钟伟明 (贵港市妇幼保健院 广西贵港 537100)
摘要:内毒素如果进入到人体的血液当中,会对人体的机体产生很多方面的致病作用,因此在这样的背景之下,找到内毒素准确可行的检测方法,能够在一定程度上有效的对患者的疾病进行治疗。随着医疗的不断进展,内毒素的检测方法也在不断的丰富和发展,且在临床当中有着广泛的应用。本文主要探讨内毒素的检测方法和临床进展,以此来为医学工作的开展提供有效的参考。
关键词:内毒素;检测方法;临床进展
内毒素是革兰阴性菌细胞壁上一种特有的结构,最主要的成分是脂多糖。细菌在死亡之后,内毒素会从细胞结构当中释放出来,最终进入到人体的血液当中,从而会对机体产生很多致病方面的作用,例如在人体的单核细胞和粒细胞当中,会释放出一些内源性的致热源,从而会导致人们出现发热的现象[1]。在这种致病菌的作用之下,补体也会被激活,从而凝血系统和血压会出现降低的情况,严重的情况下,会导致人们出现弥漫性的血管内凝血现象[12]。
一、内毒素的检测方法
内毒素从被人们发现至今,已经有百余年的历史,在1986年的时候,医学研究者首次发现内毒素,并且建立起了相应的实验方法检验细菌的内毒素,主要就是致热源检查法,这种方法目前已经成为临床检验血浆内毒素的重要基础方法,但是受到各种因素的影响,该方法几乎不再使用,但是却为其它方法的但是提供了基础和推动力[3]。当前在临床医学上,内毒素检测方法最主要是半定量法和定量方法,半定量法也就是常说的凝胶法,定量方法是浊度法、显色法和免疫法[4]。除此之外,一些生物学方面的方法和流式细胞术等,也会对内毒素进行有效的测定。
1、半定量法
半定量法主要通过试剂和内毒素产生凝集方面的反应,以此来完成定性或者半定量的内毒素检测工作[5]。在这种检测的方式当中,凝胶的形成是最终的反应终点,主要使用180°翻转目测法来进行操作,可以在一个合理的范围当中,进行半定量的测定工作[6]。这样的一种操作方法十分的经济和快捷,同时在结果的判读上是十分方便的,但是这种方式也会存在着精密度比较差的情况,并且凝胶的形成也容易受到反应物当中,一些成分的浓度和PH值的影响,因此没有办法进行精确的定量检测工作[7]。
2、定量法
伴随着实验方法的不断完善和仪器设备的更新,定量法也慢慢的对凝胶法进行取代,从而成为了内毒素检测的一种主流的操作方法[8]。这样的一种检测方法,在食品、医疗和药物的安全检测方面,都有着十分广泛的应用,同时它的准确性和快捷性更加突出,并且灵敏性也十分理想。显色法也被人们称之为显色基质法,这样的一种方法,最主要就是对内毒素和试剂之间反应所产生的凝固酶来进行测定[9]。这样的一种操作方式,在实际操作的过程当中会比较复杂,并且在显色过程当中,所需要的仪器和设备都比较昂贵,但是它的整体精确性十分突出[10]。浊度法主要通过浊度分析仪开展浊度方面的变化情况,它在对内毒素进行测定的时候需要有配套的仪器设备,同时检测的范围也十分宽泛,在操作上比较简便,因此能够被人们广泛的在临床当中进行使用[11]。免疫法在对内毒素进行测定方面的准确率和特异度都比较高,在操作方面相对比较繁琐,同时也缺乏临床方面的验证,因此还需要在临床当中进行进一步的简化和加强[12]。
3、其他
除了上述提到的方法之外,还可以利用高效液相色谱和流式细胞术以及细胞因子检测等完成内毒素含量的间接检测工作[13]。试剂检测内毒素的方法所获得的结果,容易受到蛋白酶等一些杂质的影响,对于这种依靠生物分子的内毒素感检测器来说,和人工合成的内毒素探针都会慢慢的得到开发和应用[14]。这些年来,在国外也报道了利用磁性传感器的一种流式细胞术,可以在一分钟当中快速地完成定量检测内毒素含量的操作,这样的一种方法主要是对一些特殊的因子进行利用,以此来完成整体的检测工作。这种检测方式目前在食品和医药行业当中,可以完成质量的控制工作,同时也可以对内毒素高通量检测产生有效的作用[15]。
二、内毒素检测的临床应用
