季坚卫 朱璐卡 杨莲芳 龚向英
义乌市中心医院（温州医科大学附属义乌医院），浙江义乌 322000
摘要：目的：探讨孟鲁司特对儿童过敏性紫癜Toll样受体表达的影响。方法：将86例过敏性紫癜患儿分为治疗组和对照组，每组43例。对照组采用的是常规综合治疗的方法，治疗组在与对照组基础上加用孟鲁司特。实时荧光定量PCR技术检测外周血单核细胞中TLR2、TLR5及TLR9 mRNA的基因相对表达量。结果：治疗组和对照组治疗后与治疗前相比，外周血单核细胞TLR2、TLR5及TLR9 mRNA相对表达量均显著降低（均为P＜0.05），且治疗后治疗组外周血单核细胞TLR2、TLR5及TLR9 mRNA相对表达量均明显低于对照组（均为P＜0.05）。结论：孟鲁司特能影响过敏性紫癜患儿Toll样受体（TLR2、TLR5及TLR9）的蛋白表达，提示TLR2、TLR5及TLR9活化可能参与了过敏性紫癜的免疫发病机制。
关键词：孟鲁司特；过敏性紫癜；Toll样受体
过敏性紫癜（HSP）是儿童时期最常见的变态反应性血管炎之一，以紫癜、腹痛、关节痛及肾脏病变为主要表现。目前研究认为免疫反应是引起本病的主要机制[1]。Toll样受体（以下简称TLRS）是一种重要的模式识别受体，是宿主天然免疫系统的关键成分[2]。本实验通过观察孟鲁司特对儿童过敏性紫癜Toll样受体表达的影响，探讨其临床意义。
1资料与方法
1.1 一般资料
2012年5月～2014年4月在我科住院的过敏性紫癜患儿86例，其中女35例，男51例，年龄为3-14岁，均符合《实用儿科学第7版》中过敏性紫癜诊断标准。分为对照组和治疗组，每组43例，2组间性别、年龄、病情轻重比较差异无统计学意义（p＞0.05）。
对照组采用的是常规综合治疗的方法：包括卧床休息，避免再次接触过敏原，对有明显感染者进行抗感染治疗；予西咪替丁、钙剂静滴；氯雷他定、潘生丁口服；对关节痛、腹痛明显者予糖皮质激素治疗。治疗组在与对照组基础上加用孟鲁司特（商品名顺尔宁），2-6岁为4mg/d，6-14岁为5mg/d，每日一次，睡前服用；病情控制后单用孟鲁司特治疗1月。
1.2 主要试剂与仪器
M-MLV逆转录酶、RNasin、Oligo（dT）引物、随机引物；FastStart Universal SYBR Green Master荧光定量RT-PCR试剂盒；人淋巴细胞分离液；酶标仪。孟鲁司特生产厂家：杭州默沙东制药有限公司，规格：4mg，国药准字J20070070，进口药品注册证号H20070275；5mg，国药准字J20070068，进口药品注册证号H20070276。
1.3 方法
TLR检测：采集对照组和治疗组过敏性紫癜患儿治疗前后前臂外周抗凝血3ml，用人淋巴细胞分离液提取外周血单核细胞（PBMC，1×106／m1），提取总RNA，实时荧光定量PCR技术检测TLR2、TLR5及TLR9 mRNA的基因相对表达量。采用软件自动分析并绘制PCR产物的熔解曲线图，采用2－ΔΔCt方法对PCR数据进行分析。
1.4统计学分析
采用SPSS19.0统计软件包进行统计分析。用均数士标准差（ ±SD）表示，采用两样本t检验、配对t检验。
2 结果
对两组患儿的单核细胞进行荧光定量PCR检测TLR2、TLR5、TLR9结果显示：治疗组治疗后TLR2、TLR5、TLR9的基因表达量均显著低于治疗前及对照组治疗后（均为P＜0.05）见表1；提示孟鲁司特可以显著抑制过敏性紫癜患儿外周血中TLR2、TLR5、TLR9的基因表达。
表1 两组患儿外周血中TLRs表达情况（ ±s）
注：与治疗前相比较，&P＜0.05，与对照组相比较，#P＜0.05，
3 讨论
过敏性紫癜是临床上一种儿童常见病，发病机制主要是免疫因素诱导的一类全身血管炎症，往往同遗传、药物及感染等有着一定的联系。TLRs受体可以通过识别微生物蛋白质/ DNA基序或病原体相关分子模式（PAMP）连接适应性免疫反应的后续激活构成先天和适应性免疫的重要纽带[3]。通过Toll样受体识别病原体引起先天性免疫系统的激活，诱导促炎细胞因子。TLR2、TLR5及TLR9可以触发IL-6、IL-8产生炎症反应[4]，由于这些分子从内源性大分子强调或坏死的细胞中释放出来，因此这些Toll样受体可以在监控生物系统中组织的疾病状态中发挥重要作用。而孟鲁司特是一种白三烯受体拮抗剂（LTRAs），在国内外先后用于治疗过敏性鼻炎、毛细支气管炎及支气管哮喘等过敏性疾病，并取得良好效果。
本研究通过孟鲁司特对儿童过敏性紫癜的治疗，观察患儿外周血TLR2、TLR5、TLR9表达水平等指标变化。说明孟鲁司特对于过敏性紫癜患儿的治疗可以抑制TLR2、TLR5及TLR9表达干预TLR信号通路。国内相关文献[5]在过敏性紫癜患者外周血中的TLR表达变化研究中发现，患者外周血单核细胞中的TLR2、TLR4、TLR5及TLR9均明显增加，与本研究结果一致，因此纠正过敏性紫癜患者TLR信号通路异常表达可能是过敏性紫癜治疗的一个靶点。
综上所述，孟鲁司特治疗组患儿治疗后各指标与观对照组相比有明显改善，说明过敏性紫癜的发病机制与TLR信号通路异常表达密切相关，而孟鲁司特可以部分逆转该疾病的发展，从而改善患儿预后。
参考文献：
[1]Chen L，Wang Z，Zhai S，Zhang H，Lu J，Chen X.Effects of hemoperfusion in the treatment of childhood Henoch-Sch?nlein purpura nephritis.[J]Int J Artif Organs.2013 Jul；36（7）：489 -97.
[2]PAkiraS，TakedaK，KaishoT.ToII-Iikereceptors：criticaIproteins Iinkinginnateand acguired immunity[J].NatImmunoI，200l，2（8）：675 -680.
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[4]Kaur S，Maheshwari A，Aneja S，Seth A，Beri S，Agarwal S，Garg T.Henoch-Sch?nlein purpura with uveitis：an unusual case and review of literature.[J]Rheumatol Int.2012 Dec；32（12）：4057-9.
[5]张庆群，陈秀霞，付元，等.过敏性紫癜患儿外周血单核细胞表面TLR2，4，6的表达及其与辅助性T细胞17的相关性分析[J].中华妇幼临床医学杂志（电子版），2014，10（05）：623-629.
作者简介：季坚卫（1980.1~），男，大学本科，副主任医师。
2012年义乌市第二批科技科研计划项目，课题编号：12-3-25。
论文作者:季坚卫,朱璐卡,杨莲芳,龚向英
论文发表刊物:《健康世界》2015年13期供稿
论文发表时间:2015/11/13
标签：紫癜论文; 受体论文; 患儿论文; 对照组论文; 细胞论文; 外周血论文; 儿童论文; 《健康世界》2015年13期供稿论文;