陈英 陈永强
（河北省沧州市人民医院耳鼻喉科，河北省军区沧州干休所，河北，沧州，061000）
【摘要】目的 研究Rho蛋白与喉癌易感性的关系。方法 采用病例对照研究方法，收集2010年1月至2015年1月的沧州市人民医院喉癌组织，同时直接抽样法选取喉部非癌组织作为对照。采用免用组织化学方法进行检测Roh蛋白（RhoC、Rac等）表达情况，（统计方法）研究分析Rho蛋白在正常喉组织及喉鳞状细胞癌组织中的表达情况，同时研究病理参数的相互关系，及在喉癌表达中的相关性。 结果 Rho蛋白在喉癌组织中分布阳性表达率为84.21%（16/19），高于非癌组织的阳性表达率33.33%（8/24），统计学两者差异具有显著性（x?=11.131，p=0.001）。结论 在喉癌组织中Rho蛋白分布明显高于非癌组织。这样提高了Rho蛋白和它们的效应因子成为抗肿瘤靶点，针对这些靶点，可以研究有效的药物或基因治疗物质，干涉Rho蛋白的功能，促进肿瘤临床治疗的发展。
【关键词】 Rho蛋白 喉肿瘤 抗肿瘤靶点
【Abstract】 Objective To evaluate the relationship between Rho protein and Laryngeal cancer susceptibility in the people. Methods With a hospital based case-control study, laryngeal carcinoma are Collected from January 2010 to January 2015 in Cangzhou City People's Hospital, direct sampling method to select the throat of non-cancerous tissue as control. Free use of tissue using chemical methods to detect Rho protein (RhoC, Rac, etc.) expression, (statistical methods) analysis in normal laryngeal tissue and laryngeal squamous cell carcinoma of the Rho protein expression. Results Distribution of Rho protein expression in laryngeal carcinoma was 84.21% (16/19), higher rates of non-cancerous tissue expression of 33.33% (8/24), the difference was statistically significant (x? = 11.131, p = 0.001). Conclusions Rho protein in laryngeal carcinoma was significantly higher than non-cancerous tissue distribution. This improves the Rho proteins and their anti-tumor effector become targets for these targets can be studied drugs or gene therapy effective substances, interference Rho protein function, promote the development of cancer clinical treatment.
【Key words】Rho protein Throat Cancer Anti-tumor targets
Rho蛋白包括Rho(RhoA、RhoB、RhoC)，Rac(RacA、RacB、RacC)，C4cd，Rnd等。在Rho家族中许多成员影响细胞的形态，个别成员影响细胞迁移对细胞起作用。目前认为，Rho蛋白主要通过影响细胞的迁移对肿瘤起作用。一些动物实验研究证明，Rho家族蛋白家族成员通过影响细胞周期进展和基因转录调节细胞的生存、生长和增殖。
肿瘤细胞在凋亡前对刺激敏感性有所提高，一段时间过后，其对凋亡前刺激的抗癌治疗产生抑制拮抗。在体内各细胞、体内肿瘤细胞、T细胞中，Rho和Rac(Rac1、Rac2)的刺激形式能够促进凋亡⑴，Rac作用靶蛋白通过MAD激酶途径，也能诱导凋亡⑵。有文献报道，Rho蛋白也可以增强凋亡前信号，破坏DNA的物质及法尼基转化酶抑制剂诱导的凋亡需要RhoB的作用⑶。
资料与方法
一、研究对象来源
研究2010年1月至2015年01月期间在沧州市人民医院耳鼻咽喉科手术切除的喉组织，其中喉鳞状细胞癌组织和喉部非癌组织各为43和10例。采用免疫组织化学方法检测Rho蛋白在喉癌组织及非癌组织中的表达情况。应用SPSS16.0统计软件进行统计分析。各组率的比较采用χ2检验和Fisher确切概率法。相关性分析用Spearman等级相关分析。
二、病例纳入及排除标准
1、病理类型为鳞状细胞癌。
2、肿瘤部位为喉癌。
3、所有患者均为初治、未经过放化疗，有完整的临床及病理学资料。
4、石蜡组织完整，福尔马林固定及石蜡包埋。大小适当，长径《2cm，宽＞2cm。
5、除外患者同期有原发癌及远处转移癌。
三、病理学诊断及临床分期标准
研究过程中，鳞状细胞癌及分化程度诊断依据世界卫生组织肿瘤分类及诊断标准（2006年，第1版）中有关标准，并经两名副主任医师以上病理科医生对病理组织进行判定，按照2002年国际抗癌联盟标准进行。
四、一般资料
