【摘要】 目的：调查贵阳地区丙型肝炎病毒（HCV）基因分型的分布情况，探讨本地区丙型肝炎患者基因分型与最高病毒载量、年龄、性别及6个月转阴率之间的相关性。方法：回顾性统计分析2012年8月～2015年12月期间的HCV RNA及HCV基因分型的数据。结果：对284例患者的外周血样本进行基因分型检测，显示I型131例，占总量的46.1%，非I型153例，占总量的53.87%；HCV基因I型、非I型平均年龄分别为45.0±12.4岁、37.9±10.4岁，差异具有统计学意义（P<0.05）；在性别分布上，不同基因型在男女比例上具有统计学差异（P<0.05），I型女性比例大于非I型；HCV基因不同型的最高病毒量及6个月转阴率均无统计学差异。结论：贵阳地区HCV分型与性别、年龄有一定的相关性，但与最高病毒载量与6个月转阴率没有相关性，提示了贵阳地区HCV具体分型可能较为复杂，下一步有必要做HCV具体分型的鉴定以指导以后的临床工作及研究。
【中图分类号】R512.6 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）30-0378-02
丙型肝炎病毒（HCV）感染是一个重要的全球公共卫生问题，目前约有1.8亿人感染了HCV[1]，每年有400万人被其感染[2]，约74%～85%的新增病例会转为慢性肝炎，部分病例逐渐向肝硬化、肝癌发展[3]。HCV属于黄病毒科丙型肝炎病毒属，是一种小型的、有包膜的单股正链RNA的病毒[4]，基因组约9.6kb，包含一个开放阅读框，编码一种约3000个氨基酸的多聚蛋白前体，后者在病毒自身蛋白酶和宿主细胞作用后，裂解成4种结构蛋白（核心蛋白C、糖蛋白E1、糖蛋白E2、P7）和六种非结构蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A、NS5B)[5]。
根据HCV C区、E1区和NS5B基因序列的不同，HCV可分为六个基因型以及众多亚型[6]。每一种基因型在地域上有不同的分布，存在明显的地理差异，在我国，较为常见的HCV基因型为1b、2a，以HCV 1b为主，其次为2型和3型，国内未见4型与5型的报告，6型相对较少[7]。
对HCV进行精确的分型有助于对临床试验准确分组，对研究抗HCV的药物对HCV的疗效以及耐药性有很大的帮助，同时也对治疗方案、诊断实验检测的改善和疫苗的研发起着同等重要的作用[8]。为了掌握病人体内HCV的复制情况，通常对HCV-RNA进行定量检测，其与HCV基因分型检测联合可帮助观察临床的治疗效果以及监测治疗后是否复发。本文通过研究贵阳地区HCV基因I型、非I型与病毒载量、年龄、性别、转阴率的关系，分析本区域HCV型别与这些指标相关性的规律性，这也为大致了解不同型别HCV在本地区的流行提供一定帮助。
2.资料与方法
2.1 临床资料
以2012年2月～2015年12月期间在贵州省人民医院就诊的HCV感染患者作为研究对象，分析HCV相关数据。
2.2 检验方法
2.2.1 HCV-RNA检测：采用逆转录PCR(RT-PCR)体外扩增技术，仪器采用VIIA7DX实时荧光定量PCR仪，试剂为上海科华生物工程股份有限公司生产的丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒。
2.2.2 HCV基因型检测：采用HCV分型特异性引物和荧光探针，应用RT-PCR联合TaqMan荧光探针技术对HCV进行分型检测，仪器采用VIIA7DX实时荧光定量PCR仪，试剂盒由上海之江生物科技股份有限公司提供。
2.3 统计学方法
所有的数据采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，P＜0.05为显著性差异。
3.结果
3.1 基因型与病毒最高载量的关系
对284例患者的外周血样本进行基因分型检测，结果显示I型131例，占总量的46.1%，非I型153例，占总量的53.9%。
231例HCV RNA结果能够进行准确定量，经分析，I型患者病毒最高载量平均水平6.45±0.95lg IU/mL，非I型患者病毒最高载量平均水平6.40±1.04lg IU/mL，I型与非I型患者的血清病毒最高载量无显著性差异。
3.2 基因型与性别的关系
从表1可见：基因I型的男性患者有60例，女性患者有71例；非I型的男性患者有88例，女性患者有65例。经分析，不同基因型的性别比例具有统计学差异（P＜0.05），I型中女性患者居多，非I型中男性患者居多。
表1 HCV基因型与性别的关系
Table 1 The relationship between HCV genotype and gender
4.讨论
本文分析了贵阳地区患者丙型肝炎病毒I型与非I型与最高病毒载量、患者性别、患者年龄及6个月转阴率之间的关系，得出：贵阳地区丙肝病毒I型与非I型最高病毒载量没有显著性差异，I型患者女性所占比例高于非I型，I型与非I型患者年龄有显著性差异，I型与非I型6个月转阴率没有显著差异。
我国常见的丙肝基因型为1b和2a型，其中以1b型为主，而本研究中，I型占46.1%，非I型占53.9%，I型与非I型患病数目差异不显著。这说明贵阳地区丙肝基因型的分布不符合国家整体分布规律，其具体基因型需要通过引物设计及测序检测。
本研究中I型与非I型患者的血清病毒载量无显著性差异，与雷华等[9]研究报道不符合，其报道指出基因型与血清病毒载量存在明显的相关性，基因I型有相对较高的病毒复制率；但本研究数据与梁跃东等[10]对贵阳地区对HCV的研究结果相符合。本研究结果与有些研究不同，原因可能是地域不同或具体型别不同造成的。
本研究资料表明，HCV基因型与性别具有相关性，Petruzziello等[11]报道过女性在I型中所占比例高于男性，本研究结果与其报道相符。本研究结果显示，I型与非I型患者的HCV-RNA均多集中在105～107之间，在其分布上无统计学差异。在284例基因分型患者中，基因I型6个月以内转阴率44.2%，非I型6个月转阴率45.5%，基因I型与非I型的短期转阴率基本相等。
综上所述，贵阳地区丙肝基因型并非以I型为主，且最高病毒载量、6个月转阴率指标与分型相关性不大，因此，其具体分型可能较为混杂，具体型别需要设计引物并用测序确定。
【参考文献】
[1] Mohd Hanafiah K，Groeger J，Flaxman AD， Wiersma ST. Global epidemiology of hepatitis C virus infection: New estimates of age-specific antibody to HCV seroprevalence [J]. Hepatology, 2013, 57(4): 1333-1342.
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[9] 雷华，戴静毅，柏保利等.昆明地区丙型肝炎患者基因分型及其临床意义[J].肝脏，2011，1:48-49.
[10] 梁跃东，杨兴林，张流，等.贵阳地区丙型肝炎患者病毒基因型与血清病毒载量及血液生化细胞学指标相关性研究[J].贵州医药, 2015, 1:14-17.
[11] Petruzziello A，Coppola N，Loquercio G, et al. Distribution pattern of hepatitis C virus genotypes and correlation with viral load and risk factors in chronic positive patients [J]. Intervirology, 2014, 57(6): 311-318.
论文作者:李荣辉,陈相好
论文发表刊物:《医药前沿》2016年10月第30期
论文发表时间:2016/11/3
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