张春燕, 舒雨雁[1]2001年在《神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的作用》文中认为目的 采用静脉注射神经生长因子偶联物(NGF-Tf)的方法,研究其对AD大鼠的影响.方法应用柱层析法从广西产中华眼镜蛇毒分离纯化有生物活性的NGF,并将NGF与Tf通过Biotin-Avidin连接,形成NGF-Tf.选用手术切断大鼠双侧隔一海
张春燕[2]2000年在《神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的作用》文中研究表明目的：采用静脉注射神经生长因子偶联物（NGF-Tf）的方法，研究其对AD大鼠的影响。方法：应用柱层析法从广西产中华眼镜蛇毒分离纯化有生物活性的NGF，并将NGF与Tf通过Biotin-Avidin连接，形成NGF-Tf。选用手术切断大鼠双侧隔—海马胆碱能通路的方法建立AD动物模型，每天从大鼠尾静脉注射NGF-Tf。分别以跳台试验和水迷路试验观察大鼠的学习记忆以及方向辨别能力；应用酶组织化学技术显示海马和隔区的ChAT，采用计算机病理图像分析系统测定酶活性以判断其胆碱能功能状态；并对相应区域作神经组织学检查。结果：模型组跳台试验错误次数明显增加，而NGF-Tf组错误次数较少，与模型组比较，在训练期有显著性差异（P＜0.05），测验期错误次数减少率亦可达50％。水迷路试验中，NGF-Tf组在10秒内抵达平台的正确反应平均数有明显提高，与模型组比较P＜0.05。NGF-Tf组ChAT染色较深，其IOD值与模型组比较，差异有统计学意义（P＜0.01）。光镜下，NGF-Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变，而模型组隔区萎缩性改变较明显，表现为神经元数目明显减少，细胞轮廓不清，有胶质细胞增生。正常对照组、NGF-Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变。结论：NGF-Tf能穿透BBB，有效防止模拟AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡，改善其学习记忆能力，促进其胆碱能神经元的功能恢复。
张春燕, 杨斌, 舒雨雁, 廖共山, 张学荣[3]2004年在《神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的保护作用》文中提出目的 探讨神经生长因子偶联物 (NGF -Tf)对老年性痴呆 (AD)大鼠的影响 .方法 以手术切断大鼠双侧隔 -海马胆碱能通路的方法建立AD动物模型 ,每天从大鼠尾静脉注射NGF -Tf .通过水迷路试验观察大鼠的记忆和方向辨别能力 ;对海马和隔区行神经组织学检查 ;应用酶组织化学技术显示相应区域的ChAT ,采用计算机病理图像分析系统测定酶活性以判断其胆碱能功能状态 .结果 水迷路试验中 ,NGF -Tf组在 10s内抵达平台的正确反应平均数提高 (p <0 .0 5 ) .光镜下 ,NGF -Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变 ,而模型组隔区萎缩性改变较明显 ,表现为神经元数目明显减少 ,细胞轮廓不清 ,有胶质细胞增生 ;正常对照组、NGF -Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变 .ChAT染色统计结果显示 ,正常对照组、NGF -Tf组大鼠的海马区及隔区IOD值与模型组比较 ,均有显著性差异 (p <0 .0 1) .结论 NGF -Tf能穿透血脑屏障 ,有效防止模拟AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡 ,改善其记忆和方向辨别能力 ,促进其胆碱能神经元的功能恢复
张春燕, 杨斌, 舒雨雁, 瘳共山[4]2003年在《神经生长因子偶联物对拟痴呆大鼠的作用》文中研究表明目的 :采用静脉注射神经生长因子偶联物 (NGF- Tf)的方法 ,研究其对痴呆 (AD)大鼠的影响。方法 :选用手术切断大鼠双侧隔——海马胆碱能通路的方法建立 AD动物模型 ,每天从大鼠尾静脉注射 NGF- Tf。分别以跳台试验和水迷路试验观察大鼠的学习记忆以及方向辨别能力 ;并对相应海马和隔区行神经组织学检查。结果 :模型组跳台试验错误次数增加 ,在训练期与正常组比较有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ;NGF- Tf组错误次数较少 ,与模型组比较 ,在训练期差异有统计学意义 (P <0 .0 5 ) ,测验期错误次数减少率亦可达 5 0 %。水迷路试验中 ,NGF- Tf组在 1 0 s内抵达平台的正确反应平均数提高 ,与模型组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。光镜下 ,NGF- Tf组隔区仅见轻微萎缩性改变 ,而模型组隔区萎缩性改变较明显 ,表现为神经元数目明显减少 ,细胞轮廓不清 ,有胶质细胞增生。正常对照组、NGF- Tf组和模型组的海马区未见明显病理性改变。结论 :NGF-Tf能穿透血脑屏障 ,有效防止模拟 AD病变的大鼠的基底前脑胆碱能神经元的变性和死亡 ,改善其学习记忆能力 ,促进其胆碱能神经元的功能恢复
