（成都市妇女儿童中心医院药学部 四川 成都 610091）
【摘要】 目的：本实验将7-乙基-10-羟基喜树碱(SN38)制备成亚微乳（SN38-SME）,并对其性质进行体外表征。方法：采用高压均质法制备SN38-SME,并采用激光粒度仪、透射电镜考察亚微乳的形态，葡聚糖凝胶柱法测量包封率、载药量。结果：SN38-SME呈类球形，粒径在100-200nm，稳定性好，包封率、载药量较高。结论：本实验成功制备了SN38-SME，具有一定的实用价值。
【关键词】 7-乙基-10-羟基喜树碱；亚微乳；制备；表征
【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2017）04-0337-03
Preparation and?Characterization?of? 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin submicron emulsions
Fu Huimin，Zhou Xiaoling .
Department of pharmacy,Chengdu Women and Children’s Central Hospital, Chengdu 610091
【Abstract】 Objective To investigate the Preparation of submicron emulsions loaded with 7-ethyl-10-hydroxycamptothecin(SN38-SME)and to study its in vitro Characterization. Methods The SN38-SME was prepared by High Pressure Homogenization method.The morphological characteristic of the SN38-SME was mensurated by laser particle analyzer and transmission electron microscope. Glucan gel column chromatography was used to determine the entrapment efficiency. Results The SN38-SME has larger loading capacity and better envelopment and stability.Conclusion The Preparation of submicron emulsions has definite practical value.
【Key words】7-ethyl-10-hydroxycamptothecin;Submicron emulsions;Preparation; Characterization
喜树碱是从珙桐科植物喜树中分离得到的生物碱，具有广谱抗癌作用。伊立替康（CPT-11）是喜树碱的衍生物，是临床治疗癌症的一线药物[1]。7-乙基-10-羟基喜树碱（SN38）是CPT-11在体内的活性代谢物，其细胞毒性比CPT-11强数百倍[2]。因此，将SN38直接给药具有更可观的效果。SN38溶解性差，已研制出的脂质体、纳米粒、高分子聚合物等制剂[3-5]均存在包封率低，工艺复杂且重复性差等不足。而亚微乳是临床应用多年且已被广泛接受的剂型，可供静脉注射，载体安全性好，并已实现工业化生产，具有很大的市场前景[6]。因此本课题拟将SN38制备成亚微乳（SN38-SME），并对其性质进行体外表征。
1.仪器与试药
BP211D电子天平(德国Sartorius公司)；Varian CARY100紫外可见分光光度计（美国VARIAN公司）；Allegra X-22R高速冷冻离心机(美国Beckman Coulter公司)；R-201旋转蒸发器（上海申生科技有限公司）；85-2型恒温磁力搅拌器（巩义市英峪予华仪器厂）；EmulsiFlex-C5高压乳匀机（AVESTIN公司，加拿大）；Zetasizer Nano ZS90激光粒度分析仪（Malvern公司，英国）；FA35高速剪切机（上海弗鲁克机电设备有限公司）；H-600透射电镜（HITACHI公司，日本）。7-乙基-10-羟基喜树碱（含量≥99%，成都兰贝植化科技有限公司）；蛋黄卵磷脂（德国Lipoid公司）；油酸（德国Lipoid公司）；Pluronic 188（南京威尔公司）；注射用大豆油（铁岭北亚药用油有限公司）；中链油（铁岭北亚药用油有限公司）；无水乙醇、四氢呋喃、HCl（分析纯）。
2.方法与结果
本实验采用高压均质法制备亚微乳，以粒径大小，PDI和离心稳定性常数作为评价指标，通过单因素实验考察处方因素和工艺因素对亚微乳的影响。
2.1 处方优化
2.1.1油种类的选择 考察大豆油、中链油、结构甘油三酯以及大豆油和中链油的物理混合物对SN38-SME的影响。结果显示选用大豆油中链油混合物稳定性最好，离心稳定性常数为39%，粒径为164.3nm、PDI为0.085。