研究2010年1月至2015年01月期间在沧州市人民医院耳鼻咽喉科手术切除的喉组织，其中喉鳞状细胞癌组织和喉部非癌组织各为43和10例。所有的肿瘤组织均经病理学确诊为鳞状细胞癌，喉部非癌组织为经病理证实切缘非癌组织。术前都未接受放疗与化疗，临床资料完备。喉癌病例中男性32例，女性11例；年龄范围45～76岁，中位年龄64岁。按照2002年美国癌症联合委员会（American Joint Committee on Cancer, AJCC）公布的喉癌分型方案，对43例喉鳞状细胞癌进行临床分型，其中声门型共25例，声门上型18例；病理结果报告，其中的19例有淋巴结转移，其它为无淋巴结转移者。
结果
Rho蛋白在喉癌组织中分布阳性表达率为84.21%（16/19），高于非癌组织的阳性表达率33.33%（8/24），统计学两者差异具有显著性（x?=11.131，p=0.001）。
讨论：
喉癌是头颈部常见的恶性肿瘤，严重威胁着人类健康。近年来其发病率明显增长，迄今，其病因不十分明确。可能与吸烟、饮酒、病毒感染、空气污染、性激素等因素有关⑷。随着分子遗传学、分子生物学和人类的基因组学的不断深入研究，其基因学研究已取得长足进展。
Rho蛋白通过影响细胞周期调节细胞的生长和增殖。而细胞周期进展涉及各种细胞周期蛋白依赖性酶（cyclin dependent kinases，CDK）的激活。据报道Rho、Rac和Cdc42能影响CDK调节子在细胞中的表达。例如，在Ras转染的成纤维细胞和乳腺癌中，Rho抑制CDK调节子p12Cip的表达，促进细胞周期的进展⑸。有文献报道p12Cip依赖CDK在细胞核中的表达，结合并抑制细胞质中的Rho激活酶，可在体外促进神经突生长。⑹
肿瘤细胞除了增殖失控外，还需要发生形态特点改变，才有利于穿过组织界面发生转移。Rho家族蛋白能够影响细胞形态和细胞迁移的控制。Rho蛋白和上皮极性的丧失有关，RhoE高表达能拮抗RhoA功能，促进极性的丢失和上皮细胞多层性的形成⑺。Rac1通过细胞极性基因par3和par6影响上皮细胞极性控制⑻。据国外研究报道，Rho蛋白在肿瘤中的突变和表达情况。在乳腺癌和睾丸精原细胞瘤中，RhoA的表达水平与疾病进展呈正相关⑼。以基因芯片分析确定黑素瘤细胞转移相关基因，发现RhoC是表达上调的基因之一⑽。由于Rho蛋白在肿瘤组织中高表达，且与临床效果密切相关，故Rho蛋白的表达水平有望成为喉癌有效的预后指标。
参考文献
⑴ Aznar S,Lacal JC.Rho signals to cell growth and apoptosis. Cancer Lett,2001,165(1):1-10
⑵ Xu Z,Kukekov N, Greene LA. POSH acts as a scaffold for a multiprotein complex that mediates JNK activation in apoptosis. EMBO J,2003,22(2):252-261
⑶ Liu AX, Cerniglia GJ, Bernhard EJ, et al. RhoB is required to mediate apoptosis in neoplastically transformed cells after DNA damage. Proc Natl Acad sci USA, 2001,98(11):6192-6197.
⑷ 孔维佳，主编. 耳鼻咽喉头颈外科学. 北京；人民卫生出版社，2005,264-269
⑸ Liberto M, Cobrinik D,Minden A. Rho regulates p21(CIPI), cyclin DI, and checkpoint control inmammary epithelial cells. Oncogene, 2002,21(10):1590-1599.
⑹Tanaka H, Yamashita T, Asada M, et al. Cytoplasmic p21 (Cip1/WAF1) regulates neurite remodeling by inhibiting Rho-kinase activity. J Cell Biol, 2002,158(2):321-329
⑺Hansen SH, Zegers MM, Woodrow M, et al. Induced expression of Rnd3 is associated with transformation of polarized epithelial cells by the Raf-MEK-extracellular signal-regulated kinase pathway. Mol cell Biol, 2000,2(8):E143-E145.
⑻Kim SK. Cell polarity: new PARtners for Cdc42 and Rac. Nat cell Biol,2000,2(8):E143-145.
⑼ Kamai T, Arai K, Tsujii T, et al. Overexpression of RhoA mRNA is associated with advanced stage in testicular germ cell tumour. BJU Int,2001,87(3):227-231.
⑽ Clark EA, Golub TR, Lander ES, et al. Genomic analysis of metastasis reveals an essential role for RhoC. Nature, 2000,406(6795):532-535.
论文作者:陈英 陈永强
论文发表刊物:《中华高血压杂志（综合临床）》2016年5月
论文发表时间:2016/7/13
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