周李学[1]2016年在《补肾活血汤促进兔激素性股骨头缺血坏死修复机制的研究》文中研究说明目的：通过补肾活血汤对激素性股骨头缺血坏死兔模型的干预,观察其对股骨头内主要成分含量、骨生物力学的影响,并检测骨组织中wnt/β-catenin信号通路上成骨和成脂相关因子基因和蛋白的表达,由此来探讨补肾活血汤防治激素性股骨头缺坏死兔模型的机制。方法：6月龄新西兰大白兔104只,随机分成空白组26只,造模组78只。造模组采用贺氏造模法建立激素性股骨头缺血坏死兔模型,经HE染色进行模型鉴定。将造模成功的53只大白兔,随机分成模型组27只和治疗组26只。鉴定造模成功1周后,3组动物进行灌胃,治疗组用补肾活血汤5.05 g/kg/d,每天分早晚两次在相同时间灌胃,连续8周,模型组和空白组采用等量的生理盐水进行灌胃,时间一致。在干预满6周和8周时,分别处死一半兔子,取右侧股骨头检测生物力学指标(弹性模量、最大载荷、应变能力)和股骨头主要成分含量(钙和羟脯氨酸)。用RT-PCR和Western Blot方法检测左侧股骨头Wnt/p-catenin信号通路上成骨和成脂相关因子的基因和蛋白表达。比较蛋白同组间6周和8周时,3组间6周和3组间8周时以上各指标的变化与联系；比较基因6周时3组间的变化。结果：1光镜观察空白组软骨层较厚,软骨细胞数量正常；骨小梁完整,排列规则,形态正常;偶见空骨陷窝；骨髓腔内造血细胞丰富,脂肪细胞较少。模型组软骨细胞大量减少、软骨层变薄甚至缺损；骨髓腔内填充大量的脂肪细胞,脂肪细胞增大或互相融合成大泡；骨髓造血细胞减少,部分造血细胞核碎裂、核溶解,部分骨细胞固缩或消失、骨陷窝空虚多见;骨小梁变细、稀疏、连续性中断、散乱,部分骨小梁出现坏死。2空骨陷窝率与模型组相比,空白组空骨陷窝率较低,为(10.06±0.13)%；模型组明显增高,为(29.68±1.23)%；两者有显着性差异P<0.01。3股骨头主要成分含量检测3.1 骨羟脯氨酸含量：6周与8周比较,空白组、模型组、治疗组叁组间均无差异(P>0.05)。6周、8周时的趋势：空白组>治疗组>模型组。8周和6周比较,空白组、治疗组明显增高,模型组略有增高。其中,空白组与模型组比较,6周、8周都有统计学意义(P<0.05)；模型组与治疗组比较,6周有统计学意义(P<0.05),8周有显着的统计学意义(P<0.01)。其余各组间无差异。3.2骨钙含量：6周与8周比较,空白组、治疗组组间均无差异(P>0.05),模型组间有统计学意义(P<0.05)。6周和8周趋势：空白组>治疗组>模型组；空白组和治疗组明显增高,模型组明显降低。空白组与模型组比较,6周(P<0.01)、8周(P<0.05)有统计学意义；模型组与治疗组比较,6周(P<0.05)、8周(P<0.01)有统计学意义。4股骨头生物力学检测4.1 骨材料力学指标：弹性模量比较6周、8周趋势：空白组>治疗组>模型组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。6周和8周比较,模型组有统计学意义(P<0.05)。6周时,空白组与模型组、模型组与治疗组比较,均有统计学意义(P<0.05)。8周时,空白组与模型组比较,有统计学意义(P<0.05)：模型组与治疗组比较,有显着统计学意义(P<0.01)4.2骨结构力学指标：应变能力6周时：空白组>治疗组>模型组,组间差异有显着统计学意义(P<0.01)；8周时：空白组>治疗组>模型组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。其中,空白组与模型组比较,6周、8周有显着的统计学意义(P<0.01);模型组与治疗组比较,6周、8周有统计学意义(P<0.05)。6周和8周比较,空白组明显增高,模型组略增高,治疗组略降低。最大载荷值6周和8周趋势：治疗组>模型组、空白组>模型组,组间差异均有显着的统计学意义(P<0.01)；空白组和治疗组明显增高,模型组明显降低；模型组间有统计学意义(P<0.05)。空白组与模型组比较,6周(P<0.01)、8周(P<0.05)有统计学意义；治疗组与模型组比较,6周(P<0.05)、8周(P<0.01)有统计学意义。5 Wnt/p-catenin信号通路相关蛋白的表达：①和模型组相比,空白组和治疗组中成骨相关蛋白Wnt11、sFRP2、FZD6、Ror2的表达升高,随时间延长增强效果呈略升趋势；、vnt9a的表达下降,随时间延长呈下降趋势。