（贵阳中医学院第二附属医院 贵州 贵阳 550003）
【摘要】 目的：本次试验对苗药伤科止痛液的急性毒性试验和皮肤刺激性试验进行研究。方法：结合临床用药实际，考察多次用药于SD大鼠完整皮肤急性毒性的情况和对家兔完整皮肤的刺激性情况。结果：连续给药14天后，动物均存活；大鼠外观、行为、呼吸状态、体位及姿势、对刺激的反应、大体剖检均未见明显异常；家兔皮肤均无水肿、渗血、炎细胞浸润等皮肤刺激性病理改变。结论：在本次苗药伤科止痛液大鼠皮肤急性毒性试验中，大鼠给予最大给药量23.2g/kg体重，相当于临床用药量的200倍，未见明显毒性反应；药物对家兔多次皮肤刺激，肉眼观察未见实验动物皮肤充血、水肿，病理切片检查也未见刺激性病理变化，表明苗药伤科止痛液临床使用较安全，为临床应用提供了实验依据。
【关键词】 苗药伤科止痛液；急毒实验；皮肤刺激性实验
【中图分类号】R285 【文献标识码】B 【文章编号】2095-1752（2016）31-0336-02
The hospital preparations miao medicine experience analgesic liquid acute toxicity experiment Wang Xia
Affiliated Hospital of Guiyang College of Traditional Chinese Medicine,Guiyang 550003,China
【Abstract】Objective The experiment of miao medicine &experience pain fluid to study the acute toxicity test and skin irritation test. Method With actual clinical medication, multiple drug use full skin acute toxicity in SD rats and the rabbit skin stimulus the full story. Results For 14 consecutive days, all animals survived; Appearance and behavior of rats, respiratory status, position and posture, response to stimuli, gross autopsy were not seen obvious abnormity; Rabbit skin no edema, bleeding, inflammatory cells infiltration skin irritation such as pathological changes. Conclusion The fluid in the miao medicine &experience pain rat skin acute toxicity experiment, the rat to give maximum dosage of 23.2 g/kg body weight, clinical dose equivalent to 200 times, no obvious toxic effects; Drugs of rabbit skin irritation for many times, macroscopic observation not seen experimental animal skin congestion, edema, pathological biopsy excitant pathological changes, not show that miao medicine &experience pain liquid clinical use is safe, provides experiment basis for clinical application.
【Key words】Miao drug liquid experience pain; Urgent poison experiments; Skin irritation experiments
“苗药伤科止痛液”是贵阳中医学院第二附属医院骨二科将传统苗医的医药理论与贵州道地药材相结合，配制以苗药为主的酊剂，由四块瓦、水冬瓜根皮等20余味中药组成，功效活血化瘀，消肿止痛。用于各种跌打损伤、软组织损伤，肿痛瘀血者。在临床治疗急性软组织损伤的初步应用中取得了良好疗效。医院不断优化制剂工艺，供院内观察使用已有5年时间，效果显著，深受患者好评，现临床已积累550余例有效病例。
1.实验材料
1.1 药物
苗药伤科止痛液，由贵阳中医学院第二附属医院药剂科提供，批号：20150718。为含酒精的液体制剂，制剂酒精浓度为70%，载药量为0.0928g/ml。皮肤外用给药，一次25ml，一日三次。
