（盐城市中心血站 江苏盐城 224005）
摘要：目的 本次实验将针对献血者进行核算检测技术的筛查分析，并探讨该技术在临床应用上的成效。方法 本次实验选取了2015年3月-2015年12月本站无偿献血者的标本作为研究标本，共计55186份。酶免阴性及单试剂阴性的标本作核酸检测，采用 Roche Cobas s201检测系统和中山大学达安基因股份有限公司的仪器及试剂开展HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA联合NAT检测。符合送检要求的部分反应性标本送至江苏省血液中心进行确证。结果 在所有血液样本中，拆分阳性标本例数为42份，阳性率则为0.076%。送检的36份标本，有25份确认HBV DNA阳性。所有标本HIV DNA、HCV RNA检测均为阴性。25份HBV DNA阳性标本乙肝两对半血清标志物的检查结果显示，24份HBcAb阳性，7份HBeAb阳性，2份标本化学发光法检测HBsAg阳性。结论 通过ELISA联合核酸检测能够降低输血感染疾病的风险，对提高输血安全性具有重要意义。
关键词：核酸检测；血液标本；血液安全
输血作为一种不可替代的治疗方法，已广泛用于临床，因而，输血安全也成为人们关注的重点问题，特别是对传染类疾病的控制，虽然血站使用两种不同厂家的的ELISA试剂对标本进行两次检测，但是由于病毒检测窗口期的存在、病毒变异、免疫沉默等现象[1]，依然不可避免地出现漏检的问题。核酸检测技术则可以针对ELISA法进行补充，能够缩短“窗口期”，提高临床检测的准确性，已广泛用于血站无偿献血者标本的检测工作中。本次实验选取了2015年3月-2015年12月无偿献血者核酸检测标本作研究，共55186份，通过具体问题分析做出了如下报道。
1.资料与方法
1.1 一般资料
本次实验选取了2015年3月-2015年12月无偿献血者进行核酸检测的55186份标本作研究。所有献血者均经过了酶免四项的检测，剔除了酶免双阳的标本。
1.2 试剂与仪器
HBV、HCV和HIV的核酸提取和检测试剂（罗氏诊断公司，批号有S12280、S16007、T04421；中山达安公司，批号有2014005、2014006、2015001）。Roche Cobas s201全自动核酸提取、扩增检测平台：Hamilton STAR全自动混样仪、Cobas AmpilPrep核酸提取仪及Cobas Taqmen Analyzer核酸扩增检测仪（罗氏诊断公司）。达安提取、扩增检测平台：Hamilton Chemagen STAR全自动核酸汇集提取仪、ABI 7500荧光扩增分析系统。
1.3方法
酶免至少单试剂阴性的标本，采用 Roche Cobas s201检测系统和中山大学达安基因股份有限公司的仪器及试剂开展HBV DNA、HCV RNA及HIV RNA联合NAT检测。符合送检要求的部分反应性标本送至江苏省血液中心进行确证。
1.4 评价标准
本次实验在评价标准上将针对结果进行判断，了解检测情况。其中，在乙肝两对半血清学标志物检测中以百分比的计数分析。
2 结果
检测样本中，拆分阳性标本例数为42份，阳性率则为0.076%。送检的36份标本，有25份确认HBV DNA阳性。所有标本HIV DNA、HCV RNA检测均为阴性。25份HBV DNA阳性标本乙肝两对半血清标志物的检查结果显示，24份HBcAb阳性，7份24份HBcAb阳性HBeAb阳性，2份标本化学发光法检测HBsAg阳性。结果见表1
3 讨论
我国是HBV的高发区，其HBsAg的发生率超过8%。与此同时，对于乙肝两对半的检查结果本身较为负责，包括一些高的HBcAb的阳性率，以及患者可能存在隐匿性感染、免疫沉默等。除此之外，由于感染HBV、HCV、HIV病毒到外周血液中能够检测出病毒抗体存在一定的“窗口期”问题，采用单一的ELISA检测方式容易出现漏检问题，因而有必要开展核酸检测，进一步保证血液安全 [2]。
据相关研究表明，感染HBV、HCV、HIV病毒，其“窗口期”通常为55天、70天和22天，在使用NAT混样检测后，其时间有明显的缩短，对应则为40天，12天和11天[3]。与此同时，在检测中不会受到病毒变异、免疫力因素的干扰，能够降低输血感染存在的风险性问题，有利于提升输血安全性。在本次实验中，我们对25份HBV-DNA的阳性样本乙肝两对半标志物结果进行了分析，以HBcAb阳性比例最大，为96%（24/25），HBcAb 阳性伴HBeAb阳性，比例为28%（7/25），虽然血站对献血者标本不作两对半检测，但是为避免献血传播已肝的风险，在献血体检过程中要加强征询工作，在知道其最近做过两对半检测，应根据其检测结果分析，是否让其暂缓献血，以保障临床用血的安全。有2份标本化学发光法检测HBsAg阳性，说明化学发光法检测乙肝标志物较ELISA法灵敏。结果也发现有一份标本乙肝两对半结果全阴，HBV-DNA定量检测为阳性，这可能正处于病毒感染后的“窗口期”。
病毒感染的“窗口期”也是导致酶免疫筛查漏检的重要因素，而ELISA检查中，当血液样本显示为阴性的时候，依然存在一定的输血传染病的风险[4] [5]，需要联合核酸检测技术进行全面的判别，进而减低优于病毒变异、免疫沉默等因素导致的安全隐患。能够减小经血液传播疾病的风险，保障临床用血的安全。
综上所述，通过ELISA法的检测，能够对抗-HIV、抗-HCV以及HBsAg进行较为准确的筛查，联合核酸检测能够降低输血感染疾病的风险，为用血者提供更加安全、有效地血液。
参考文献
[1]陈锦艳，黄伯全，黎世杰，等.开展HBV和HCV核酸检测条件下献血者ALT筛查的意义探讨[J].中国输血杂志，2015，28（6）：669-671.
[2]刘丽，潘海平，单玉，等.无偿献血者丙氨酸氨基转移酶与HBV、HCV感染的相关性分析[J].中国基层医药，2015，22（1）：121-122.
[3]王锐，韩玲，赵伟萍．20例输血感染案例引起的思考［J］．中国输血杂志，2016，15（3）：216-218．
[4]郭燕，蔡斌，段勇，等.结合核酸检测技术探讨ALT在献血者筛查中的意义[J].临床输血与检验，2016，18（4）：326-328.
[5]赵富锋. HBV-DNA定量检测与乙肝感染血清标志物结果分析[J]；基层医学论坛；2013，17（10）：1228-1229.
论文作者:耿雪芹,刘亭亭,刘专（通讯作者）
论文发表刊物:《航空军医》2018年18期
论文发表时间:2018/11/29
标签：标本论文; 阳性论文; 核酸论文; 乙肝论文; 献血者论文; 阴性论文; 试剂论文; 《航空军医》2018年18期论文;