广西来宾市武宣县人民医院 545900
摘要：目的 探讨引起患者ABO血型正反定型不符的原因及其处理方法，确保输血安全。方法 应用血型血清学检测方法对ABO血型正反定型不符的血标本进行正反定型、不规则抗体筛查、吸收放散试验、唾液血型物质测定等系列检测，分析引起血型正反定型不符的原因，为患者选择同型的血液进行输注。结果 在输血前的血型血清学检测中发现ABO血型正反定型不符的血标本236例，其中自身冷抗体82例，血浆蛋白异常60例，血型亚型47例，血型抗原或抗体减弱36例，因输血或妊娠发生同种抗体5例，人为操作因素6例。结论 ABO血型正反定型不符的原因大多数是由自身冷抗体，血浆蛋白异常，血型亚型，血型抗原抗体减弱等引起的。因此对ABO血型正反定型不符的血标本，应采用多种血型血清学检测方法进行互相验证，以保证血型鉴定无误，确保临床输血安全。
关键词：ABO血型；正反定型；血清学
1前言
ABO血型系统是人类最早认识也是输血中最为重要的血型系统，ABO血型根据红细胞表面是否具有A或B抗原，将人类血型分为A、B、AB及O型四种，此外还有少数的血型亚型，如A1、A2、A1B、A2B及B亚型等。ABO血型抗原不仅只存在于红细胞表面，而且还广泛存在于消化道，皮肤上皮细胞，呼吸道，泌尿系统以及人的体液中包括唾液、眼泪、尿液、消化液、胆汁、乳液、羊水、体腔液及卵巢肿液中[1]。ABO血型系统与人类输血时发生的溶血反应密切相关，具有重要的临床意义。正确鉴定红细胞血型是确保临床输血安全的首要条件，但在临床实际工作中，常出现ABO血型正反定型不符的现象。
2材料与方法
2.1材料
2.1.1 标本来源 2012年1月至2017年1月期间在我院住院及门诊的患者。进行血清学检测中，出现正反定型不符患者236例，男100例，女136例，年龄2d-85y。
2.1.2试剂仪器 单克隆抗体由长春博德生物技术有限责任公司提供；ABO标准红细胞、RhD及不规则抗体筛选红细胞I、Ⅱ、Ⅲ型均由上海血液生物医药有限公司提供，戴安娜血型卡及抗人球蛋白卡由Diagnostic Grifols，S．A生产。
2.2实验方法
ABO正反定型、冷凝集素试验、吸收放散试验参照《全国临床检验操作规程》[2]和《临床输血诊疗技术》[3]操作，卡式血型鉴定及抗人球蛋白试验按试剂使用说明操作。
3结果
通过对236例血液样本进行ABO正反定型、不规则抗体筛查、吸收放散试验、抗人球蛋白试验、唾液血型物质测定等试验发现造成ABO血型正反定型不一致的主要原因为自身冷抗体、血浆成分异常、血型亚型和抗原抗体减弱，其余原因为因输血或妊娠发生同种抗体、人为操作因素。见表1
表1 236例ABO正反定型不符原因分类
4 讨论
在鉴定ABO血型时，如果发现正反定型不符，首先要严格按照操作规程，重新抽取一份新鲜标本并使用质量合格试剂重做一次试验，在排除人为因素及技术问题[4]后，根据具体问题做分析。
4.1 自身冷抗体
本实验中由于自身冷抗体引起的正反定型不符标本有82例占34.7%，冷自身抗体是影响ABO血型定型正反不符最常见的原因。一般健康人血清中含有少量冷凝集素，且效价很低，一般在1∶16以下，在4℃下活性最强，28℃通常不凝聚，但在某些病理条件下，如支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、病毒性肺炎、再生障碍性贫血恶性变、自身免疫性溶血性贫血、红斑狼疮等患者血清中具有高效价的病理性自身冷抗体，作用温度可升高到36℃，通常造成ABO正反定型出现全凝集现象，无法鉴定血液样本的ABO血型。如出现这种现象，可将红细胞和血清分别在37℃预温，并在此条件下进行定型试验。对于自身红细胞已凝集的情况，可用37℃的0.9%氯化钠溶液反复洗涤后再进行红细胞定型试验。对于血清中存在的冷自身抗体可用自身红细胞反复吸收致红细胞不凝集，再进行ABO反定型试验。在冷自身抗体效价太高、血液样本已凝固的情况下，可用巯基乙醇处理红细胞再进行ABO正定型试验[5]。
4.2 血浆成分异常
本实验中血浆成分异常标本有60例占25.4%，某些肝脏病、多发性骨髓瘤等疾病的患者存在大量异常球蛋白，某些红细胞沉降率增快的疾病又可引起纤维蛋白增高，某些药物如右旋糖苷、聚维酮、羟乙基淀粉等主要为血浆扩溶剂[6]，以上因素均易使红细胞发生缗钱状凝集。处理办法是将红细胞洗涤后再做试验[7]。
4.3 血型亚型
