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摘要：为了可以使检验结果更准确、更科学，就需要规范药品微生物的检验环境以及实验操作过程还有被检验生物自身等方面，对这些方面存在的影响药品微生物的检验结果的因素进行分析。按照严格的规章制度俩进行检验，按照标准的检验方法来进行实验，保证实验检验结果的准确性。
关键词：药品微生物限度；检验误差；影响因素
引言
药品是帮助人类在疾病方面的重要物质，药品的微生物限度检验结果也是对人民的生命安全的一大保障。每种类型的药品都有其使用的特点，药典把药品又划分为规定灭菌药品和非规定的灭菌药品，两者之间的区别就是非规定的灭菌药品是可以有限量的微生物存活的，但是必须做微生物限度检查。这种微生物限度的检查主要体现的是药品在生产中的科学高质量管理的水平，主要作用就是提高药品质量。非规定的灭菌药品的微生物限度标准主要是依据药品的提供途径、对人体的存在的伤害、中药的特殊功能等方面来规定的。因为微生物检验的流程比较复杂、实验操作时间长、外界环境不稳定等都会导致检验结果不准确，根据相关的调查研究对最容易导致检验结果出现的误差的因素进行了探究分析。
一、实验过程中所处的环境影响
关于药品微生物限度的检验过程应该是在一个干净的实验室中进行的，这同时也要求每个相关的实验室也必须有独立的空气净化系统确保洁净，按照标准来调整实验室的环境洁净度、温度以及湿度。为了不受外界的微生物污染所以不要在操作期间安装下水道，同时实验室的设施要齐全，缓冲间中要配备洗手盆、无菌的衣服和帽子以及口罩鞋套等，操作台上还要配置药用天平、乙醇灯、火柴、大小橡皮胶头等，在实验操作前后都要对相关的实验室进行净化管理，检验用的阳性菌操作应该在单独的阳性菌实验室进行实验，不得乱用实验室进行检验操作。
二、实验操作的工作人员的影响
因为操作人员对无菌概念的了解程度有限，很多药品检验员在思想上就认为药典在微生物限度上制定的标准范围比较宽松，对菌落计数上要求不严格，这就严重影响了药品检验的细菌污染程度，同时又因为检验人员没有按照药典的规定来进行实验操作，在整个实验过程中没有重视实验条件的控制，导致药品检验结果出现误差、不准确。
三、实验中检验对象的影响
1.检验对象自身的特殊性
被检验对象的自身都会存在一些或多或少的特殊性，同时药品中又有细菌的存在这就直接影响了药品微生物限度的检验结果，主要体现在这几个方面：1.外界环境的不确定性，药品受到外界环境中的微生物的入侵，这种污染存不存在都可以同时这种微生物的类型又是多样化的。2.分布程度不均匀，一个批号中的药品被污染，有的没有，分布情况不均匀，而且在污染的药品中，有的污染程度特别重，有的可能就反差特别大程度不明显，种类上也没有相对的标准可能复杂多变可能就比较单一。3.活体特征，药典中规定用活的微生物作为实验的检验对象，这主要因为活体的显著特征。
2.检验对象中控制细菌真菌成分的影响
通过研究发现在检验对象的本身有很多中西药的成分中原来含有抑菌的成分，虽然有的检验对象中不存在已知的抑菌成分，但是在菌落计数的情况下却可以对菌落起到控制的作用，这样就干扰了检验对象中细菌的检查，在这种情况之下一定要对提供的检验对象进行处理，消除抑菌作用的干扰，便于实验的程序正常进行，在国家规定的药典中就规定方法验证是非常重要的，主要是处理检测概率以及数据准确性的问题，为了是否可以适用于检验对象的微生物限度检验，需要进行反复实验来验证。确保检验结果的准确无误，以及检验方法的完整性。
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3.检验对象对培养无温度的影响
总结前辈的实验经验可以得出的数据是，对于一些细菌含量成分比较高的检验对象，应该把它放在一个温度为30摄氏度的实验室环境下进行培养，菌落在72小时的环境中生长速度比较迟缓，所以这就必须按照药典规定的范围来延长培养的时间。
