（1.长沙医学院2014级本科临床医学3班 湖南 长沙 410219）
（通讯作者：长沙医学院基础医学院应用生物教研室 湖南 长沙 410219）
基金项目：2015年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目，湘教通〔2015〕269号-541
摘 要 目的 了解小鼠长期服用不同剂量的伊曲康唑对其体重、肝脏和血清主要生化指标的具体影响，为伊曲康唑指导性用药和用药剂量的研究提供理论依据。 方法 对同窝别的60只小鼠使用匹配的方法均分为空白、低剂量、中剂量和高剂量四组，四周喂食后了解小鼠肝脏和血清中ALT、AST的含量变化。 结果 中剂量（X2=8.36，P=0.01）和高剂量组（X2=10.23，P=0.00）伊曲康唑喂食的实验组实验前后血清生化指标变化明显。结论 中高剂量伊曲康唑的长期食入将对血液生化指标、肝脏产生不利影响。
关键词 长期服入；不同剂量；伊曲康唑；肝脏影响
Long-term effects of different doses of itraconazole in mice liver
WENG De-ping，ZHANG Yu-qian，QIN Jing-feng，et al.(Changsha Medical University, Changsha 410219, Hunan，China)
Abstract： Objective Understand the long-term use of mice with different doses of itraconazole specific impact of body weight, liver and serum biochemical parameters to it. Methods On the other 60 mice littermates using the matching methods are divided into three groups, low-dose, medium-dose and high dose four groups after four weeks fed understand content in liver and serum ALT, AST's. Results Dose and high-dose groups before and after the itraconazole group feeding experiment experimental serum biochemical parameters changed significantly. Conclusions High-dose itraconazole will have long-term ingestion of blood biochemical parameters, liver adverse effects.
Key words： Liver influence; itraconazole; long Ingestion; different doses
自第一个抗真菌药物——灰黄霉素于1937年问世以来，人类与真菌的斗争已持续70多年。近年来随着广谱抗菌药、免疫抑制剂、器官移植、血液透析和放化疗等的普遍使用，真菌感染的发病率逐年上升[1]，已成为严重影响人们身体健康的公众问题。伊曲康唑（ltraconazole,ITZ，斯皮仁诺）是一种三唑类抗真菌药，对念珠菌及酵母菌、霉菌、皮肤癣菌和其他致病真菌具有广谱抗真菌活性[2]，是目前临床应用最为广泛的三唑类广谱抗真菌药，但国内外医疗期刊关于伊曲康唑的不良反应常有病例报道，少数患者在应用过程中出现了肝功能异常现象[1]。本研究旨在通过建立不同剂量药物食入小鼠模型，分析不同剂量伊曲康唑食入对肝脏组织和血清中丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase，ALT）、天冬氨酸转氨酶（Aspartate Transaminase，AST）含量的测定，拟探究该药物对小鼠肝功能的具体影响，为进一步进行临床用药的研究提供线索。
1 材料与方法
1.1 实验对象：为60只健康的昆明小白鼠，4-5周龄，雌雄各半，体质量25g-30g之间。购置后饲养5天。
1.2 仪器与试剂
（1）实验动物：昆明小白鼠，SPF级，体重25g-30g，雄性31只，雌性29只，由长沙市天勤
生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(湘)2014-0011。
（2）实验仪器：TGL-16GB高速台式离心机（上海安亭科学仪器），722型可见分光光度计（上海菁华仪器），灌胃针（北京冀诺泰科技发展有限公司）。