2.1.2大豆油和中链油质量比的选择 考察大豆油和中链油质量比分别为3:1、2:1、1:1、1:2、1:3时亚微乳的稳定性。结果表明当质量之比为1:1时，粒径164.3nm，PDI0.085，且离心稳定性常数最小。故选择质量比为1:1。
2.1.3油用量的选择 考查油总用量分别为10%、15%、20%、25%时对SN38-SME的影响。结果显示当油用量增多，粒径随之增大，但PDI随之减小。综合考虑油的用量为15%。
2.1.4蛋黄卵磷脂（E80）用量的选择 选用E80作为乳化剂，考察E80用量分别为1.2%、2.0%、2.5%、3.0%时亚微乳的稳定性。结果表明，当E80用量为2.5%时，粒径大小、PDI和Ke值都达到最优，故选定E80用量为2.5%。
2.1.5 F68用量的选择 F68与 E80合用，作为混合乳化剂，可提高该亚微乳的稳定性。考察F68用量分别为1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%时亚微乳的稳定性。结果表明，当F68用量为2.0%时，粒径大小、PDI和Ke值都达到最优，故选定F68的用量为2.0%
2.1.6油酸（OA）用量的选择 OA作为亚微乳的稳定剂，用量一般在0.2～0.5%。通过筛选确定油酸的用量为0.2%。
2.2 制备工艺优化-单因素实验
2.2.1高压均质压力的选择 在均质次数一定时，设定不同的均质压力进行均质，测定其粒径，PDI和Ke。结果表明，随着均质压力的增加，亚微乳粒径逐渐减小，压力为3000～8500psi和4000～10000psi时，结果相差不大。为降低仪器磨损，最终选定高压均质压力为3000～8500psi。
2.2.2高压均质次数的选择 设定高压均质机压力为3000～8500psi对初乳进行乳化，并在均质5、10、15、20和25次时留样，并测定其粒径和PDI。结果表明，随着均质次数的增加，其粒径逐渐减小，当均质15次时乳化完全，粒径为157.2nm，PDI为0.124，结果较优。故选定高压均质次数为15次。
2.3 最优处方与制备工艺
确定SN38-SME的处方和工艺：称取SN38 10mg，E80 250 mg，BHA 2mg和油酸20mg于梨形瓶中，溶于适量四氢呋喃，50℃水浴搅拌1h；再加入1.5g大豆油和中链油（1:1）使溶解，然后减压旋干四氢呋喃，制得油相；将200mg F68溶解于8.5mL注射用水中得水相。将油相加入水相中，用高速剪切机剪切2min制得初乳；再将初乳高压均质15次（3000～8500psi），形成SN38-SME。
2.4 表征
2.4.1粒径与Zeta电位 用激光粒度分析仪测定其粒径、PDI和Zeta电位。结果显示平均粒径为152.4±4.9nm，PDI为0.133±0.012，Zeta电位为-22.20±1.32mV。典型的SN38-SME粒径分布图和Zeta电位图分别见图1和图2。
2.4.2透射电镜观察形态 在透射电镜下观察亚微乳的粒径大小与形态（图3），表明该亚微乳在形态上呈类球形，粒径在100～200nm，与激光粒度仪测得结果相一致。
2.4.3包封率的测定 实验选择葡聚糖凝胶柱法测定亚微乳的包封率[7]。因包封进纳米粒中的药物与亚微乳中的药物在384nm处紫外吸收值不同，根据下列公式可计算得到包封率:
最终测得SN38-SME的载药量为0.44%±0.01%。
3.讨论
本课题成功将SN38制备成亚微乳，大大增加了SN38在水中的溶解度，提高了药物的载药量，增加了稳定性和制剂的安全性，具有一定实用价值。后续试验将对亚微乳的制备工艺进行更全面的分析，并进行稳定性考察，为其应用开发提供依据。
图3 SN38-SME透射电镜图
【参考文献】
[1]刘德曼,李春英,李朝等.喜树的化学成分研究进展[J].黑龙江医药,2014,2:254-257.
[2]刘丹,张龙,达飞等.新型喜树碱类抗癌药物的研究进展[J].现代生物医学进展,2016,16(5):990-992.
[3]付晓宁,栾立标.7-乙基-10羟基喜树碱长循环脂质体的制备及药动学研究[J].中国新药杂志,2008,17(24):2132-2136.
[4]陈玮琦,栾立标.甲氧基聚乙二醇-聚己内酯共聚物载药7-乙基-10-羟基喜树碱(SN-38)纳米粒的制备及药动学参数的测定[J].药学进展,2009,33(12)553-558.
[5]陈娇婷,温慧玲.树枝状大分子改性聚乙二醇-7-乙基-10羟基喜树碱聚合物的制备[J].赣南医学院学报,2015,35(2):193-195.
[6]陆彬.纳米乳与亚微乳给药系统[J].中国药师,2004,7(10): 759-761.
[7]中华人民共和国药典委员会.中国药典(2010版二部).化学工业出版社,附录XIX E.
论文作者:傅慧敏,周晓玲
论文发表刊物:《医药前沿》2017年2月第4期
论文发表时间:2017/2/21
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