四、微生物检验环境的技术指标对检查结果的影响
1.2005年版《中国药典》对微生物检查的环境提出了明确的要求：
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下、局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。检验过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。笔者曾遇到过在净化工作台正常启动下，阴性对照没长菌，但沉降菌超过30个的情况，从而导致试验失败，经检查发现是净化工作台洁净度不合格。故应加强无菌室的清洁、维护和保养工作，定期检测净化工作台面的洁净度，不合格时应立即处理。
2.紫外灯吊挂高度及瓦数不统一也会对检查结果产生影响
瓦数应按每立方米2-2.5w设置，吊挂在离操作台1m左右的高度，否则杀菌效果不佳。并且应严格控制紫外灯使用时间，因超过使用时间将达不到杀菌效果。
五、实验用品的处理对检查结果的影响
1.灭菌条件控制不严
对实验所用器具，必须根据材料的性质采取干热灭菌或湿热灭菌法，且灭菌时间和温度均采用验证合格的灭菌程序来灭菌。湿热灭菌过程中若放冷空气不彻底，必将影响灭菌效果，从而影响试验结果。
2.霉菌培养应在霉菌培养箱中进行
因为霉菌培养箱具有保持箱内湿度的功能，而生化培养箱没有这一功能，这对于霉菌与酵母菌数的培养有一定的影响% 一般霉菌在湿度低于时即不生长）。另外，试验中常可见到培养72小时的玫瑰红钠琼脂培养基由于失水使琼脂收缩干裂，为防止这一现象，应在盛水托盘内定期加水。
六、试验操作误差对检查结果的影响
药品检验员在提取检验试液时要取均匀的供试液。如取上清液或沉淀物，对试验结果必有影响。注入平皿时应 注意培养基的温度，高于45摄氏度时易造成微生物受损或死亡，低于45摄氏度又容易凝固，影响混匀，因此使用时用水浴保温效果较好。检验对象从制备至加入检验用培养基，不得超过1小时，以避免由于时间过长而导致细菌繁殖或死亡。另外，某些中药制剂（如丸剂、糖衣片等）用研钵难于研细，会影响供试液均匀性，吸取供试液时药渣易堵吸管，造成取样困难和不均匀。
七、抽样误差对检查结果的影响
抽样方法、抽样数量及抽样次数均可影响测定结果。《中国药典》2005年版关于抽样方法与抽样数量规定：检验对象应随机抽样，一般抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。若减少抽样量或检验量，必将增加漏检率。
八、菌种及菌落计数
菌种是微生物限度检验中重要的生物资源，在菌种的使用过程中需定期传代，所用标准菌种的传代次数不得超过 5代。应有专人负责，专用冰箱保。当菌落生长密集时，容易发生计数误差。要求检验人员在菌落计数时应仔细观察，对检品的不溶辅料、培养基产生的气泡等要严格鉴别，必要时借助适宜的工具以排除干扰因素，也可适当延长培养时间做进一步观察!菌落成片生长或重叠会影响计数!药典规定菌落如蔓延生长成片，则不宜计数。
总结
为减少实验误差，建议做微生物限度检查时应遵循以下原则：检查人员要有高度的责任心；为了防止二次污染和阻止已污染微生物的繁殖或死亡，检查前将药品在原始包装状态下用紫外灯照射；检验过程中应规范操作；对结果的判断应准确；选用适当的供试液制备方法。
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论文作者:迟亨家
论文发表刊物:《健康世界》2017年第10期
论文发表时间:2017/7/31
标签：微生物论文; 药品论文; 药典论文; 限度论文; 菌落论文; 对象论文; 操作论文; 《健康世界》2017年第10期论文;