剂量设置：苗药伤科止痛液临床给药途径为皮肤外用给药，外用一次25ml，一日三次，日用量6.96g（载药量）/75ml计，成人体重按照60kg计算，即临床成人日用量为0.116g（载药量）/kg。
临用时用旋转蒸发器减压浓缩成载药量为0.232g/ml（酒精浓度为70%），皮肤涂抹给药，2ml/100g体重，间隔1h后待皮肤上的药物吸收后再次给药。
1.2 动物
SPF级SD大鼠，雌雄各半，体重180～220g，由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK-（军）2012-0010。新西兰大白兔，体重2.0±0.5kg，12只，雌雄各半，健康合格。由中国人民解放军第三军医大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK-（军）2012-0010。
1.3 饲料
饲料为全价颗粒饲料，由上述单位提供。
1.4 动物实验场所
贵阳中医学院药理毒理实验室通风良好，清洁卫生，温度20～25℃，湿度55%～65%。动物单性别分笼饲养，自由饮水进食。
1.5 主要仪器
ALC-210.3型电子天平，上海良平仪器仪表有限公司；RE-205型旋转蒸发器，上海予华仪器设备有限公司，OLYMPUS BH-2显微镜，日本。
1.6 统计学处理
数据采用组间比较差异性，以（x-±s）表示，进行t检验。
2.实验方法与结果
2.1急性毒性实验
取SD大鼠40只，随机分成空白对照组、苗药伤科止痛液组，每组20只，雌雄各半。实验前一天，每只大鼠于背部用脱毛膏脱毛，脱毛区域为3×3cm。禁食不禁水12h，第二天，苗药伤科止痛液组皮肤涂抹给予大鼠0.232g/ml的苗药伤科止痛液，2ml/100g体重，间隔1h再次皮肤涂抹给药一次，一日五次，相当于23.2g/kg体重，为临床拟用剂量0.116g/kg体重的200倍；空白对照组以相同容量的生理盐水皮肤涂抹给药，一日五次。给药后连续观察14d，记录动物有无毒性反应以及实验前后体重变化，以不产生死亡的剂量为最大给药量。
结果：SD大鼠皮肤涂抹给药苗药伤科止痛液23.2g/kg后，发育健康，肌肉丰满，被毛密而有光泽，眼睛明亮而灵活、无异常的分泌物，肛周洁净，摄食正常，四肢健壮，自发活动正常，观察期内体重逐渐增加，与空白对照组比较无明显差异。14d内未见动物死亡及毒副反应。实验结束时肉眼尸解未见明显病理改变。实验结果见下表。
2.2 皮肤刺激性实验
取家兔12只，随机分为三组，即空白对照组、苗药伤科止痛液组、酒精组，每组4只，雌雄各半。实验前每只家兔均用脱毛膏于一侧背侧脱毛，脱毛区域为5×5cm。第二日于脱毛区域皮肤涂抹给药，6.25ml/kg体重，每日一次，连续给药7次，空白对照组给予同等容积生理盐水，酒精组给予同等容积70%酒精。每次给药后肉眼观察记录用药部位皮肤有充血、水肿等刺激性反应。末次药后6h用无菌温水清洗掉残留药物，即刻、24h、48h、72h肉眼观察记录用药部位皮肤有无充血、水肿等刺激性反应。末次观察结束后，处死家兔，取给药部位的皮肤一小块浸入10%甲醛溶液固定，切片进行HE染色，用解剖显微镜观察上述组织有无刺激性病理变化。
结果，各组家兔皮肤大体观察：空白对照组家兔皮肤给药为生理盐水，除用脱毛剂进行脱毛对家兔皮肤有轻微损伤外，涂抹生理盐水未见对皮肤有异常损伤；苗药伤科止痛液组情况同空白对照组；酒精组家兔皮肤在第一次涂抹70%酒精后，涂抹区域出现轻微发红，但随着后几次给药，这种反应消退，致第7次给药时上述反应基本消失不见。各组家兔皮肤组织病理切片镜下观察：空白对照组、苗药伤科止痛液组和酒精组家兔皮肤均无水肿、渗血、炎细胞浸润等皮肤刺激性病理改变。
3.实验结语
苗药伤科止痛液为中医药复方制剂，用于各种跌打损伤、软组织损伤，肿痛瘀血者，辅料为乙醇。通过上述实验研究，结果表明：大鼠一日内皮肤涂抹给予23.2g/kg体重苗药伤科止痛液后，连续观察14天，动物均存活，大鼠外观、行为、呼吸状态、体位及姿势、对刺激的反应、大体剖检均未见明显异常。药前、药后第7天和14天苗药伤科止痛液组雌性、雄性大鼠体重与同性别空白对照组大鼠没有显著差异。在本次苗药伤科止痛液大鼠皮肤急性毒性试验中，大鼠给予最大给药量23.2g/kg体重，相当于临床用药量的200倍，未见明显毒性反应。
苗药伤科止痛液对家兔多次皮肤刺激，肉眼观察未见实验动物皮肤充血、水肿，病理切片检查也未见刺激性病理变化，表明苗药伤科止痛液临床使用较安全，为临床应用提供了实验依据。
基金项目：本课题由贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术课题研究资助（编号：QZYY2013-72）
论文作者:王霞
论文发表刊物:《医药前沿》2016年11月第31期
论文发表时间:2016/11/12
标签：伤科论文; 皮肤论文; 家兔论文; 给药论文; 大鼠论文; 体重论文; 刺激性论文; 《医药前沿》2016年11月第31期论文;