伴随着革兰阴性菌感染率的不断增加,在国内外当中,人们也希望能够找到快速诊断内毒素血症和格兰阴氏败血症的方式[16]。毒素在进入到人体的循环系统当中,会对人体带来比较大的伤害,在有些情况下,存在的伤害会大于细菌感染本身的危害。有很多的研究都发现,内毒素和肝炎以及感染性疾病之间存在着比较密切的关系[17]。在这样的情况之下,对血液内毒素的水平开展定量方面的动态检测,可以在一定程度上使得临床衡量病情的轻重得到有效的提升,同时也能够对预后进行判断,能够在疾病的早期诊断和治疗当中发挥着重要的作用[18]。
1、内毒素检测在感染性疾病中的应用
内毒素是革兰阴性杆菌所导致的脓毒血症的最主要致病因子,比较常见的致病菌有大肠埃希菌和变形杆菌以及克雷伯杆菌等等,除此之外,铜绿假单细胞菌和牛肝菌也是比较常见的类型[19]。这些细菌会在人体的呼吸道和肠道以及泌尿道当中,导致一些局部感染的发生,或者通过其他的一些途径,例如手术或者外伤等等,进入到人体的血液循环系统当中,最终引发全身性的感染,使得患者出现败血症,导致内毒素血症的出现[20]。根据多项实验数据可以发现,内毒素是脓毒血症的重要致病因子,对于革兰阴性菌所导致的脓毒血症,在早期诊断当中的价值十分明显。根据相关的报道可以发现,在医院内的感染所导致的细菌性肺炎当中,革兰阴性杆菌所占据的比例达到了一半,同时病死率也会达到30%到40%之间。及时定量对血液当中的内毒素进行检测,可以在内毒素血症的快速诊断当中发挥着极大的作用,同时也能够提醒人们在临床当中选择一些诱生内毒素能力弱的抗菌药物[21]。
2、内毒素检测在肝脏疾病当中的应用
肝脏疾病主要是患者的肝功能受损,解毒能力减弱背景之下所产生的一种疾病,患者的肝脏出现疾病的时候,就容易导致肝外组织出现损伤,没有办法阻止肠道内的内毒素进入到血循环[22]。国内外的相关医学研究者,也通过大量的实验研究内毒素检测在肝脏疾病当中的利用情况[23]。国内有相关医学研究者对慢性肝炎患者内毒素的水平进行研究,发现慢性肝炎合并自发性腹膜炎组的内毒素水平明显要高于一些没有出现并发症腹膜炎组的患者。此外,也有其他的研究者,在实验的过程当中,对慢性重型肝炎的患者按照中医辨证的分析来进行分组,在对比实验当中发现,热毒入血症的相关系数是最大的,其次,热毒炽热症的系数也比较大[24]。通过这项研究,人们发现内毒素的水平和相应的评分分值之间会有着一个正相关的关系。对于出现肝硬化和慢性重型肝炎的患者来说,大多数都会出现一些中毒症状不明显的感染情况[25]。对于一些早期的症状,容易被肝病的症状所掩盖,因此对患者进行血清内毒素的定量检测,可以快速帮助他们发现体内存在的合并感染,同时也能够提示临床可以及时开展抗感染方面的治疗。由于没有办法提供样品方面的结果,因此尽管细菌培养的周期比较长,但是也没有办法被完全取代[26]。
3、内毒素的其他临床应用
内毒素是一个强力的热原性物质,比较微量的内毒素也会导致患者出现发热的症状,大多数的内毒素血症患者会看见一些原因不明的发烧状况,因此血浆内毒素的检测工作,可以帮助人们发现一些隐蔽的感染[27]。通过各项的研究,人们慢慢找到内毒素在其它临床方面的应用,例如:内毒素和儿童肠梗阻程度是有着一定的关系的,一般来说,血浆内毒素的水平越高,那么患儿出现并发症的概率也会越高[28]。
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三、结语
目前对于细菌内毒素的检测技术来说,已经在不断的推动过程当中越来越成熟,内毒素的快速检测方式,在临床当中能够对很多疾病进行初步的诊断,同时也在预后方面发挥着积极的作用,但是它所受到的影响因素也是比较多样化的,在这样的背景之下,合理的掌握对于内毒素检测的影响因素,可以更好地在临床当中发挥着积极的作用[29]。毒素的检测方法和临床进展,如果能够为人们所掌握,那么就能够更好地对相应的医学工作产生有效的推动[30]。在今后发展的过程当中,临床上还需要结合细菌培养以及耐药性试验,更好地推动内毒素检测工作的开展。
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论文作者:钟伟明
论文发表刊物:《航空军医》2018年8期
论文发表时间:2018/7/3
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