（江西珍视明药业有限公司 江西 抚州 344000）
【摘要】 目的：建立了复方尿维氨滴眼液中维生素E的含量测定方法。方法：采用HPLC法，选用Diamonsil C18色谱柱，以甲醇为流动相，流速为1.0ml/min，检测波长为280nm。柱温为40℃，进样量为20μl。结果：维生素E浓度在62.7～155.6μg/ml范围内呈现良好的线性关系（r=0.9995，n=5），平均回收率为99.5%(RSD为0.42%);3批复方尿维氨滴眼液中维生素E的含量分别为94.3%、96.7%和99.4%。结论：本方法操作简便，专属性好，准确度高，适用于该制剂中维生素E的含量测定。
【关键词】 HPLC法；维生素E；含量测定
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）18-0370-02
复方尿维氨滴眼液为我公司产品，其规格为10ml：硫酸软骨素10mg、尿囊素20mg、维生素B6 1mg、维生素E 1mg、牛磺酸20mg，用于治疗慢性结膜炎、角膜损伤、结膜充血、预防眼病（游泳后、尘埃吹进或汗水流入眼睛），紫外线或受其它光线影响之眼炎，眼睑炎；缓解因配戴隐形眼镜引起的不适，眼睛疲劳，眼痒、眼朦胧等症状。
维生素E（生育酚）为苯骈二氢吡喃衍生物，属于脂溶性维生素，对热稳定而对氧敏感，是本品的主要成份之一。其药理作用机制主要包括抗氧化，并可使末梢血管扩张，改善局部血液循环和改善免疫功能等作用，适应于容易受到光线、活性氧等多种因素引起的眼组织损伤。我公司建立了简便、快速、准确的HPLC法，用于控制本品主药维生素E的含量[1]。
1.仪器与试药
仪器：Waters e2695高效液相色谱仪。
试药：维生素E对照品（中国食品药品检定研究院，批号为135051-201401）；
甲醇为色谱纯（德国merck）；复方尿维氨滴眼液（江西珍视明药业有限公司，批号为160701，160702，160703）。
2.方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18柱（250mm×4.6mm,5μm）；甲醇为流动相；检测波长为280nm；柱温：40℃；流速为1.0ml/min。与相邻色谱峰间的分离度应符合规定；重复进样5次，其峰面积的相对标准偏差应小于0.8％。
2.2 溶液的制备
对照品溶液：精密称取维生素E对照品25mg，置于50ml烧杯中，再加入吐温约250mg，用玻棒充分搅拌至均匀，再加水约30ml，充分搅拌至溶解后转移至250ml量瓶中，用水多次洗涤烧杯，合并洗液并转移至上述量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。
供试品溶液：取本品溶液作为供试品溶液。
阴性溶液：按复方尿维氨滴眼液处方工艺配制不含维生素E原料的溶液。
2.3 测定波长的选择
取上述对照品溶液适量，照紫外-可见分光光度法在200-400nm波长范围内进行扫描。结果，在280nm左右波长处有最大吸收，并参考相关资料选择280nm波长作为此次维生素E含量测定研究波长。
2.4 专属性研究
精密量取对照品溶液、阴性溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表1和附图1～2。
2.5 线性试验
精密称取维生素E对照品适量，分别配制成不同浓度的试液，按含量测定方法时进行试验。以样品浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标进行线性回归，得回归方程：y=4*106x-12743，r=0.9995,线性范围为0.062688～0.1556mg/ml。
2.6 精密度试验
取维生素E对照品适量，按含量测定方法进行试验，同时测6次，记录峰面积，结果峰面积RSD为0.3%，表明该法精密度好。
2.7 重复性试验
取样品（批号：160701）照含量测定方法进行重复测定5次，结果测得维生素E含量为94.3%，RSD为0.14%，表明该法重复性好。
2.8 待测样品溶液的稳定性试验
因待测样品为滴眼液原液，通过对其长期留样稳定性考察，结果表明维生素E在24个月有效期内都较稳定，因此省略了该项研究。
2.9 回收率测定
精密称取维生素E对照品约20mg、25mg、30mg，分别置于50ml烧杯中，再加入吐温80约250mg，用玻棒充分搅拌至均匀，再加维生素E阴性溶液约30ml，充分搅拌至溶解后转移至250ml量瓶中，用维生素E阴性溶液多次洗涤烧杯，合并洗液并转移至上述量瓶中，加维生素E阴性溶液稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。照含量测定方法进行试验，回收率结果见表2。
3.讨论
维生素E为微黄色至黄色或黄绿色澄清的黏稠液体，在水中不溶，因此，在配制维生素E对照品时需先用适量增溶剂吐温80助溶，复方尿维氨滴眼液处方中同样用到了增溶剂吐温80，均通过试验摸索到合适的吐温80用量，以使维生素E完全溶解。
因复方尿维氨滴眼液中维生素E浓度为0.01%，较低，进行含量测定时峰面积较小，误差较大；为减小检测误差，更准确地测定其含量，规定其峰面积的相对标准偏差应小于0.8％。
复方尿维氨滴眼液质量标准YBH04392008规定本品含维生素E应为标示量的90.0%～110.0%，上述3批样品中维生素E的含量均符合规定。因本品维生素E处方量低（1000ml含0.1g），且不溶于水，配制过程中的误差易导致批与批之间的含量有差异。为了更好地控制成品中维生素E含量，我们将维生素E的含量测定作为中间产品控制指标之一。
【参考文献】
[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].2015年版四部通则0512.北京:中国医药出版社.
论文作者:胡勇勇,黄志元（通讯作者）,朱样根
论文发表刊物:《医药前沿》2018年6月第18期
论文发表时间:2018/7/9
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