本实验中血型亚型47例占19.9%，在健康的献血者和体检者中，亚型是造成ABO血型正反定型不符的主要原因。由于ABO亚型的红细胞抗原性减弱，抗A或抗B的试剂有时不能检测出其抗原性，造成定型困难。其鉴定的主要方法有：在红细胞正定型中加做抗A+B、抗A1、抗H，并观察红细胞与其凝集的强度；在反定型中加做A1C、A2 C；同时加做吸收放散试验，亚型细胞一般具有吸收能力弱而放散能力强或吸收能力强放散能力弱的特点；另外唾液血型物质的检测，也有助于ABO亚型的定型。
4.4 抗原抗体减弱
本实验中抗原抗体减弱36例占15.3%，正常A型人的红细胞上有A抗原，血清中有相应的抗B抗体；同理，B型人的红细胞上有A抗原，血清中有相应的抗B抗体。在某些疾病的影响下，血型抗原和抗体减少或缺失，给正确鉴定血型带来困难，抗体免疫缺陷病最常见的为原发性免疫缺陷病，如脾肿大，免疫球蛋白水平降低等[8]。血型抗原减弱最常见的是白血病，恶性肿瘤等[9]。在所有这些被误判的血型中，最常见的是A或B型极易被误判为O型。新生儿及老男人由于抗原抗体尚未完全产生，或抗原性减弱，亦会出现正反定性不一致的现象。
4.5 同种抗体
本实验中中同种抗体5例占2.1%，同种抗体在人群中检出率为0.3%～2.0%，一般通过妊娠、输血或人体计划免疫产生[10]，引起ABO血型正反定型不一致的同种抗体主要是有Rh、MN、P等血型系统的抗体，当反定型出现OC凝集而自身对照细胞阴性结果时，应考虑到同种抗体的可能性，应用筛选细胞和谱细胞加做抗体筛选及鉴定。
4.6 人为操作因素
本实验中人为因素6例占2.5%，气温低时受温度影响造成试验反应时间不足，反应不完全；气温高时受温度影响，标准血清试剂在室温放置时间过长造成标准血清效价降低。所以要改善室外血型初筛试验的条件，尽量保证试验所需的环境温度。试验有足够的反应时间，试验过程中红细胞抗原与标准血清的比例要适当，红细胞过浓或过淡均影响结果判读。使用合格的抗血清并注意抗血清是否能查出常见的亚型，随时检查血型试剂的有效期及效价。采用高效价试剂，在天气炎热季节，标准血清用后即放回冰箱冷藏保存，以免试剂效价降低。标准血清从冰箱取出后，应待其平衡至室温后再用，一般先加血清，然后再加红细胞悬液，以便核实是否漏加血清，用后应尽快放回冰箱保存。血清在空中暴露时间过长，发生浓缩，从而使红细胞聚集，造成假阳性结果，如果不等反应完成便判定反应结果，可使阳性结果误报成阴性结果，造成假阴性。
除以上因素外，标准血清效价太低、亲和力不强，红细胞悬液过浓、过淡，抗原抗体比例不合适均可以出现弱凝聚或不凝集的现象而导致血型判断错误。
因此ABO血型鉴定正反定型不符是由自身冷抗体、血浆蛋白异常、血型亚型、抗原或抗体减弱、同种抗体及人为操作等因素造成的。所以，ABO 血型鉴定极其重要，检验人员必须严格按照检验操作规程进行操作，必须坚持做正反定型，观察结果要仔细，报告结果要慎重。熟练掌握各种试验技术，认真对待每一份待检标本，最终必须达到正反定型结果一致，才可发送血型鉴定结果。一旦出现正反定型结果不一致时，必须查明引起ABO 血型正反定型不一致的原因，结合临床及进一步的血清学试验得出的结果综合判断，绝不可仅凭正向或反向单一结果而主观臆断。要仔细核对患者标本，及时更新输血专业知识，准确鉴定ABO血型，有效地保障临床输血安全，减少医疗纠纷。
参考文献
[1]高峰主编.临床输血与检验.第2版.北京：人民卫生出版社，2003.67.
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜．全国临床检验操作规程[M]．第3版．南京：东南大学出版社。2006：246-256．
[3]夏琳．临床输血诊疗技术[M]．北京：人民卫生出版社，2008：62-84．
[4]王金敏，刘世荣，乔家骏，等主编.中国输血技术操作规程.第1版.天津：天津科学技术出版社，1998.61-62.
[5]毛伟，王芳，程磊，等.ABO血型正反定型不一致原因分析.重庆医学，2007，36：2148-2149.
[6]周湘静，陈碧乐，谢作听，等.37例血浆因素引起正反定型不符原因分析.重庆医学，2006，35：452-454.
[7]全国卫生专业技术资格考试专家委员会。临床医学检验技术，人民卫生出版社，2008：46-52
论文作者:陈泽安
论文发表刊物:《健康世界》2019年2期
论文发表时间:2019/4/24
标签：血型论文; 抗体论文; 正反论文; 红细胞论文; 血清论文; 抗原论文; 血浆论文; 《健康世界》2019年2期论文;