（中山大学孙逸仙纪念医院小儿神经专科 广东广州 510120）
【摘要】目的：研究骨髓间充质干细胞（MSCs）治疗对脑炎患儿免疫炎症指标的影响及临床疗效分析。方法：选取本科室收治的18例病毒性脑炎患儿作为研究对象，予MSCs治疗，观察MSCs治疗后的临床疗效及治疗前后患儿外周血淋巴细胞亚群CD19+、CD20+及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达情况。结果：与治疗前相比，MSCs治疗后外周血B淋巴细胞CD19+、CD20+比例及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平明显降低（P＜0.05）。18例病毒性脑炎患儿经MSCs治疗后，其中15例症状改善，3例症状无明显改善。结论：骨髓间充质干细胞能有效调节病毒性脑炎患儿外周血B淋巴细胞亚群及炎症因子水平并改善临床症状，是治疗病毒性脑炎的一种有效治疗方法。
【关键词】骨髓间充质干细胞；病毒性脑炎；免疫炎症
【中图分类号】R725.6 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）33-0017-03
Effect of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells on Immune Indices of encephalitis and Clinical Efficacy
Zhou Xiaolin, Ou Rongqiong.
Department of Children’s Neurology，the Memorial Hospital of Sun Yat-sen University，Guangzhou 510120，China
【Abstract】Objective To study the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) transplantation on the immune indexes of viral encephalitis diseases and its clinical efficacy. Methods Eighteen patients with viral encephalitis admitted to our department were selected and treated with MSCs. The clinical efficacy of MSCs after treatment and the expression of CD19+, CD20+ , IL-1β and TNF-α in peripheral blood of children before and after treatment were observed. Results Compared with before treatment, the expression of CD19+, CD20+ and inflammatory factors IL-1β and TNF-α in peripheral blood were significantly decreased after MSCs treatment (P<0.05). Among those 18 patients,15 enjoyed good results and 3 had non-effective results. Conclusion Bone marrow mesenchymal stem cells can effectively regulate the peripheral blood B lymphocyte subsets and inflammatory factors in children with viral encephalitis and improve clinical symptoms. It is an effective treatment for viral encephalitis.
【Key words】Bone marrow mesenchymal stem cells; Viral encephalitis; Immune inflammation
儿童病毒性脑炎是由各种病毒感染引起的中枢神经系统感染疾病。病毒性脑炎患儿脑部存在明显炎症改变，引起神经元和或神经胶质细胞的变性、坏死。除了病毒感染对神经系统产生损害外，病毒性脑炎患儿机体内还会产生强烈的免疫炎症反应加重脑部损伤。病毒性脑炎，尤其是重症病毒性脑炎，如果治疗不及时预后较差，致残率高，给家庭、社会造成很重的负担。近年来干细胞的多种治疗功能被人们发现和认识，干细胞治疗成为治疗神经系统疾病的热点。骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，MSCs）是骨髓中的一种干细胞，研究发现MSCs具有调节免疫炎症和保护神经的作用[1]。MSCs具有自我增殖和多向分化能力，易于体外培养和扩增，具有较低的免疫原性，国内外已有不少应用骨髓问充质干细胞治疗神经损伤的研究。本文就MSCs对病毒性脑炎患儿免疫炎症指标的影响及临床疗效做初步探索。
1.资料与方法
1.1 一般资料
