（山东省聊城市公安局 山东 聊城 252000）
【摘要】目的：探讨法医物证DNA自动化检验技术体系的运用研究。方法：选取2014年1月至2016年5月本实验室日常积累的各类案件中的生物检材500份，分别采用工作站-Chelex法和手工-Chelex法对500份生物检材进行DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳检测其STR分型，并进行比较测验，对比两种方法的检测成功率以及检测时间。结果：工作站-Chelex法检测生物检材相较于手工-Chelex法，成功率无明显差异（P>0.05），检测时间明显缩短，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：将DNA自动化检验技术体系运用到法医物证检测中，可获得满意的STR分型结果，显著缩短工作时间，提高检案的工作效率和鉴定质量，值得广泛应用与推广。
【关键词】 法医物证；DNA自动化检验技术体系；运用研究
【中图分类号】R44 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）34-0360-02
为探讨法医物证DNA自动化检验技术体系的运用，本文选取2014年1月至2016年5月本实验室日常积累的各类案件中的生物检材500份，分别采用工作站-Chelex法和手工-Chelex法对500份生物检材进行DNA提取、PCR扩增、毛细管电泳检测其STR分型，并进行比较测验。具体报告如下。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2014年1月至2016年5月本实验室日常积累的各类案件中的生物检材500份，所有生物检材由局内档案科提供，生物检材涉及血迹样本188例、毛发63例、组织样本69例、软骨34例、烟蒂92例、精斑54例。
1.2 检测方法
DNA提取：参考标准Chelex法提取DNA的操作流程，在Freedom EVO 100-4工作站上装载相关模块“DNA-Chelex”自动提取程序，分别采用工作站-Chelex法和手工-Chelex法对500份生物检材进行DNA提取。
PCR扩增：参考标准PCR操作流程，在Freedom EVO 75-2型工作站上配置“PCR-Chelex”自动上样程序，进行PCR反应体系的构建，采用AB-9700型PCR仪进行PCR扩增。
毛细管电泳检测：参考标准STR检测的操作流程，在Freedom EVO 75-2型工作站上配置“STR-Chelex”自动上样程序，进行PCR扩增产物DNA变性及STR检测体系的构建，采用AB-3130型基因分析仪电泳检测样品的STR分型。
1.3 评价标准
1.3.1检测成功率 将工作站-Chelex法和手工-Chelex法的检测结果与原有档案记录结果进行比对，对比工作站-Chelex法和手工-Chelex法的检测成功率，对数据结果进行统计并评估。
1.3.2检测时间 分别对样品数为48和96时的检材进行同板STR检测，比较工作站-Chelex法和手工-Chelex法的检测时间，对数据结果进行统计并评估。
1.4 统计方法
应用SPSS 18.0 进行统计学分析，计数资料用“%”表示，计量资料用“x-±s”表示，计数资料进行χ2检验，计量资料进行t检验，P＜0.05表示有显著性差异。
2.结果
2.1 检测成功率
对比工作站-Chelex法和手工-Chelex法的检测成功率，具体结果见表1。
由表1可知，工作站-Chelex法与手工-Chelex法相比，工作站-Chelex法的检测成功率为91.2%，手工-Chelex法的检测成功率为89.8%，两种方法在检测成功率上无显著性差异（P＞0.05）。
2.2 检测时间
工作站-Chelex法与手工-Chelex法相比，当样本数量为48时，工作站-Chelex法的检测时间为（3.6±0.3）h，手工-Chelex法的检测时间为（5.2±0.2）h；当样本数量为96时，工作站-Chelex法的检测时间为（4.0±0.2）h，手工-Chelex法的检测时间为（9.1±0.1）h。两种方法在检测时间上，工作站-Chelex法的检测时间比手工-Chelex法明显缩短，对比结果具有显著性差异（P＜0.05）。
3.讨论
经实验测定，工作站-Chelex法与手工-Chelex法相比，工作站-Chelex法的检测成功率为91.2%，手工-Chelex法的检测成功率为89.8%。且当样本数量为48时，工作站-Chelex法的检测时间为（3.6±0.3）h，手工-Chelex法的检测时间为（5.2±0.2）h；当样本数量为96时，工作站-Chelex法的检测时间为（4.0±0.2）h，手工-Chelex法的检测时间为（9.1±0.1）h。研究发现工作站-Chelex法检测生物检材相较于手工-Chelex法，成功率无明显差异（P＞0.05），检测时间明显缩短，差异有统计学意义（P＜0.05）。
目前，自动化工作站对日常检案中涉及的各类生物检材（包括血迹、组织、脱落细胞、精斑、口腔拭子等各类生物检材），其DNA提取的包容性已被广泛认同，亦有多个报道认为自动化工作站能获得更高的检验成功率，但其仍需进一步研究验证。但可以肯定的是，将DNA自动化检验技术体系运用到法医物证检测中，可获得满意的STR分型结果，显著缩短工作时间，提高检案的工作效率和鉴定质量，值得广泛应用与推广。
【参考文献】
[1]陈雨，臧悦含.接触DNA常规提取纯化方法的比较探讨[J].生物技术世界，2016，05:154.
[2]刘冰泉，巴华杰，朱爱华，马骏.自动化工作站与Chelex-100法对血样本检验效果比较[J].中国法医学杂志，2015，01:56-58.
论文作者:孙璐
论文发表刊物:《医药前沿》2016年12月第34期
论文发表时间:2016/12/8
标签：工作站论文; 手工论文; 成功率论文; 时间为论文; 生物论文; 法医论文; 物证论文; 《医药前沿》2016年12月第34期论文;