资阳市第一人民医院输血科 641300
摘要：目的探讨在临床输血中疑难血型鉴定及配血困难的解决方案。方法通过临床病例分析，红细胞正反血型鉴定，冷凝集素效价检测，直接抗人球蛋白试验吸收试验盐水法、聚凝胺、微柱凝胶法交又合血等血清学检测方法来正确鉴定血型，成功配血。结果高效价冷凝集素的存在容易给患者血型鉴定及交又配血带来困难。结论在临床输血中，患者体内冷凝集素效价增高引起血型鉴定正反不符，干扰结果。对于疑难血型鉴定标本，应该有针对性的选择不同的方法共同验证，以防漏检误诊确保临床输血安全。
关键词：冷凝集素血型鉴定交又配血
冷凝集素是一种自身抗体，正常人血清中的冷凝集素效价在4℃ 时一般不超过1：16，但在某些病理情况下，冷凝集素的效价可异常试增高而导致血型鉴定及交叉配血困难，影响临床输血治疗的及时进行。现将我院收治的1例含高效价冷凝集素患者的血型鉴定及交叉配血过程报道如下
1临床资料
患者男性，74岁，汉族，既往多次输血，3+年前外院诊断为冷凝集素病，贫血性心脏病，1+年前院外再次诊断为中央型肺癌并行相应治疗；2+天前受凉后出现乏力，伴头晕，胸闷气促，活动后加重。实验室血常规检查HGB：57g/L，RBC：1.56×1012/L，申请去白细胞悬浮红细胞2U。检查血型时发现正反定型不一致，正定型为AB型，反定型与A、B、O细胞均凝集，正反定型不符，肉眼观察抗凝标本中悬浮大量颗粒。综合临床症状分析，怀疑为冷凝集素或其他抗体干扰所致，经进一步试验检测，证实为B型，正反定型不一致证实其自身含有高效价冷凝集素所致。
2血型血清学检查
2.1试剂与仪器
抗A、抗B单克隆血清（长春博迅生物，批号：20150711）反定型试剂红细胞（长春博迅生物，批号20150802）凝聚胺试剂（珠海贝索生物，批号20150701）；抗人球蛋白交叉配血卡（长春博迅生物，批号20150405），离心机长春博研TD-3A型。孵育器长春博研FYQ型免疫微柱孵育器，37℃水浴箱。
2.2血型鉴定
试管法，取干燥洁净的试管三支，分别加入抗A、抗B、抗D血清各2滴，再分别加人患者5%红细胞悬液一滴，混合；另取干燥清洁的试管3支，各加入患者血清2滴，，再分别加入A、B、O型5%红细胞悬液1滴，混合；另取一只试管，加入患者血清2滴及患者红细胞悬液1滴，混合。1000r/min，1min。镜下观察记录结果。将患者正反定型试管均放入37℃水浴箱中10min，取出轻轻混匀观察记录结果。
2.3冷凝集素效价测定【1】
将未除去冷凝集素的患者血清经连续等倍稀释（共15管），分别加入50%自身洗涤红细胞悬液，混匀，置于4℃反应2小时，1000r/min，离心1min，记录结果，然后置于37℃15min后，1000r/min，离心1min，记录结果。
2.4直接抗人球蛋白试验依照说明书标准操作
2.5吸收冷凝集素试验【2】
用O型压积红细胞1.5ml经37℃生理盐水反复洗涤5次，取1体积洗涤O型压积红细胞与2体积患者血清，混合后立即置4℃冰箱吸收1小时，期间摇动数次，使其充分吸收，立即分离血清，备用。
2.6交叉配血试验
利用吸收处理后的患者血清及经37℃ 生理盐水洗涤5次的红细胞悬液与B型献血者（献血者编号 ?）在室温20℃凝聚胺法配血中，主侧出现凝集，次侧无凝集，放37℃10min，取出试管轻轻混合观察结果，主侧凝集消失，配血相合。在微柱凝胶配血法中，试剂与仪器主侧和次侧均相合。
3 结果
3.1 ABO血型鉴定结果表1
3.2 用未除去冷凝集素患者血清与自身洗涤红细胞悬液测定在不同温度的效价，见表2
3.3 直接抗人球蛋白试验：阴性
3.4 用处理后的患者血清，红细胞做凝聚胺交叉配血试验，主次侧均无凝聚，无溶血。在微柱凝胶配血法中，主侧和次侧均相合。
4.讨论
高效价冷凝集素是患者体内产生了抗自身红细胞的嗜异性冷抗体此抗体为IgM类，在体外4℃ 或室温条件下可与自身红细胞或ABO系统其他各个血型的红细胞发生非特异性凝集反应，不规则抗体可呈强阳性。一般健康人血清中含少量冷凝集素，效价很低，一般在1：16以下。
这种抗体在32℃ 以下（0-4℃）时活性最强，能与红细胞结合，当温度升高时凝集的红细胞呈可逆性完全散开，可迅速从红细胞表面解离，因此不引起非特异性凝集，但在某些病理情况下，如自身免疫性贫血，淋巴系统恶性肿瘤、支原体肺炎、病毒感染及某些肿瘤等会表达高效价。
本例患者系癌症病患，体内冷凝集素高效价表达，致使血液标本在室温下离体后马上发生凝集，无法正确鉴定血型，成功配血。经过一系列的有针对性的血清学试验，证实患者血型为型，高效价冷凝集素是引起血型鉴定困难的原因。类似情况也有相关文献报道【3】
在临床输血中，安全输血是根本宗旨。遇到疑难血型鉴定及交叉配血，应该有针对性的选择不同的血清学方法，如经典的抗球蛋白法及卡式配血系统，凝聚胺法配血，最好是几种方法联合使用，共同验证，以免漏检。以上方法不能确诊时，再辅以吸收，放散试验，有条件的实验室甚至可以进行血型物质测定和家族血调查，最终可以解决输血难题。通过一系列的试验，不断分析总结经验，也能不断提高输血技术员的临床实践能力。总之临床输血关系到人的生命安危，一定要小合、仔细、严谨，确保输血安全
参考文献：
[1]肖星甫输血技术手册[M]成都四月科学技术出版社，1992：147-155
[2]庞桂芝，张趁利，姜燕娟高效价冷凝集素配血不合1例[J]中华现代临床医学杂志，2005.3（12）：1202-1203
[3]刘燕 高效价冷凝集素引起血型鉴定及交叉配血困难1例[J]中国医药指南，2014.3（12）：227-228
论文作者:黄敏
论文发表刊物:《健康世界》2015年24期
论文发表时间:2016/3/16
标签：红细胞论文; 血型论文; 血清论文; 患者论文; 鉴定论文; 凝集素论文; 高效论文; 《健康世界》2015年24期论文;