（3）实验试药：斯皮仁诺 伊曲康唑口服液（先声再康江苏药业有限公司，编号H20130425），丙氨酸氨基转移酶测试盒,天门冬氨酸氨基转移酶测试盒,谷胱甘肽过氧化物酶测定试剂盒,甘油三酯测试盒（南京建成生物工程研究所）。
1.3 处理方法
（1）对入选的60只小白鼠进行性别鉴别、称重，并进行匹配分组；按照窝别和体重进行适量匹配，随机分为五个组，每组12只，分别为：正常组、低剂量组13mg/(kg·d）、中等剂量组26mg/(kg·d）、高剂量组39mg/(kg·d）、超高剂量组52mg/(kg·d）。
（2）低、中、高、超高剂量组小鼠分别给予13mg/kg、26mg/kg、39mg/kg、52mg/kg伊曲康唑灌胃，空白对照组给予等同剂量生理盐水灌胃，灌胃时间为饲喂之前0.5-1小时，频率为每天1次，剂量以其体重为标准，每克体重配置0.1克药物。
（3）连续灌胃4周，期间密切观察小鼠体重和健康状况。
（4）每次抽血化验前，小鼠禁食12小时后抽血，同时，解剖小鼠取肝脏组织，离心后测定血清和组织中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的含量。
1.4 观察指标：包括小鼠的（进食、大小便、体质量变化、活动情况等）、前测和后测各实验室指标（ALT和AST）。
1.5 统计学分析：使用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料使用（均值±标准差）形式进行统计描述，配对资料的比较使用配对t检验的方法，检验水准α取0.05，双侧概率。
2 结果
2.1 不同组别小鼠实验前后体重的变化
空白组小鼠体重增加正常，活动正常，毛发光亮，实验前测体重（29.07±3.21）克，一个月后的实验后测（36.03±4.21）克，前后体重差异显著（t=18.69，P=0.00）。其余剂量组别的小鼠体重实验前后差异不显著（P>0.05）。观察期间小鼠全部存活。
2.2 实验前后不同组别小鼠肝脏中两项生化指标含量的比较
实验前后中剂量组中ALT（t=4.15，P= 0.04）和AST（t=17.07，P= 0.00）、高剂量组ALT（t=26.20，P= 0.00）和AST（t=30.74，P= 0.00）、超高剂量组中ALT（t=13.07，P=0.00）和AST（t=34.22，P=0.00）实验前后变化明显（P<0.05）。见表2。
2.3 实验前后不同组别小鼠血清中两项生化指标含量的比较
低剂量组中ALT（t=13.99，P= 0.00）和AST（t=38.19，P= 0.00）、中剂量组中ALT（t=24.00，P= 0.00）和AST（t=12.89，P=0.00）、高剂量组中ALT（t=11.31，P=0.00）、超高剂量组中ALT（t=71.34，P=0.00）和AST（t=15.34，P=0.00）实验前后变化明显（P<0.05）。见表3。
3 讨论
近年来，由于抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的应用，器官移植、介入性治疗技术的发展，艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等引起机体免疫功能低下等原因，导致真菌病的发病率呈明显上升趋势[1]。肝移植术后真菌感染是移植术后患者死亡的主要原因之一，国内外报道肝移植术后真菌感染的发生率高达15%-42%，病死率达40%～80%，高于急性排异反应、肾功能衰竭和病毒感染 [3]。肝脏是人体的主要代谢器官，是药物和外来物质的代谢处置中心，药物在肝脏进行代谢转化过程中有可能损害肝脏的机能，甚至造成药源性疾病，肝细胞损害是直接由于细胞内功能或膜完整性的破坏，或间接地由免疫中介的膜损伤所致[4-8]。
伊曲康唑可致患者出现乏力、右上腹疼痛、黄疸、胆汁淤积和发热等症状，实验室检查发现转氨酶和胆红素均升高[9,10]；伊曲康唑的肝毒性可发生于用药后5天至数月后。应用抗真菌药患者的基础病种类较多，长期用药者需定期监测肝功能，年长、营养不良、酗酒者尤其需要注意[11]。肝功能异常者应慎用抗真菌药。抗真菌药的肝毒性轻者可致可逆性肝功能异常，重者可发生致命性肝衰竭。一旦出现肝损伤，应立即停药并给予细胞色素C、辅酶A等对症支持治疗，必要时加用保肝药物，有可能减轻抗真菌药肝毒性的程度。
本研究显示，中高剂量伊曲康唑喂食的实验组实验前后血清生化指标变化明显，故中高剂量的伊曲康唑长期食入将对肝脏产生不利影响，但实验的指标限定于血清的生化指标，具体影响值得进一步深入研究。
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论文作者:傅之1 詹舒仪2 阿卜力克木·艾散3 贺气志通讯作者
论文发表刊物:《中国结合医学》2019年第01期
论文发表时间:2019/4/8
标签：剂量论文; 小鼠论文; 肝脏论文; 血清论文; 体重论文; 指标论文; 药物论文; 《中国结合医学》2019年第01期论文;