腔积液；T淋巴细胞；临床意义
【中图分类号】R181.3+2【文献标识码】A【文章编号】1001-5213(2016)08-0300-01
Abstract: objective to explore the tuberculous pleurisy patients with pleural effusion of the dynamic variation of the T lymphocyte subgroup clinical significance. Methods randomly selected in April 2015 ~ June 2016 to our hospital and it has been diagnosed with 50 cases of exudative tuberculous pleurisy patients as observation group, the other selected 50 cases of normal patients as control group.
Contrast observation group and control group in patients with peripheral venous blood and thoracic fluid changes in T cell subgroup differences. Results observation group number of CD3 + and CD8 + T cells in patients with significantly higher than that of control group (P < 0.05), CD4 + T cells in observation group and control group no significant difference (P > 0.05), the proportion of CD4 + / CD8 +, the control group significantly higher than in observation group (P < 0.05). After chemical treatment, the observation group of CD8 + T cells were significantly lower (P < 0.05); CD4 + / CD8 + ratio significantly higher (P < 0.05); CD3 +, CD4 +, no significant difference (P > 0.05). Conclusion for patients with venous blood and lymphocyte subsets of chest water can strengthen the identification of tuberculous pleurisy, chemical treatment, cells of the patients with immunosuppressive state can have a significant improvement.
Key words: tuberculous pleurisy; Pleural effusion. T lymphocyte; Clinical significance
结核性胸膜炎的发病主要机制是MTB和特异性的抗原以及致敏免疫T细胞产生的细胞免疫反应产生了互相作用和影响。产生结核性的胸腔积液中有大部分的淋巴细胞为CD4＋细胞，属于T细胞的一种[1]。T细胞由于分类方式不同可以区分为不同的亚群，因为T细胞的代谢产物不同分为Th1 和Th2细胞，前者主要是可以产生γ-干扰素以及IL-2，本身为保护性细胞因子；Th2的代谢因子主要有IL-4以及IL-10，其作用为破坏细胞因子[2-4]。两种免疫反应相互拮抗，其平衡状态对于结核性胸膜炎有着重要的影响。为了了解结核性胸膜炎患者的T淋巴细胞的亚群以及活化特征，笔者已经确诊为渗出性的结核性胸膜炎患者50例进行研究后，具体结果如下。
1 资料和方法
一般资料
随机选取2015年4月~2016年6月来我院就诊并且已经确诊为渗出性的结核性胸膜炎患者50例，年龄最大为76岁，最小为14岁，平均年龄为（28.90±5.08）岁，男性患者38例，女性患者12例。遴选标准：在患者痰液结核杆菌检测结果为阳性；PPD为1:10000结果为阳性并且存在肺结核患者接触历史；在患者的肺部有结核病病灶；有十分明显的结合中毒症状，存在发热、呼吸急促以及气息较短，有咳嗽等胸部疼痛临床表现；检测患者胸水时其病理性改变和结核性胸膜炎的症状符合；抗结核治疗措施有效。排除标准：就诊前患者使用过激素或者免疫调节剂；肝炎患者；严重的肝肾类疾病；妊娠期患者。将此50例患者作为观察组，另选取50例正常患者作为对照组。
