摘要 目的：采用顶空气相色谱法测定盐酸左氧氟沙星中的乙醇、环己烷和甲苯3种有机溶剂的残留量。方法：以DB-624毛细管色谱柱（30m×0.53mm，3μm），氮气为载气，起始温度为40℃，维持10分钟，以每分钟10℃的速率升至130℃，而后采用220℃后运行保持3分钟。检测器温度为250℃，进样口温度为170℃。结果：乙醇、甲苯、环己烷分别在7.7998~71.1982μg?ml-1（R2=0.9999），102.1666~919.4994μg?ml-1（R2=0.9990），77.5901~698.3109μg?ml-1（R2=0.9962）范围内，线性关系良好，三种残留溶剂的平均回收率的RSD值依次为0.56%、1.55%、4.18%。且采用本法测定三种残留溶剂的含量均未检出。结论：本方法稳定、简便、准确，灵敏度高，适用于盐酸左氧氟沙星中残留溶剂的测定。
关键词：盐酸左氧氟沙星；残留溶剂；顶空气相色谱法
盐酸左氧氟沙星[1]是第三代喹诺酮类抗菌药物，具有光谱的抗菌和杀灭细胞内病原体的作用。用于治疗各种敏感细菌引起的轻、中度感染，对大多数肠杆菌科细菌，如大肠埃希菌、克雷白菌属、沙雷菌属、变形杆菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌、不动杆菌以及铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、淋球菌等革兰阴性细菌有较强的抗菌活性。盐酸左氧氟沙星合成途径复杂，在生产过程中使用了环己烷、甲苯、乙醇3种有机溶剂。根据《中国药典》四部通则[2]中残留溶剂测定法的规定，环己烷系人用药品注册技术要求国际协调会（ICH）限制使用的第一类溶剂，甲苯和乙醇系ICH限制使用的第二类溶剂，需对这三种溶剂的残留量进行检测，以便加以控制。本文建立了顶空气相色谱法[3]同时测定3种残留溶剂的残留量，现报道如下。
1 仪器与试药
美国安捷伦 7890B型气相色谱仪（FID检测器）；Chemstation色谱工作站；DB-624毛细管色谱柱（30m×0.53mm，3μm）。
盐酸左氧氟沙星原料药（浙江普洛康裕制药有限公司，批号：KYLH-M20150901B，99.5%）；环己烷（国药集团化学试剂有限公司，批号：20131121，99.5%）、甲苯（国药集团化学试剂有限公司，批号：20150105，99.5%）、乙醇（国药集团化学试剂有限公司，批号：20140328，99.5%）、二甲亚砜（国药集团化学试剂有限公司，批号：20140625），水为纯化水。
2 方法与结果
2.1 溶液的配制
2.1.1 供试品溶液的制备
取本品约0.1g，精密称定，置顶空瓶中，精密加入溶剂（二甲亚砜：水(1:1)）10ml，密封，振摇使溶解，作为供试品溶液。
2.1.2 对照品溶液的制备
取乙醇约79mg、环己烷约15.6mg、甲苯约13.8mg，精密称定，置100ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，再精密量取5ml，置100ml量瓶中，用溶剂稀释至刻度，制成含乙醇39.5μg?ml-1、环己烷7.8μg?ml-1、甲苯6.9μg?ml-1的溶液；精密量取10ml置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。
2.2 色谱条件
以DB-624毛细管色谱柱（30m×0.53mm，3μm），起始温度为40℃，维持10分钟，以每分钟10℃的速率升至130℃，而后采用220℃后运行保持3分钟。检测器温度为250℃，进样口温度为170℃。顶空瓶平衡温度为80℃，平衡时间为30分钟。
2.3 系统适用性试验及结果
取对照品溶液和空白溶剂照上述气相色谱条件进样分析，色谱图见图1。结果表明，环己烷、甲苯和乙醇的保留时间分别为2.070、5.573、0.741min，各成分峰之间的分离度均大于1.5，符合《中国药典》[2]的要求。
2.4 线性关系的考察
取乙醇约79mg、环己烷约15.6mg、甲苯约13.8mg，精密称定，置100ml量瓶中，用溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，作为母液。再分别精密量取不同体积的母液，置100ml量瓶中，加以稀释，制成不同浓度水平的对照品溶液分别进样，以对照品浓度X((μg?ml-1)为横坐标，测得峰面积Y为纵坐标进行线性回归，测得乙醇、环己烷与甲苯的回归方程，回归方程的相关系数R2均不得小于0.99，确定线性范围（结果见表1）。实验结果表明各残留溶剂在各自的浓度范围内均呈现良好的线性关系。
2.5 精密度试验
取对照品溶液1份，分装于六只顶空瓶中，按2.2项色谱条件测定峰面积，环己烷、甲苯、乙醇的RSD分别为8.50%、4.53%、0.62%，试验结果表明精密度良好。
2.6 灵敏度试验
将2.1.2.项下对照品溶液用溶剂（二甲亚砜：水(1:1)）逐步稀释，直至检测峰高为基线噪声的8~12倍为止，结果得到环己烷、甲苯、乙醇的定量限为3.78、10.25、6.09ng。
2.7 回收率试验
从对照品溶液浓度的100%水平考察，并且在100%水平平行配制6份样品溶液。每个浓度的准确度溶液的平均回收率在85%~115%之间；6个回收率数据的RSD不得大于6.0%，结果见表2。
2.8 溶液稳定性
分别精密量取在室温条件下放置不同时间段的对照品溶液，按2.2项色谱条件进行测定。结果表明，对照品溶液放置22小时内，环己烷、乙醇、甲苯峰面积的的RSD依次为9.7%、4.6%、9.2%，实验结果表明对照品溶液放置22小时内是稳定的。
3 讨论
采用顶空气相程序升温法测定盐酸左氧氟沙星中三种残留溶剂的含量，该色谱条件下色谱峰出峰速度快，在10min内能全部检出，且环己烷、乙醇、甲苯峰的分离度好。《中国药典》2015版中[2]规定环己烷、乙醇、甲苯的限度依次为0.050%、0.50%和0.089%。本品按照本法测定结果均未检出，说明本品工艺稳定可行。本文建立的方法稳定、简便、准确，灵敏度高，适用于盐酸左氧氟沙星原料中残留溶剂的测定。
参考文献
1 中国药典[S].2015版.四部通则0861 残留溶剂测定法
2 NING W, WU X, LIN H, et al. Determination of Residual Solvents in Valaciclovir Hydrochloride by Headspace Gas Chromatography [J][J]. China Pharmacy, 2012, 9: 026.
论文作者:石小磊,宋人杰 刘寒寒 吴静
论文发表刊物:《医师在线》2016年8月第15期
论文发表时间:2016/10/21
标签：环己烷论文; 溶剂论文; 溶液论文; 甲苯论文; 乙醇论文; 色谱论文; 氧氟沙星论文; 《医师在线》2016年8月第15期论文;