摘要：本文主要针对运用高效液的相色谱法进行动物性的食品内部所含合成色素实测开展深入研究与探讨，希望能够对于今后更为有效地运用高效液的相色谱法实施相应检测工作奠定重要基础。
关键词：高效液相；色谱法；测定；动物性；食品；合成色素；
前言
在动物性的食品当中合成色素测定期间，高效液的相色谱法属于最为有效的一种测定方法，本文主要通过实验方式，深入研究动物性的食品当中合成色素测定期间高效液的相色谱法应用情况。
1、实验仪器及方法
选用Shimadzu LC-20AB型号高效液相的色谱仪、二极管的阵列检测装置、Sartorius PB-2型号酸度计。8种不同合成色素的标准品所配成的100 mg·L- 1标准水溶液等；本次实验方法主要包括：制作聚酰胺萃取固相净化柱、提取样品当中所含合成色素、净化与富集提取液、测定合成色素。
2、实验结果及分析
2.1 分析色谱具体行为及波长选择测定
如图1所示，为480nm测定波长条件下，不同合成色素的标准品色谱分离状况。从图中1当中即可了解到不同色素峰底的宽度情况，依据Rij=（tj- ti）/0.5（wi+ wj）公式，将不同合成色素实际分离度计算出来。在该公式当中，Rij表示任意个色素峰i及相邻色素的峰j实际分离度情况；wj表示相邻两峰当中后个色素峰j所在峰底实际宽度；wi表示相邻两个峰当中前个色素峰i所在峰底实际宽度；tj表示相邻两个峰当中后个色素j保留的时间；ti表示相邻两个峰当中前个色素峰i保留的时间。经试验对比研究后可了解到，这8种不同合成色素相互间分离度均超过1.5范围，该8种不同合成色素可实现良好分离。二极管的阵列检测装置，它有着全波长式采集特性，易于自色谱实施信息采集，将色素内波长最适宜吸收的色谱峰导出，辅助定性、定量的分析操作。本文实验运用了200-800nm全光谱类型采集仪器，实施定量分析操作过程，因采集的带宽度已设定4nm，故此8种不同的合成色素实测波长仅仅用了5种，在选定好相应波长条件之后，实测获取此8种不同的合成色素相应标准品色谱图。
图1 不同合成色素的标准品色谱分离示意图
2.2 优化色谱条件
色谱柱及流动相的洗脱体系，它们均属于该8种不同合成色素实现分离和谐影响因素部分。该8种不同合成色素当中7种为偶氮类，杂氧烷类的合成色素有1种，全部属于极性盐。借助反相的色谱柱分离物质期间，所表现出分离处理效果极佳。实验具体操作期间，应当选定XDB-C18型号的反相式色谱柱，把它们当成该8种不同合成色素分离及分析柱。
甲醇，属于常见反相液的相色谱类流动相，但是，其对于偶氮玉红、赤藓红、红色2G、诱惑红却有着交叉分离度差缺陷，且对于日落黄峰形也相对较差一些。经过实验研究后可了解到，在甲醇内部加入一定量的乙腈，以进一步提升分离处理的效果，把甲醇-（1+1）的乙腈相应混合溶液设定流动相，获取相对较好的一个色谱的峰形。此8种不同的合成色素为极性盐，在其色谱的体系内部具体存在的形式即为离子化的形式。在流动相内逐步加入相应无机性电解质过后，促使其分离处理的效果改善良好，实际分析的时间得以缩短。在实验过程中，pH值设定为7时，0.01 mol·L- 1及0.1 mol·L- 1两种不同的乙酸钠标准溶液，通过分析它对此8种不同的合成色素具体分离处理状况能知晓，浓度不同的乙酸钠标准溶液，其对实际分离的效果影响小。充分地考虑到一种高浓度类盐溶液，其对维护的色谱柱方面影响，此次实验选定pH值设定为7时，0.01 mol·L- 1该浓度之下乙酸钠标准溶液，通常可当成是A流动相。
2.3 实际净化条件有效提取及其选定
此8种不同的合成色素，都有较强的一种极性特征，比较容易与水溶解，但是，针对于动物性的食品当中含有较高蛋白质情况下，食品深加工期间可与蛋白质实现有机融合，在用水并不能够实现被提取处理。实验对比操作分析后表明，碳酰二胺4 mol·L- 1-甲醇（1+1）、氨水与甲醇（7+20）、甲醇、浓度为4 mol·L- 1的碳酰二胺、氨水相关提取试剂，其针对于腊肠当中所含诱惑红此种色素具体的提取率，实验对比的结果表明了，用4 mol·L- 1-（1+1）浓度甲醇该种混合的溶液后，能获最佳的提取效果。选用4 mol·L- 1浓度（1+1）的甲醇这该种混合的溶液，病把它作为一种提取的试剂，运用聚酰胺固自制相柱实现样品净化操作，于聚酰胺的内部加入一定量的提取液，有效吸附该合成的色素，快速把吸附到有色素的聚酰胺、相应提取液，均载至固相自制萃取柱以做好净化操作，对所吸附的温度、酸度，还有固相柱相应淋洗、洗脱等条件予以有效改善。