研究方法
将患者在治疗前进行胸腔的穿刺手术，并且对胸腔液进行取样，并且采集两组患者的静脉血10mL，观察组患者经过化学疗法后进行胸腔液以及静脉血采集。对照组患者则进行静脉血取样操作。
将胸腔液在200μm的尼龙网进行过滤操作，放进离心管，加5ml的RPMI，在20℃条件下离心十分钟后清除上清液后，将混悬液在20ml的RPMI后进行离心操作，将混悬细胞加入7ml的RPMI后再加PBS将细胞冲洗，在25℃条件下进行离心，清除上清液后，重复离心操作，混悬细胞加入RPMI备用。使用台盼蓝计算其中的活细胞数量。将已经肝素化处理的去除红细胞混悬液加入PBS后，加入Ficoll-Hypaque进行离心，清除血浆以及血小板后，将中间的单核细胞层至离心管后，加入HBSS液洗涤细胞，离心，清除上清液，将混悬细胞加入RPMI后留存。使用台盼蓝计算其中的活细胞数量。将静脉血中以及胸腔积液中的淋巴细胞计数，通过RPMI调节细胞度，将淋巴细胞放置在Hanks的缓冲液，再分别加入抗CD3-APC、CD4-FITC、相对应的IgG对照蛋白在4℃下培育半小时，使用相应的Hanks缓冲液冲洗两次后，使用多聚甲醛进行固定，之后使用流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8的细胞数量。
统计学处理方法
所有数据均通过SPSS21.0统计学软件进行分析处理，计量数据通过平均值±标准差表示，显著水平设为0.05，即当P<0.05，差异具有统计学意义。
结果
观察组和对照组的T细胞亚群的对比
观察组患者的CD3＋、CD8＋T细胞数量显著性高于对照组（P<0.05），CD4＋T细胞观察组和对照组无显著性差异（P>0.05），CD4＋/CD8＋的比例则对照组显著性高于观察组（P<0.05）。具体结果如表1所示。
讨论
至今结核病是在全球的人类公共健康卫生情况的问题威胁最大，中国作为结核病发病率较高的国家之一，结核病的发病人数处于法定的报告的甲、乙类传染病。其发病原因有许多，主要是由于感染了相关的细菌，细胞的多少以及毒性强弱、以及人体本身的免疫应答能力都是对该病的病程发展有着至关重要的影响[5]。目前临床认为，结核病的免疫反应主要是细胞免疫反应，依靠T细胞群其主要作用。当受到结核杆菌等抗原刺激后会转换成极强致敏性的淋巴细胞，二次刺激发生后，淋巴细胞会出现分裂增殖等现象，同事分泌淋巴因子，此过程同时激活巨噬细胞，从而使得巨噬细胞体积变大，溶酶体含量增加，使得细胞被水解、消化或者杀灭。T淋巴细胞是细胞免疫的基础，所有的T细胞亚群中CD4＋和免疫细胞有着最为密切的联系。CD4＋细胞能够分泌各种IL-2，T-IFN等炎症因子，加强NK毒性细胞的活性，发挥抗肿瘤的作用，CD8＋T细胞具有对患者免疫功能产生抑制作用，和患者的肿瘤的病发、转移记忆发展有着十分紧密的联系[6-8]。从本次试验结果发现，结核性胸膜炎患者的外周血的CD4＋细胞水平并无显著性改变（P>0.05），CD3＋、CD8＋T细胞数量显著性高于对照组（P<0.05），CD4＋/CD8＋的比例则对照组显著性高于观察组（P<0.05）。推测CD4＋/CD8＋比例变化的原因是由于CD8＋细胞数量变高，因为观察组患者的细胞免疫抑制。在静脉血以及积液检查结果显示：CD8＋T细胞显著性降低（P<0.05）；CD4＋/CD8＋比例显著性升高（P<0.05）；CD3＋、CD4＋则无显著性差异（P>0.05），推测由于化学治疗后肿瘤细胞出现大量的死亡或者凋亡，一直以肿瘤的负荷出现减少后最终免疫抑制因子减少。因此，细胞的比值可以作为患者的细胞免疫状态的估计指标，如果细胞免疫失衡则T细胞亚群出现显著性改变。患者的静脉血以及胸水中的淋巴细胞亚群可以加强对结核性胸膜炎的鉴别，化学治疗后，对患者的细胞免疫抑制状态可以有着显著性改善。同时也可以看出CD4＋、CD8＋等淋巴细胞数量对肺结核细菌诱导的细胞免疫具有十分重要的意义，通过流式细胞仪对患者的外周静脉血以及胸积液进行T细胞的检测后，对患者的病情的诊断以及治疗效果有着积极意义，可在临床上进一步推广运用[9-10]。
参考文献：
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论文作者:邹悦1 韩娜2
论文发表刊物:《中国医院药学杂志》2016年8月
论文发表时间:2016/10/25
标签：细胞论文; 患者论文; 胸膜炎论文; 淋巴细胞论文; 胸腔论文; 免疫论文; 结核性论文; 《中国医院药学杂志》2016年8月论文;