刘慧芳
（内蒙古医科大学附属医院 内蒙古呼和浩特 010050）
【摘要】目的：观察舒芬太尼对大鼠肠缺血／再灌注肺损伤炎症因子的影响，探讨其对肠缺血再灌注肺损伤的保护作用。方法：（1）实验分组及动物模型制备 雄性清洁级wistar大鼠32只，月龄3～3.5月，体质量250～300g。随机分为4组，每组8只：假手术组（S组），缺血再灌注组（I/R）,舒芬太尼组(M组)，纳洛酮组（N组）。S组：暴露肠系膜上动脉(SMA),观察3小时；I/R组：暴露SMA，动脉夹夹闭1小时，再灌注2小时；M组：缺血前15分钟颈静脉输注舒芬太尼0.3μg/㎏,其他同I/R组；N组：输注舒芬太尼前10分钟给予纳洛酮3㎎∕㎏，其他同M组。（2）检测指标及检测方法：酶联免疫法测定大鼠血浆中TNF-α的含量.结果：酶联免疫法测定大鼠血浆中TNF-α的含量：与I/R 组比较，M组血浆中TNF-α的含量明显减低（P<0.05）。结论：舒芬太尼预处理对大鼠肠缺血再灌注导致的肺损伤有明显的保护作用，其作用机制可能与阿片受体参与介导，减少血浆TNF-α激活有关。
【关键词】舒芬太尼；肠缺血再灌注肺损伤；TNF-α
【中图分类号】R453 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2015）10-0230-02
肠缺血再灌注损伤(intestine ischemia reperfusion injury，IIR)是外科手术中常见的并发症，在创伤、休克、严重感染等疾病的病理演变过程中起重要作用[1]。肠道是IIR致其他重要脏器损伤的始发因素[2]。呼吸衰竭是IIR的常见并发症和重要死亡原因[3]。缺血预处理（ischemia preconduction，IPC）通过内源性保护机制对组织器官的保护作用已得到肯定[7]，应用药物模拟IPC的保护作用是减轻IR的最理想方法。近年来在器官水平研究发现舒芬太尼预处理对动物心脏、脑、肝的保护作用较多[4-6]，本研究利用大鼠肠缺血再灌注肺损伤模型，观察舒芬太尼的保护作用，并探讨起作用机制。
1.材料与方法
雄性清洁级Wistar大鼠32只，月龄3～4月，体质量280～330g（内蒙古大学大学实验动物中心提供）。随机分为4组，每组8只：假手术组（S组），缺血∕再灌注组（I/R组），舒芬太尼组(M组)，纳洛酮组（N组）。S组：暴露并分离肠系膜上动脉（SMA），观察3小时；I/R组，暴露并分离SMA，动脉夹夹闭肠系膜上动脉1小时，开放动脉夹再灌注2小时。M组：缺血前15分钟颈静脉给予舒芬太尼0.3μg/kg，余同I/R组;N组：注射舒芬太尼前10分钟颈静脉给予纳酮3mg/ml，余同M组。
2.动物模型制备
参考文献[7]制备动物模型，术前禁食8小时，自由饮水，步骤如下：
（1）腹腔注射10％水合氯醛0.3g/kg麻醉称重后，将大鼠固定在实验台上，消毒颈部及腹部皮肤，沿颈部正中线切口，钝性分离颈前肌肉，暴露气管，切开并插管，保留自主呼吸，吸氧。
（2）暴露右颈静脉，静脉穿刺，接微量泵，以1ml/kg·h的速度泵入0.9%生理盐水，维持血流动力学的稳定。
（3）腹正中切口入腹腔，游离肠系膜上动脉，血压平稳10分钟后用无创动脉夹夹闭，缝合切口。60分钟后经原切口入腹腔，去除动脉夹，恢复小肠供血120分钟即为小肠I/R模型。S组：暴露并分离肠系膜上动脉（SMA），观察3小时；I/R组，暴露并分离SMA，动脉夹夹闭肠系膜上动脉1小时，开放动脉夹再灌注2小时。M组：缺血前15分钟颈静脉给予舒芬太尼0.1μg/ml，余同I/R组；N组：注射舒芬太尼前10分钟颈静脉给予纳洛酮3mg/ml，余同M组。
（4）再灌注2小时后开胸，心脏抽血，处死大鼠。
3．标本采集
再灌注2小时后，颈静脉抽血4℃，10000r/min离心，5min取上清液于EP管-20℃保存，采用双夹心ELISA法，按照试剂盒说明测定血浆中TNF-α含量。
4.数据处理及统计学分析
