吴江群, 聂兴举, 秦泽莲[1]2011年在《氧化苦参碱对病理性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡的影响》文中研究表明目的观察氧化苦参碱(oxymatrine,OM)对人病理性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡、细胞周期及细胞外信号调节激酶1(ERK1)的影响,并且与瘢痕治疗常规药物氢化可的松(hydrocortisone,HC)的作用进行比较。方法原代的瘢痕疙瘩、增生性瘢痕和正常皮肤的成纤维细胞(KFb、HFb、NFb)采用组织块培养法培养,将氧化苦参碱(2×10-6mol/L)、氢化可的松(5.5×10-9mol/L)分别作用于KFb、HFb、NFb,用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法(MTT)检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期、ERK1的变化。结果 OM能明显抑制KFb、HFb和NFb的增殖活性(抑制率分别为12%,14%,10%),促进KFb的凋亡(增加72%)。HC明显抑制KFb、HFb、NFb的增殖(抑制率分别为21%,21%,15%),并促进其凋亡(分别增加184%、121%和148%)。上述改变均有统计学意义。OM、HC对叁种细胞的细胞周期及ERK1表达无显着作用。结论类似氢化可的松,氧化苦参碱通过抑制瘢痕疙瘩、增生性瘢痕、正常皮肤成纤维细胞的增殖和促进瘢痕疙瘩成纤维细胞的凋亡作用而可能应用于瘢痕疙瘩和增生性瘢痕的治疗。
汤苏阳[2]2001年在《苦参碱对病理性瘢痕作用的研究》文中研究表明病理性瘢痕（Pathologic scar）是创伤愈合的异常结局，给人类创伤后的功能恢复和重建带来很大的障碍，同时也使人体的外观遭到了破坏。长期以来，病理性瘢痕的预防和治疗一直是困绕国内外创伤外科和整形外科的难题之一。虽然病理性瘢痕的治疗方法很多，但由于其局限性和副作用等限制了诸多方法的使用。 苦参类生物碱是以苦参碱（matrine，Mat）为代表的、结构相似的一类生物碱，近年来，国内外在研究、使用苦参类生物碱的过程中发现其多方面的药理活性和临床功能，也是我科多年来使用的瘢痕软化膏的主要成分，其临床效果明显，可使瘢痕缩小且软化，但机理不明。为阐明Mat对病理性瘢痕的作用机制，同时为临床应用Mat治疗病理性瘢痕提供理论和实践依据，首先，我们通过体外实验，首次证明了Mat对人病理性瘢痕成纤维细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，并使其细胞周期发生改变。将不同浓度梯度的Mat作用于体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞，利用酶联免疫检测仪检测MTT试验的吸光值（A~0），利用流式细胞仪测定细胞周期和DNA相对含量，利用荧光素标记的annexin V和PI双染检测细胞早期凋亡率的变化，利用免疫组织化学的方法检测增殖细胞核抗原PCNA的表达，利用透射电镜对比观察用药前后细胞超微结构的变化。实验结果表明：Mat在0.10-100.00mg/ml范围内对病理性瘢痕成纤维细胞呈时间剂量依赖性增殖抑制作用，5mg/ml Mat作用病理性瘢痕成纤维细胞12，24，48，72h后G_0-G_1期细胞数量明显升高，S期细胞数量减少，G_2-M期细胞数量减少，DNA相对含量无明显变化，出现G_0-G_1期阻滞，并出现特殊的凋亡峰；荧光素标记双染检测出经Mat作用的病理性瘢痕成纤维细胞的早期凋亡细胞率明显增加，对照组与Mat用药组的凋亡率分别为1.6％和40.7％；PCNA在Mat作用后表达明显减弱，并在细胞超微结构出现内粗面内质网减少，核糖体部分脱粒、解聚，溶酶体增多，核染色质浓缩集聚至 第四军医大学硕士学位论文 核膜周边等凋亡早期改变。 其次，动物体内实验研究再次发现并证实了Mat对增生性欢痕的抑制 增殖促进凋亡的作用。实验以新西兰白兔的兔耳腹侧面增生性疲痕为研究 模型，采用对比研究的方法，以一定时间间隔和剂量在增生性疯痕块上注 射 Mat，观察大体结构和光镜下 Mat治疗作用的影响。Mat治疗组兔耳腹 侧面增生性疲痕较对照区明显缩小，克血症状改善，颜色变淡；其中在对 照组和 Mat治疗组中增生指数 m分别为 3．2 5和 2．15，成纤维细胞密度 NA分q为4 517．5个／mm‘和3551．2个／mm‘，胶原纤维面密度AA分别 为 39．89％和 28．75％，A吵OR卜己数分别 1．07和 2．31；Mat治疗组增殖细 胞核抗原 PCNA的表达明显减弱，凋亡相关蛋白突变型 P53 H BCI－2表达 下调，Bax表达明显上调，Ba－c／BclZ的比例提高。体内研究表明苦参碱抑 制成纤维细胞的增生活性，促进痰痕成纤维细胞进入凋亡过程，对兔耳腹 侧面增生性痰痕有明显的治疗作用，验证了体外实验的结果。 综上所述，本研究为苦参碱临床治疗增生性舷痕提供了理论和实践 依据，表明苦参碱很可能是极具前途的治疗病理性疵痕的中药。
参考文献：
[1]. 氧化苦参碱对病理性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡的影响[J]. 吴江群, 聂兴举, 秦泽莲. 中国微创外科杂志. 2011
[2]. 苦参碱对病理性瘢痕作用的研究[D]. 汤苏阳. 第四军医大学. 2001