孙兵 瞿伟清 宋静艳 高北星
（江苏省江阴市远望医院 214431）
【摘要】目的 探究循环酶法测定血清总胆汁酸时所应用的常规生化试剂对测定结果的干扰作用，并提出改进措施，提高测定准确性。方法 使用循环酶法测定血清总胆汁时使用多种常规澳林生化试剂作为干扰项目。分析不同试剂的干扰作用，确定干扰因素，并在此基础上提出改进措施。结果 通过对处理前后多种常规澳林生化试剂的分析，确定尿酸（UA）、三酰甘油（TG）以及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）对检测结果的干扰作用最为明显，且进行数据统计学分析，结果显示有统计学意义（P<0.05）。结论 用循环酶法测定血清总胆汁酸时会受一些生化试剂的干扰，产生交叉污染现象，尤其值得注意的是尿酸、三酰甘油以及低密度脂蛋白胆固醇等常规澳林生化试剂的干扰性更为明显，应重视这些干扰因素，通过彻底清洗试验仪器和合理安排测试顺序等措施尽量减少干扰因素的影响作用，确保测定的准确性。
【关键词】循环酶法；血清总胆汁酸；生化试剂；干扰；改进
【中图分类号】 R2 【文献标号】 A 【文章编号】 2095-7165（2015）09-0276-01
血清总胆汁酸（简称血清TBA）包括多种胆酸在内，如脱氧胆酸、熊脱氧胆酸、鹅脱氧胆酸等，是肝脏合成的一种胆汁酸。研究表明，健康人的血清TBA 水平极低，而当肝内/ 肝外出现阻塞，或肝细胞遭到损害的情况下血清TBA 水平会出现明显升高的现象[1]。鉴于此，医学上常通过检测血清TBA 的水平作为评定肝脏疾病患者病情的重要依据。目前，循环酶法是检测血清TBA 的主要方法。该检测方法使用方便，操作相对简单，且检测准确率高，是应用最广的血清TBA 检测方法。但利用循环酶法检测血清TBA 时，常与生化试剂有接触，并易产生交叉污染，从而干扰检测结果。本研究即选取了我科进行循环酶法检测血清TBA 时常接触的一些澳林生化试剂作为干扰项目，探究干扰因素，并在此基础上探讨改进措施。现总结试验结果如下。
1. 标本来源和试验方法
1.1 标本来源
选取血清TBA 作为研究项目，并进行循环酶法测定。本研究的检测试剂为澳林常规生化试剂，包括ALT、GGT、TP 、TG、UA、TP、LDL-C。血清标本中无溶血、黄疸以及脂血。
1.2 方法
选择全自动生化分析仪（贝克曼AU5800）对待测样本进行循环酶法测定血清TBA。检测之前，先浸泡清洗好全自动生化分析仪及其配套工具。然后认真检查仪器的质量，并对仪器进行校准，及时更换或调整仪器以达到标准使用要求。将收集的标本制成混合血清，对每一份均进行5 次血清TBA 测量，取平均值。然后再对各项组合项目（如UA/TBA、TG/TBA、LDL-C/TBA）分别进行5次测定，最后测定TBA 水平。然后对反应杯、试剂针以及搅拌棒等进行清洗，按规范要求设置特殊冲洗程序。选择300mlHCL（1M）→ 300mlNaOH（1M）作为反应杯、试剂针以及搅拌棒等用具的清洗液，最大限度上减少污染情况。最后将UA、TG、LDL-C 试剂作为标本重新测定TBA，测定次数同样为5 次，再按照特殊冲洗程序对各项组合项目进行重测，同样测定5 次，取平均值。记录各测定结果，并计算相应的平均值。
1.3 统计学方法
对试验中所需数据使用SPSS17.0 软件进行统计处理，用 ±s 表示计量资料，并使用t 检验，用x2 检验计数资料。P<0.05 表示数据差异较大，存在统计学意义。
2. 结果
2.1 未处理前各项组合项目的测定结果
对制成的混合血清中含有的血清TBA 含量进行测定，取平均值为8.18±0.02μmol/L。而对ALT、GGT、TP 、TG、UA、TP、LDL-C 项目中的血清TBA 进行检测的结果与单独测定的血清TBA 数值进行比较，可以发现除UA、TG、LDL-C 项目生化试剂与单独测定的血清TBA 数值之间存在统计学意义（P<0.05）之外，其余各项与单独测定的血清TBA 数值之间均不存在统计学意义（P>0.05）。由此可见，生化试剂UA、TG、LDL-C 对TBA 测定结果有明显影响。各项目检测值结果以及与单独测定的血清TBA数值之间的统计学处理结果具体见表1。
2.2 经特殊冲洗后各项组合项目的测定结果
特殊冲洗后的检测结果显示，未处理前UA、TG、LDL-C 对测定结果的干扰现象得以解决，三项具体检测结果如下：UA/TBA的血清TBA 均值为8.25±0.02μmol/L（t=1.62）、TG/TBA 的血清TBA 均值为8.22±0.01μmol/L（t=1.58）、LDL-C/TBA 的血清TBA 均值为8.19±0.02μmol/L（t=1.51），差异显示无统计学意义（P>0.05）。
3. 讨论
在进行自动化分析时，进行常规清洗程序，一般很难彻底清除干净反应杯、试剂针等中一些特殊试剂的化学成分，这些残留物是污染物的主要来源，而前一项目的试剂残留成分可能会对后一项目产生干扰，从而对检测结果形成干扰[2]，通过以上研究结果也证明了这一点。通过试验研究结果可知，常见的澳林生化试剂UA、TG、LDL-C 是干扰循环酶法测定血清TBA 结果的重要因素。但在进行血清TBA 测定时难免会接触到这些常规生化试剂，若处理不当则易使污染物渗入，从而产生交叉污染现象，干扰测定结果。为保证测定结果不受干扰，提高测定的准确性，应采取有效的改进措施，从最大程度上减少和避免出现测定值偏高的情况。
为此，笔者认为应做好以下防范工作。通过试验得知试剂针、反应杯以及搅拌棒等若不能彻底清洗干净就会影响检测结果。因此，首先要避免以上用具不能受到污染。应对这些用具进行认真清洁，力求从源头上控制干扰因素。例如研究中使用的碱性清洗液能有效清除干净这些用具的残留物，可借鉴使用。另外，对各检测项目的先后顺序应进行科学、合理调整，即设置合理的特殊冲洗程序。这要求检测人员必须熟练掌握各种试剂的化学成分以及成分之间的化学反应作用，避免出现前后两种成分发生作用而对检测结果产生干扰的情况。最后，在实际的检测过程中，易出现交叉错位污染的情况，检测人员应严格按照规范流程进行各项检测工作，并在检测过程中时刻保持高度的警惕性，争取最大程度上减少误差现象，确保检测的准确性。
参考文献：
[1] 徐国超. 观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施[J]. 国际检验医学杂志,2015,36(05):701-702.
[2] 李海聪，方欢英，陈智瑾等. 脂类物质对血清总胆汁酸检测的干扰和携带污染分析[J]. 国际检验医学杂志，2014，35（11）：1407-1409.
论文作者:孙兵 瞿伟清 宋静艳 高北星
论文发表刊物:《医师在线》2015年5月第9期供稿
论文发表时间:2015/7/1
标签：血清论文; 试剂论文; 干扰论文; 胆汁论文; 生化论文; 统计学论文; 项目论文; 《医师在线》2015年5月第9期供稿论文;