王辉1 韩锁柱1 李莉娜2 李衎1 张博1
1哈尔滨市中医医院 150076
2哈尔滨市红十字中心医院 150076
摘要：目的：研究分析疣安颗粒的制备方法和质量标准。方法：此次研究的研究方法是采用水煮醇沉工艺制成颗粒剂，采用薄层色谱法对白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、黄柏进行定性鉴别。结果：采用薄层色谱法对白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、苍术、黄柏进行定性鉴别特征性强、重现性好。结论：本颗粒制备方法合理、简便、可行，所建立的质量标准可为疣安颗粒的临床应用和疗效提供保证。
关键词：疣安颗粒；质量标准；薄层色谱
Abstract: Objective: To study and analyze the preparation and quality standard of verruca granules. Methods: the research method is to make the granules by the process of boiling and alcohol precipitation, and the TLC method is used to determine the qualitative identification of Rhizoma Atractylodes, tuckahoe, Alisma orientalis, purple grass, black plum and cypress. Results: TLC was used to identify Rhizoma Atractylodis macrocephala, Rhizoma Smilax glabra, Rhizoma alismus, Radix Smilax, Fructus Mume, Rhizoma Atractylodis and Phellodendron chinense. Conclusion: the preparation method of this granule is reasonable, simple and feasible. The established quality standard can provide a guarantee for the clinical application and efficacy of the Warren granule.
Key words: Warren granule; quality standard; TLC
疣安颗粒由黄芪、白术、土茯苓、苍术、黄柏、薏仁、丹皮、通草、泽泻、马齿苋、紫草、乌梅等多味中药组成，具有清热解毒、利尿消肿、健脾除湿、消炎的功能，用于利尿除湿，在临床上用于湿疣的预防和治疗。为了更好地发挥其疗效，便于临床服用，将原方制成颗粒剂，并制定质量标准。采用水煮醇沉工艺制成颗粒剂，采用薄层色谱法对其主要成分白术、土茯苓、泽泻、紫草、乌梅、苍术、黄柏进行定性鉴别。结果表明所建立的方法准确、快速、灵敏，可以作为该颗粒剂的质量控制标准。
1仪器与试剂
1.1仪器
ZF-1型三用紫外分析仪（上海骥辉科学分析仪器有限公司），RE-52AA型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂），SH2-Ⅲ型循环水真空泵（上海亚荣生化仪器厂），FC204型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司），DZF-6020型真空干燥箱（上海精宏试验设备有限公司），WK2102型电磁炉（美的集团股份有限公司），TDL-50B低速离心机（上海沪粤明科学仪器有限公司），A6300型相机（日本索尼公司），展开缸等。
1.2试剂
本实验药材购自安徽井泉集团中药饮片有限公司：白术（批号：150601）、土茯苓（批号：150501）、泽泻（批号：150301）、紫草（批号：150501）、乌梅（批号：150501）、苍术（批号：150501）、黄柏（批号：150301）、薏仁（批号：150501）、通草（批号：150501）、丹皮（批号：150501）。
样品：疣安颗粒，本实验室自制。
2方法与结果
2.1疣安颗粒的制备
将该处方中的12味中药材备齐、净选，按处方8倍量投料加水煎煮两次，合并煎煮液，减压浓缩至相对密度1.05～1.10，加95%乙醇沉淀过夜（至含50%醇量），滤取上清液。减压低温浓缩至稠浸膏（60～65℃测定相对密度为1.20～1.25）。取干燥的糖粉适量，置搅拌机中混合均匀，加稠浸膏1份搅拌混合，加适量75%乙醇调整湿度制成软材，造粒机挤压过10目筛制成湿颗粒，60～65℃干燥，整粒过筛，共得颗粒2 kg。
2.2质量标准研究
2.2.1白术的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10 g，加正己烷20ml，超声处理15 min，取滤液作为供试品溶液。另取不含白术的阴性样品及白术对照药材各10 g，同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色譜法（《中华人民共和国药典》2015年版Ⅳ部通则0502，下简称通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（60～90℃）一乙酸乙酯（50：1）为展开剂，展开，取出，晾干。喷以5%香草醛硫酸溶液，加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。
期刊文章分类查询,尽在期刊图书馆
