（天水四〇七医院检验科）
摘要：目的 了解本地区肺炎链球的分布和耐药情况。方法 对我院2016年1月至2016年12月门诊和住院596例患者中分离的158株肺炎链球进行药敏试验，检测其对青霉素等抗生素的耐药性。结果 肺炎链球对青霉素的耐药性呈上升趋势。结论 本地区肺炎链球对青霉素的耐药性呈上升趋势，肺炎链球耐药性较为严重，应加强对肺炎链球菌的耐药监测，指导临床对抗菌药物的合理应用，建立本地区肺炎链球的抗菌谱。
关键词：肺炎链球菌；耐药性；耐药谱
肺炎链球菌是引起儿童急性呼吸道感染的重要条件致病菌之一，也是获得性肺炎的重要病原菌［1］，同时肺炎链球菌也可引起化脓性脑膜炎、中耳炎、心内膜炎和菌血症等。长期以来，由于肺炎链球菌生存条件较高，兼属性厌氧菌，又可产生自溶酶，菌落形态与甲型链球菌相似，因此检测时有误检和漏检现象。近年来，随着分离和鉴定技术的不断完善，对肺炎链球菌的检出率逐年提高，而肺炎链球菌青霉素耐药率也持续增高。因此，我们对2016年1月至2016年12月期间我院检出的158株肺炎链球菌的分布与耐药性进行分析，现报到如下：
1 资料和方法
1.1标本来源
2016年1月至2016年12月从我院门诊及住院患者的痰、鼻咽拭子等596份标本中检出肺炎链球菌158例。年龄在0-10岁儿童140例占88.6%，年龄大于60岁老年人14例占8.9%，其他4例占2.5%，以儿童和老年人居多。
1.2 培养基
哥伦比亚血琼脂（赛默飞世尔生物化学制品公司），肺炎链球菌药敏鉴定平板（湖南天地人），Optoehin药敏片（英国OXOID公司）。
2 分离培养与鉴定
2.1 分离培养
取脓性痰、鼻咽拭子、及其他部位化脓性分泌物接种于哥伦比亚血琼脂，于35℃、5.0%二氧化碳培养箱中培养18-24h，可形成细小、圆形、表面光滑、灰白色、半透明、直径约为0.5-1.5mm的菌落，在菌落周围有草绿色溶血环，培养48小时后出现“脐窝状”菌落。
2.2 鉴定 涂片镜检
挑取菌落周围有草绿色溶血环、细小、圆形、表面光滑、灰白色、扁平可疑菌落或中心塌陷边缘隆起，成脐窝状的可疑菌落，涂片革兰氏染色为革兰氏阳性球菌，成双排列，呈矛头状，钝端相对，尖端相背。生化反应：该菌可发酵葡萄糖（亦有少量不分解者），不液化明胶，不产生吲哚，在6.5％NaCI肉汤中不生长，可产生自溶酶。还可结合荚膜染色（疑似肺炎链球菌时，可将标本少许置于玻片上，加少量未稀释的肺炎链球菌抗血清混匀，再滴加少量美蓝混合，加盖玻片，以油镜检查。若荚膜显著肿大，菌体周围有一无色宽的环状带，菌体无变化，且染成蓝色，此即荚膜肿胀试验阳性）、触酶试验阴性，胆汁溶解阳性，几乎所有该菌对Optoehin敏感。
2.3 药物敏感试验
采用湖南天地人链球菌药敏试验板和纸片K-B法补充试验以WHO推荐（NCCLS）制定标准（2016年版）进行药敏敏感试验。质控菌株ATCC49619跟随整个过程。
3 结果
3.1 肺炎链球菌的来源分布
一年来从我院急性呼吸道感染患者、及其他部位感染性患者分泌物中检出肺炎链球菌158株，呼吸道132株（83.5％），其他部位感染26株（16.5％）；其中0～10岁儿童140例占88.6%，年龄大于60岁老年人14例占8.9%，其他4例占2.5%。儿童和老年人为重要易感人群，肺炎链球菌是引起儿童急性呼吸道感染性疾病的重要病原菌之一。
3.2 从全年的菌株检出情况来看，每年11月至次年2月的菌株数均高于每年3月-10月，季节变化趋势较明显，见图1。
肺炎链球菌对抗生素的敏感性，大致可以分为两大类：①敏感类，包括万古霉素，左氧氟沙星，利福平，氯霉素和青霉素；②耐药类，包括红霉素，克林霉素，素环素和复方新诺明。
4 讨论
本资料显示，不同季节肺炎链球菌的检出率也不相同，其中每年11月至次年2月的菌株数高于每年3月-10月，提示这段时间是肺炎链球菌的高发时节。因此，加强此时间段内儿童急性呼吸道感染菌的监测，及时发现和检测，加强抗菌药物的合理应用，预防社区获得性耐药菌的高发。
肺炎链球菌变化分布比较广泛，是引起儿童急性呼吸道感染的重要条件致病菌之一，也是获得性肺炎的重要病原菌。研究显示，临床分离菌株，青霉素仍然是大多数链球菌种引起感染的首选治疗药物；对四环素、红霉素、克林霉素、复方新诺明的耐药性较高，分别为77.2%、84.8%、86.7%、72.8%。由于肺炎链球菌有比较厚的荚膜，因此具有较强的耐药性，药敏结果显示，肺炎链球菌对多种抗菌药物的耐药率明显上升，特别是对青霉素G耐药类由报道的4.8％—9.7％上升到13.3％。有些菌株对青霉素的敏感性降低时，对红霉素、克林霉素的耐药性也相对较高。对四环素、红霉素、氯霉素、环丙沙星、利福平、头孢曲松和头孢吡肟等产生多重耐药［2］。肺炎链球菌的主要耐药机制是青霉素结合蛋白（PBP）发生改变，使青霉素G结合力下降［3］而产生耐药。肺炎链球菌的高耐株常对广谱头孢菌素、头孢吡肟、头孢曲松亦同时耐药，并且有逐年上升的趋势。肺炎链球菌对青霉素、其他β-内酰胺类抗生素的耐药率也开始增加［4］。因此应加强本地区肺炎链球菌分离鉴定以及耐药性的监测，指导临床合理应用抗菌药物，建立本地区肺炎链球的抗菌谱，为社区抗菌药物的应用提供可靠的参考依据。
参考文献
［1］姚成 . 肺炎链球菌耐药性，分子流行病学和耐药机制［D］；重庆医科大学；2002年
［2］李娜 . 重庆地区儿童侵袭性肺炎链球菌疾病临床特点、耐药性与与血清型分析［D］重庆医科大学；2009年
［3］叶应妩 . 主编，全国临床经验操作规程［M］第三版，南京，东南大学出版社，2006；770
［4］张涛 . 儿童肺炎流行特征、病原体诊断方法评价和肺炎链球菌多重PCR分型方法研究［D］；复旦大学，2012年
论文作者:范增成
论文发表刊物:《航空军医》2017年27期
论文发表时间:2018/2/2
标签：链球菌论文; 肺炎论文; 耐药性论文; 青霉素论文; 链球论文; 菌落论文; 菌株论文; 《航空军医》2017年27期论文;