选取2017年7月—2018年8月中山大学孙逸仙纪念医院小儿神经专科住院部收治的18例病毒性脑炎患儿作为研究对象。其中男10例，女8例，年龄1～7岁，平均年龄（2.56±2.48）岁。本研究经医院伦理会批准。纳入标准：所有入组患儿均符合《诸福棠实用儿科学》（第8版，人民卫生出版社）及《儿科学》（第8版，人民卫生出版社）关于小儿病毒性脑炎的诊断标准。患儿家属知情并同意参与该研究；排除标准：合并其他神经系统疾病如脑瘫、代谢性脑病、癫痫，伴其他严重感染性疾病、重度营养不良、免疫异常等。
1.2 方法
18例病毒性脑炎患儿常规接受治疗，具体包括抗感染、降温、止惊、降低颅内压、补液、维持水电解质平衡、营养神经药物等；在此基础上加用MSCs进行治疗。MSCs10×106/次，静脉注射，1次/周，共4次。所有MSCs均由本院生物治疗中心采集、培养、冻存，所有标本在注射前均经过严格细胞学鉴定，除外感染、恶性病变等情况，符合使用标准。
1.3 观察指标
MSCs治疗前后所有病毒性脑炎患儿抽取外周血进行免疫炎症指标检测。淋巴细胞亚群CD19+、CD20+B细胞采用FACSCalibur型流式细胞仪（美国BD公司）检测；外周血炎症因子IL-1β、TNF-α的浓度采用流式荧光技术（Luminex multiplex）检测。比较MSCs治疗前后患儿外周血淋巴细胞亚群和炎症因子的表达水平。
1.4 统计学方法
实验数据处理采用SPSS21.0软件分析，计量资料以（x-±s）表示，两组间比较采用t检验，P＜0.05 表示差异具有统计学意义。
2.结果
2.1 临床疗效
18例病毒性脑炎患儿经MSCs治疗后，其中15例症状改善，3例症状无明显改善。
2.2 MSCs治疗前后淋巴细胞亚群CD19+、CD20+B细胞表达水平的比较
18例脑炎患儿经MSCs治疗后，外周血CD19+、CD20+B细胞表达水平较治疗前明显降低（P＜0.05），见表1。
3.讨论
脑炎是中枢神经系统常见的神经炎症性疾病，免疫炎症改变错综复杂，B细胞免疫在其中起着重要的作用。B细胞在各种自身免疫性神经疾病的发病机制中起着基础性作用，B细胞是T淋巴细胞的抗原呈递细胞，除了向T细胞呈递抗原外，B细胞也是调节性细胞因子的主要来源。CD19是一种穿膜糖蛋白，它是免疫球蛋白超家族成员之一，在B淋巴细胞的发育、活化和分化过程中起着重要作用。CD20+是B淋巴细胞特异性膜表面分化抗原，是一种跨膜蛋白，对B细胞的增殖分化起调节作用[2，3]。本实验研究发现，小儿病毒性脑炎外周血CD19+B细胞和CD20+B细胞比例升高，提示B淋巴细胞过度活化，体内免疫功能亢进。IL-1家族是一类蛋白质家族，主要由活化的单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、中性粒细胞等产生。有研究表明病毒性脑炎患儿脑脊液和血浆中IL-1β、IL-6的含量均明显升高，并且可破坏血脑屏障，进入大脑加重神经系统的损害，说明IL-1β介导了脑组织免疫炎症损伤过程[4]。TNF-α是一种很重要的促炎因子，在中枢神经系统炎症反应时可能起着加重脑组织损伤的作用。有学者发现病毒性脑炎患儿机体中TNF-α表达明显升高，异常激活的TNF-α可引发神经细胞、内皮细胞甚至胶质细胞凋亡，及钙超载和自由基过量产生亦可诱导细胞凋亡[5]。此外，TNF-α在脑炎急性期的应急反应中也起着重要的作用，可加重机体病情。这些研究说明IL-1β、TNF-α等炎性因子含量的变化与病毒性脑炎的预后紧密相关。
小儿病毒性脑炎发展快，病情复杂，尤其是重症病毒性脑炎，常规治疗效果不理想，常常造成不同程度的并发症和后遗症。近年来细胞疗法成为神经系统疾病治疗的一个新领域。MSCs的免疫调节功能是治疗神经系统免疫炎症性疾病的基础[6]。本实验小组前期研究发现MSCs能抑制EAE大鼠动物模型炎症反应，在临床上应用MSCs静脉输注治疗多名多发性硬化患儿，在改善患儿运动功能、感觉障碍、延长疾病缓解期，减少复发等方面均取得了明显的效果，说明MSCs发挥了良好的神经免疫保护作用。虽然MSCs修复神经损伤的机制尚未明确，但研究证明MSCs可以分化成为神经元样细胞，能够经血管内给药后迁移到损伤部位，并且可通过血脑屏障进入中枢神经系统发挥重要作用[7]。另一些学者认为MSCs可分泌出一系列强有力的旁分泌作用因子，通过提供营养支持、抑制炎症和调节免疫细胞功能来促进组织修复[8]。我们前期研究也发现MSCs在体外细胞实验中能抑制BV2小胶质细胞的炎症反应，发挥抗炎作用[9]。本实验研究发现，MSCs治疗小儿病毒性脑炎有效率高达83.3%，患儿应用MSCs，治疗后临床症状得到明显改善。与治疗前相比，MSCs治疗后患儿外周血B淋巴细胞CD19+、CD20+比例及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达水平明显降低（P＜0.05）。这提示MSCs可能通过抑制B淋巴细胞及炎症因子的免疫功能调节神经系统免疫炎症反应，发挥神经保护作用。
综上所述，B淋巴细胞过度活化及炎症因子释放可能促进病毒性脑炎患儿的病情发展，外周血CD19+B细胞和CD20+B细胞及炎症因子IL-1β、TNF-α可作为免疫炎症功能及病情变化评估的指标，临床医师在治疗过程中应重视。MSCs输注作为有效的免疫炎症调节及神经保护的治疗手段，临床疗效明确，且培养简单、应用方便，在临床治疗神经系统免疫炎症性疾病中有着良好的前景。
【参考文献】
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论文作者:周小琳,欧榕琼
论文发表刊物:《心理医生》2018年33期
论文发表时间:2018/12/6
标签：脑炎论文; 炎症论文; 患儿论文; 细胞论文; 免疫论文; 淋巴细胞论文; 因子论文; 《心理医生》2018年33期 论文;