2.2.2土茯苓的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约5 g，加甲醇20 ml，超声处理30 min，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml，使其溶解作为供试液；另取不含土茯苓的阴性样品及土茯苓对照药材5 g，同法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-醋酸乙酯-甲酸（5：4：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以20 g/L三氯化铝乙醇试液，放置5 min后，于紫外光灯（365 nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无相应的斑点；阴性对照无干扰。
2.2.3泽泻的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10g，加水40ml溶解，加饱和食盐水2ml，充分振摇，用乙醚振摇萃取2次，30 ml/次，合并乙醚液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1 ml溶解，作为供试品溶液。取泽泻对照药材10g，加水适量，煎煮30 min，滤过，滤液浓缩至20 ml，按照供试品溶液制备方法制备，作为对照药材溶液；取不含泽泻的阴性样品10 g，同法制成阴性对照溶液。按薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯：乙酸乙酯：甲酸（10：6：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。
2.2.4紫草的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约5 g，加石油醚（60～90℃）20ml，超声处理20min，滤过，滤液浓缩至约1 ml。另取不含紫草的阴性样品及紫草对照药材各5 g，同法制成阴性对照溶液和对照药材溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5：5：0.5：0.1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%氢氧化钾甲醇溶液，斑点变为蓝色。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。
2.2.5乌梅的TLC鉴别 取3个批次的疣安颗粒适量研细，称约10g，加热水50 ml使溶解，放冷，用醋酸乙酯振摇提取2次，每次30 ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加无水乙醇1 ml溶解，作为供试品溶液。另取乌梅对照药材5 g，加水50ml，煮沸1 h，放冷，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；另取不含乌梅的阴性对照药品10 g，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验，吸取上述5种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（5：3：1）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照溶液无相应的斑点；阴性对照无干扰。
2.2.6黄柏的TLC鉴别 取供试品粉末2 g，加1%醋酸甲醇溶液40ml，于60℃超声处理20min，滤过，滤液浓缩至2 ml，作为供试品溶液，另取黄柏对照药材2 g，加1%醋酸甲醇溶液40ml，同法制成对照药材溶液，取缺黄柏的阴性对照品，同法制成阴性对照溶液。照薄层色谱法试验点板，以石油醚（60～90℃）：甲酸乙酯：甲酸（5：15：1）的下层溶液为展开剂，置氨蒸汽饱和的展开缸内展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰。
3讨论
疣安颗粒剂的制作由于处方中药煎煮出来的药液糖苷较多，醇沉过程中应避免搅拌，否则会引起在加入蔗糖粉进行搅拌至一定湿度时难度较大，造成过筛困难；考察醇沉时，分别加入30%、50%、60%的乙醇，结果50%乙醇浓度可以沉淀大部分鞣质，为制剂得到较好的浸膏；在对白术进行鉴别时，点样次数应多次，并每点1次应用吹风筒吹干再点第2次，避免展开后点扩散严重，影响鉴定；对于极性较大的样品，在展开剂的极性选择上应选用极性小的展开剂，否则引起拖尾，如土茯苓、黄柏、薏仁的鉴定。
疣安颗粒中白术、土茯苓、苍术、黄柏、薏仁、泽泻、紫草、乌梅薄层鉴别与阴性对照品相比无干扰，结果准确可靠，重现性好，适合于疣安颗粒的质量控制。
[参考文献]
[1]顾俊菲，张明华，封亮，等中药产品“多维结构过程动态质量控制技术体系”构建与应用（Ⅱ）[J]中国中药杂志， 2013， 38（21）：3618
[2]张明华，顾俊菲，封亮，等中药“多维结构过程动态质量控制体系”的研究策略和实践[J]中国中药杂志， 2013， 38（21）：3608
[3]刘丹，贾晓斌，郁丹红基于“组分构成”理论的中药质量控制新思路[J]中国中药杂志， 2012， 37（6）：865
[4]郭宝林，肖培根中药淫羊藿主要种类评述[J]中国中药杂志， 2003， 28（4）：303
[5]王秀坤，赵雍，梁爱华，等不同产地千里光急性毒性实验研究[J]药物不良反应杂志， 2008， 10（2）：81
[6]罗益远，刘娟秀，刘训红，等不同采收期何首乌中多元功效物质的动态积累分析[J]中国中药杂志， 2015， 40（13）：2565
[7]郭鹏，张铁军，朱雪瑜，等大黄毒性的现代研究与减毒对策[J]中草药， 2009， 40（10）：1671
[8]王伽伯，马永刚，金城，等对应分析在大黄炮制减毒"量毒"规律研究中的应用[J]中国中药杂志， 2009， 34（19）：2498
论文作者:王辉1,, 韩锁柱1,, 李莉娜2,, 李衎1
论文发表刊物:《中国医学人文》2018年第4期
论文发表时间:2018/6/26
标签：溶液论文; 阴性论文; 薄层论文; 黄柏论文; 乌梅论文; 药材论文; 色谱论文; 《中国医学人文》2018年第4期论文;