李卉[5]2008年在《中华眼镜蛇（Naja naja atra）毒神经生长因子对PC12细胞阿片受体表达的影响》文中进行了进一步梳理目的:大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系(PC12)被广泛用于NGF的活性测定,同时用NGF处理PC12细胞后,PC12细胞分化成的交感神经元样细胞,在形态、生理、生化及功能方面接近于神经元,能形成神经突起和突触样连接,并且比较容易在体外稳定培养,是在分子水平上研究神经元分化较为理想的模型。但NGF促PC12细胞分化的具体机制还不清楚。有研究表明小鼠神经生长因子诱导PC12细胞分化时,内源性阿片受体有变化。提示我们NGF促PC12细胞分化的机制可能与阿片受体有关。因此,本文主要研究中华眼镜蛇毒神经生长因子(nNGF)对PC12细胞形态的影响及nNGF对PC12细胞阿片受体基因和蛋白质表达的影响,为进一步研究nNGF促PC12细胞分化机制提供一定的实验依据,同时也为nNGF的更广泛的研究奠定实验基础。方法:(1)显微镜观察50 ng/ml nNGF对体外培养的PC12细胞形态的影响。(2)用RT-PCR方法半定量地考察25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml nNGF对PC12细胞δ、κ阿片受体mRNA表达的影响的剂量效应;检测50 ng/ml nNGF处理后,设置5个不同时相点,观察PC12细胞δ、κ阿片受体mRNA表达与50 ng/ml nNGF的时间依赖关系;检测吗啡、纳络酮对nNGF作用的影响。(3)用Western blot方法检测25 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml nNGF对PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达的影响的剂量效应;检测50 ng/ml nNGF处理后,设置5个不同时相点,观察PC12细胞κ阿片受体蛋白质表达与50 ng/ml nNGF的时间依赖关系;检测吗啡、纳络酮对nNGF作用的影响。主要结果与结论:(1)PC12细胞对nNGF很敏感,nNGF能促进PC12细胞高度分化,长出神经样纤维,形态类似于神经元。(2) nNGF处理后PC12细胞δ、κ阿片受体mRNA的表达都具有一定的剂量效应。随着nNGF使用剂量的增加,PC12细胞κ阿片受体mRNA水平的表达会降低,其中50 ng/ml剂量组对PC12细胞κ阿片受体mRNA表达水平的影响最显著,此剂量时κ阿片受体mRNA的表达水平最低;而PC12细胞δ阿片受体mRNA水平的表达则随剂量的增加而升高。(3) 50 ng/ml nNGF处理PC12细胞后,在1 d到10 d中,PC12细胞κ阿片受体和δ阿片受体mRNA水平的表达总体上相反,κ阿片受体mRNA水平的表达呈下调趋势;而δ阿片受体mRNA水平的表达呈上调趋势。(4) nNGF增强δ阿片受体mRNA的表达,该效应能被纳络酮逆转,而纳络酮的这个抑制作用又可以被吗啡逆转;nNGF降低κ阿片受体mRNA水平的表达,且能被吗啡、纳络酮分别逆转。(5) nNGF处理后PC12细胞κ阿片受体蛋白质和mRNA的表达趋势总体上一致。随着nNGF使用剂量的增加,PC12细胞κ阿片受体蛋白质水平的表达会降低,50 ng/ml剂量组对PC12细胞κ阿片受体蛋白质水平的影响最显著,蛋白质水平的表达最低。(6) 50 ng/ml nNGF处理PC12细胞后,在1 d到10 d中,PC12细胞κ阿片受体蛋白质的表达随时间的增加呈现降低的趋势,一直下调。(7) nNGF降低κ阿片受体蛋白质水平的表达,且能被吗啡、纳络酮分别逆转。(8) nNGF对阿片受体的表达有影响,阿片系统可能参与了nNGF促PC12细胞分化的过程。
参考文献：
[1]. 神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的作用[C]. 张春燕, 舒雨雁. 中国毒理学会第三届全国学术会议论文（摘要）集. 2001
[2]. 神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的作用[D]. 张春燕. 广西医科大学. 2000
[3]. 神经生长因子偶联物对老年性痴呆动物模型的保护作用[J]. 张春燕, 杨斌, 舒雨雁, 廖共山, 张学荣. 现代临床医学生物工程学杂志. 2004
[4]. 神经生长因子偶联物对拟痴呆大鼠的作用[J]. 张春燕, 杨斌, 舒雨雁, 瘳共山. 广西医科大学学报. 2003
[5]. 中华眼镜蛇（Naja naja atra）毒神经生长因子对PC12细胞阿片受体表达的影响[D]. 李卉. 重庆师范大学. 2008