采用SPSS16.0统计软件，计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，组间比较采用单因素方差分析，P<0.05为差异有统计学意义。
5.结果
5.1 各组动物的体重、月龄差异均无统计学意义（P>0.05）
5.2 酶联免疫法测定血浆中TNF-α含量
与S组比较，其余各组TNF-α的含量明显增高（P<0.05）；与I/R 组比较，M组血浆中TNF-α的含量明显减低（P<0.05），N组血浆中TNF-α的含量虽有降低，但与I/R 组之间无统计学意义（见表）。
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表 血浆中TNF-α 含量 (n=8，x-±s)
组别血浆中TNF-α 含量(ng/l)
S 22.61±6.51#
I/R 123.23±10.42*
M 90.56±11.03*#
N 113.96±12.06*
注：与S组比较，*P<0.05，与I/R组比较，#P<0.05
6.讨论
肠缺血再灌注( intestinal ischemia - reperfusion，IIR) 损伤是外科手术中常见的情况，普遍存在于各种危重病患者救治过程中。肠缺血再灌注可致肠粘膜屏障受损，肠道内的细菌毒素进入体循环;且激活炎症介质、细胞因子、中性粒细胞等，导致全身炎症反应，严重时可发生多系统器官功能不全综合征(multiple organ dysfunction syndrom，MODS)。研究证实，肠道是MODS的“动力部位”。其对全身状况的损害作用已远远超过肠道局部的损伤和破坏[8]。
缺血预处理（ischemia preconduction，IPC）通过内源性保护机制对组织器官的保护作用已得到肯定[9]，本文采用舒芬太尼作为缺血预处理的药物，观察对大鼠肠缺血再灌注肺损伤的保护作用，并从TNF-α炎症介质方面探讨了舒芬太尼对IIR肺损伤保护的可能作用机制。
TNF-α是具有广泛生物学功能的多效细胞因子，亦是早期的炎症介质之一，适量释放可提高白细胞对机体的清除能力，促进组织修复，过量释放对机体产生强烈损害[10]，全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrom，SIRS)就是免疫机制过度激活而导致自身破坏的结果。在己发现的多种炎症因子中，TNF-a被认为是诱导SIRS，脓毒症和MODS发生的中心介质和早期介质，由其介导的过度炎症反应在MODS发生发展中起关键作用。目前认为，IIR时，肠粘膜屏障受损，进入肺内的LPS和早期的致炎细胞因子TNF-α等激活肺巨噬细胞或肺组织中的NF-κB，使肺内细胞因子、黏附分子等释放增高， 中性粒细胞浸润而致肺损伤。本研究测定血浆中TNF-α的含量，结果表明除假手术组外所有干预组TNF-α的含量在再灌注2小时后显著升高，与I/R组相比，M组TNF-α的含量明显降低，提示舒芬太尼可能抑制了TNF-α的活性。而N组与M组之间的差异表明舒芬太尼抑制TNF-α活性的这种作用可被纳洛酮所阻断。
目前舒芬太尼在缺血预处理方面的作用，在心、脑、肝保护中研究较多，多数研究者认为，舒芬太尼缺血预处理的保护机理与局部阿片受体密不可分。而阿片受体在体内广泛分布，本研究采用纳洛酮作为拮抗，纳洛酮组对IIR肺损伤的作用较舒芬太尼组明显增加，说明舒芬太尼对IIR肺损伤的保护效应与肺部阿片受体有关。
综上，舒芬太尼对肠缺血再灌注肺损伤有保护作用，其机理可能是通过激动阿片受体，减少炎症介质TNF-α的激活，从而抑制NF-κB的表达，以达到对肺的保护作用。
【参考文献】
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论文作者:刘慧芳
论文发表刊物:《心理医生》2015年10期供稿
论文发表时间:2016/4/28
标签：损伤论文; 作用论文; 血浆论文; 动脉论文; 含量论文; 大鼠论文; 肠系膜论文; 《心理医生》2015年10期供稿论文;