1.中国医科大学附属第一医院神经内科 辽宁沈阳 110001；2辽宁电力中心医院 辽宁沈阳 110015
摘要：目的：研究PON1 Q192R基因多态性与急性脑梗死（ACI）患者氯吡格雷抵抗之间的相关性以及其对ACI患者临床结局的影响。方法：选择我院神经内科2016年8月至2018年1月住院的ACI患者，给予其服用氯吡格雷75毫克/日，根据其治疗前以及治疗第7天检测的二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率，≥70%为CR组，<70%非CR（NCR）组；收集患者的全血提取DNA，并测定其PON1Q192R的基因型，分析PON1Q192R 基因多态性和ACI患者氯吡格雷抵抗的相关性。结果：PON1 Q192R基因位点有三种基因型：AA，GA和GG，其分布频率在CR组和NCR组分别为66.7%，20.8%，12.5%和23.4%，46.7%，29.9%。三种基因型在两组间的分布差异有统计学意义（p<0.05）；A等位基因和G等位基因在CR组和NCR组间的分布频率分别为77.08%，22.92%和46.72%，53.28%；A等位基因和G等位基因在两组间的分布差异也有统计学意义（P<0.05）。对患者6个月后随访，CR组中有19例脑卒中复发，发生率为79.17%，NCR组有15例脑卒中复发，发生率为14.02%；基因型AA、GA、GG复发例数为13例，15例，6例，复发率分别为48.14%，22.39%，16.22%。结论：PON1Q192R基因多态性与氯吡格雷抵抗有关，PON1Q192R基因多态性可能是急性脑梗死患者再发不良脑血管病事件的原因之一。
关键词：急性脑梗死；氯吡格雷抵抗；基因多态性；PON1 Q192R
急性脑梗死是神经内科常见疾病，具有高发病率、高致残率等特点[1]，口服抗血小板药物是预防脑卒中复发及其他心血管事件发生的重要措施[2]。目前，指南推荐的常用药物为阿司匹林或氯吡格雷，与阿司匹林相比较，氯吡格雷具有耐受性高，安全性好，胃肠道反应小，而且不增加出血风险等优点，但是部分患者在摄入常规治疗量的氯吡格雷后不能有效控制血栓性事件的发生，临床上把这种现象称为氯吡格雷抵抗。陈钦榜等[3] 研究提出，导致CR发生的可能因素较多，但最主要的影响因素之一是遗传因素。因此越来越多研究开始关注CR与基因多态性之间的相关性。尤其是PON1基因的多态性。编码对氧磷酶1基因的外显子序列上的与功能联系最为紧密的单核苷酸多态性位点是Q192R。本研究将ACI患者PON1Q192R基因单核苷酸多态性的基因型和等位基因分布情况作为观察指标，旨在探讨ACI患者PON1Q192R基因多态性与CR的相关性，明确其对ACI患者的抗血小板治疗和ACI的预防的临床指导意义。
1.资料与方法
1.1一般资料：
选取我院诊治的急性脑梗死患者，NIHSS评分在26分以下，共有131例患者，年龄超过18岁。全部患者皆与国际疾病分类第十版（ICD10）的诊断标准相符，排除标准包括：心源性、其它因素和病因不明确的脑梗死；氯吡格雷过敏；应用溶栓、抗凝治疗；脑出血、外伤、肿瘤；严重的肝肾功能障碍，慢性炎症或感染性疾病等；血小板计数<100×109/L。
1.2 方法
给予所有患者服用氯吡格雷75毫克/日，治疗前及治疗第7天检测ADP诱导的血小板聚集率的变化，根据是否存在CR，分为CR组和非CR（NCR）组；收集全血并提取DNA，通过PCR-RFLP法检测测定PON1基因Q192R的基因型，加上引物，PCR反应条件等，并随机选择5%的样本进行DNA测序验证。6个月后随访，分析急性脑梗死患者服用氯吡格雷抵抗和PON1 Q192R基因多态性的相关性。
1.3 统计学处理
CR组及NCR组的临床基本资料分析用SPSS19.0软件展开研究。采用χ2检验对计数资料进行统计分析，p<0.05为差异有统计学意义。
2结果
图1 PON1 Q192R酶切产物电泳图
2.1 根据其治疗前以及治疗第7天检测ADP诱导的血小板聚集率分组，≥70%为CR组，<70%非CR（NCR）组。131例患者分为CR组24例，NCR组107例，本研究患者中氯吡格雷抵抗（CR）的发生率为18.3%。
2.2 PON1Q192R多态性基因型判定
PON1Q192R位点的三种基因型（见图1）型41例、GG型有55例，GA有35例，其分布频率在CR组和NCR组分别为66.7%，20.8%，12.5%和23.4%，46.7%，29.9%，三种基因型在两组间的分布差异有统计学意义（p<0.05）。A等位基因和G等位基因在CR组和NCR组间的分布频率分别为77.08%，22.92%和46.72%，53.28%，在两组间的分布差异也有统计学意义（P<0.05）
2.3 对选取的ACI患者6个月后随访，有34例发生了不良脑血管事件，发生率为25.95%CR组、NCR组复发19例、15例，发生率为79.17%，14.02%不良脑血管事件再发情况在两组间的比较差异有统计学意义（p<0.001）基因型AA、GA、GG复发例数为13例，15例，6例，复发率分别为48.14%，22.39%，16.22%，卒中复发在各基因型的比较差异有统计学意义。
3讨论
目前关于PON1Q192R的很多研究主要是针对冠心病的，也有许多是针对糖尿病的。Bouman等发现PON1是氯吡格雷生物代谢的关键酶，在氯吡格雷由中间产物代谢转化为有活性的硫醇终产物过程中起重要作用。本研究选取北方地区汉族人群的ACI患者，根据ADP诱导的血小板聚集率分为CR组和NCR组，得出PON1 Q192R位点有三种基因型：三种基因型在两组间的分布差异有统计学意义；A等位基因和G等位基因在两组间的分布差异也有统计学意义。说明PON1 Q192R的基因多态性与ACI患者的CR有关。对选取的ACI患者6个月后随访，PON1 Q192R的基因多态性通过对CR的影响，从而影响了ACI患者的临床结局。综上所述，PON1Q192R基因多态性与氯吡格雷抵抗有关。因此，我们推测PON1Q192R基因多态性可能是急性脑梗死患者再发不良脑血管病事件的原因之一。
参考文献：
[1]SMITH S J，ALLEN J，BLAIR S N，et al. AHA/ACC guidelines forsecondary prevention for patients with coronary and other athero-sclerotic vascular disease：2006 update：endorsed by the NationalHeart，Lung，and Blood Institute[ J] .Circulation，2006，13（19）：2363-2372.
[2]WALTER N KERNAN，BRUCE OVBlAGELE，HENRY R BLACK，et al.Guidelines for the Prevention of Stroke in Patients WithStroke and Transient Ischemic Attack[J] .Stroke，2014，45：2160-2236.
[3]陈钦榜.何英.遗传因素与缺血性脑卒中患者发生氯吡格雷的研究现状.中国临床药理学杂志[J]，2017，33（15）：1508-1510.
论文作者:马春媚,付贺飞,胡畔,彭菲,何志义
论文发表刊物:《中国误诊学杂志》2018年第23期
论文发表时间:2018/9/30
标签：多态性论文; 患者论文; 格雷论文; 基因论文; 统计学论文; 基因型论文; 差异论文; 《中国误诊学杂志》2018年第23期论文;