2.4 实验标准曲线、方法的检出限与测定的下限
该8种不同的合成色素，其P若为0.05-50.0 mg·L- 1质量浓度，所对应着的A峰实际面积即为线性关系；以腊肠成此次实验分析的样品，深入分析此8种不同的合成色素相应检出限情况，按3倍信噪的比例算出其检出限，按10倍信噪的比例算出其下限数据：赤藓红检出限为0.05w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.17w/（mg·kg- 1）；偶氮玉红检出限为0.03w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.10w/（mg·kg- 1）；红色2G检出限为0.02w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.07w/（mg·kg- 1）；诱惑红检出限为0.02w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.07w/（mg·kg- 1）；日落黄检出限为0.03w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.10w/（mg·kg- 1）；胭脂红检出限为0.03w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.10w/（mg·kg- 1）；苋菜红检出限为0.10w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.33w/（mg·kg- 1）；柠檬黄检出限为0.05w/（mg·kg- 1）、测定下限为0.17w/（mg·kg- 1）。
2.5 回收实验及确证样品中的合成色素
熟制虾、蟹肉棒、腊肠等实验样品当中，各自添加种不同合成色素15 mg·kg- 1 8标准溶液来处理样品，色谱条件之下开始测定操作，以获取到最终回收实验操作结果，详如图2所示；实验主要采用二极管的阵列检测装置液相的色谱仪，保留时间针对于目标物定性，借助在线采集吸收光谱来确证目标物。经确证样品中的合成色素后可了解到，熟制虾的提取液处于12.90min保留时间峰相对较强，与标准品的色谱图当中胭脂红所保留的时间具有一致性，可初步地判定出此熟制虾的内部含有着胭脂红，从该胭脂红相应标准品的在线吸收式光谱实验对比分析可了解到，样品的提取液内此峰时间吸收光谱，其能从吸收最大的波长、指纹的峰位至峰谷状，均与标准相符合，证明了此熟制虾的内部含非法添加的胭脂红。
图2 本次回收实验具体结果示意图
2.6 分析样本
实验分析蟹肉棒、熟制虾、腊肠等动物性的食品加工期间，经保留的时间、在线吸收式光谱的确证过后，可发现此腊肠的样品内部，3种样品内部含诱惑红、2种样品内部含赤藓红，熟制虾的样品内含有违禁胭脂红，蟹肉棒的样品内含有着违禁柠檬黄与诱惑红。超标的范围所用合成色素的动物性类型食品实际数量已经占据了检测的样品整体数量27%左右。
3、结语
综上所述，本文主义运用了高效液的相色谱仪、二极管的阵列检测装置，建立起动物性类型食品内部红色的2G及胭脂红等相近8种不同的合成
色素相应多组分式检测与综合确证操作法，用来测定熟制虾、蟹肉棒及腊肠等各种动物性质食品当中所含合成色素，实验研究结果较为满意。
参考文献：
[1]奚星林，邵仕萍，徐娟.固相萃取-高效液相色谱法同时测定食品中12种合成色素[J].中国食品卫生杂志，2016，24（03）：217-222.
[2]鄢兵，胡俊，张云伟.超高效液相色谱法快速测定膨化食品中7种人工合成色素[J].中国卫生检验杂志，2017，37（12）：194-197.
论文作者:麦文江
论文发表刊物:《基层建设》2019年第19期
论文发表时间:2019/9/21
标签：色素论文; 色谱论文; 检出论文; 样品论文; 高效论文; 下限论文; 动物性论文; 《基层建设》2019年第19期论文;