sFRP3只在8周时空白组和模型组间统计学比较有意义。sFRP2到8周时组间才有意义。wnt11和wnt9a只在6周时组间有意义,8周则没有意义。FZD6和Ror26周和8周时组间统计学都有意义。②和模型组相比,空白组和治疗组中成脂相关蛋白DKK1、sFRP4、Wnt5b的表达明显下降,、wnt10b、 (3-catenin的表达升高。Wnt10b到8周时组间才有意义。P-catenin和sFRP4只在6周时组间有意义。在6周和8周时,DKK-1和Wnt5b组间都有意义,Wnt1无意义。6 Wnt/β-catenin信号通路相关基因的表达：①6周时和模型组相比,空白组和治疗组中成骨相关因子Wnt11、sFRP2、Ror2和FZD6的表达明显升高,wnt9a的表达明显下降；sFRP3组间比较无意义。②6周时和模型组相比,空白组和治疗组中成脂相关基因DKK-1、sFRP5、Wntl、Wnt5b的表达明显降低,wnt10b、β-catenin的表达升高。sFRP4组间比较无意义。结论1 补肾活血汤能调节体内钙磷代谢紊乱状态,加速基质合成,提高股骨头的强度；增强骨的应变能力和最大载荷值,提高骨的弹性模量,改善骨质疏松状态,使骨在结构力学和材料力学方面得到了重塑与稳定。2补肾活血汤调控股骨头内骨髓间充质干细胞成骨-成脂分化的机制主要是通过增强Wnt/p-catenin信号通路中成骨因子Wnt11、sFRP2、Ror2和FZD6的基因和蛋白表达,抑带wnt9a的表达；同时抑制成脂因子DKK-1、Wnt5b的表达,促进wnt10b和(3-catenin的表达,从而抑制骨髓基质干细胞向脂肪细胞转化,促进其向成骨细胞转化,加快坏死骨组织修复。
魏迎辰[2]2014年在《温阳补肾方治疗兔激素性股骨头坏死的实验研究》文中认为1目的通过温阳补肾方治疗兔激素性股骨头坏死的研究,观察血清OPG、BGP、PINP,及股骨头组织中VEGF、TGF-β1的表达。通过光学显微镜及透射电镜来观察股骨头组织病理改变及细胞的超微结构,从而探讨温阳补肾方防治激素性股骨头坏死的作用机制。2方法2.1新西兰兔随机分为正常组与模型组,模型组运用改进马血清联合甲强龙造模法,建立激素性股骨头坏死模型,检测相关指标鉴定模型。2.2造模成功后将模型组再次分为四组：模型组、低、中、高剂量治疗组,治疗组用温阳补肾方进行灌胃4周、8周、12周。2.34周、8周、12周后,分别取动物血清及股骨头组织冻存待测。2.4用酶联免疫法检测血清OPG、BGP、PINP的含量。2.5用HE染色法进行组织形态学观察及空骨陷窝率的检测。2.6根据血清OPG、BGP、PINP的含量对比,组织形态学观察及空骨陷窝率的比较,选择变化最明显的时间点,对该时间点所冻存的股骨头组织运用透射电镜进行细胞超微结构观察。运用Western-blot法检测股骨头组织中VEGF、TGF-β1的表达。3结果3.1模型鉴定造模完成后,模型组动物与正常组对比：大体外观、股骨头组织形态及空骨陷窝率都有明显差异,提示造模成功。3.2HE染色结果4周、8周、12周模型组与正常组比较：股骨头组织形态改变明显差异,空骨陷窝率差异显着(P<0.01)。各时间点内,温阳补肾方各剂量治疗组空骨陷窝与模型组相比都明显降低(P<0.01)。3.3酶联免疫法检测血清OPG、BGP、PINP含量4周、8周、12周模型组OPG、 BGP、PINP含量明显低于正常组(P<0.01)。4周时：低剂量治疗组与模型组比较BGP、PINP含量无显着差异(P>0.05),OPG含量有所升高(P<0.05)。中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量明显升高(P<0.01)。8周时：低、中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量有明显升高(P<0.01)。12周时：低、中、高剂量治疗组与模型组比较OPG、BGP、PINP含量有明显升高(P<0.01)。各时间点内,低、中剂量治疗组对比,OPG、BGP、PINP含量有差异(P<0.05)。各时间点内,中、高剂量治疗组对比,OPG、BGP、PINP含量无明显差异(P>0.05),除第12周时,中剂量与高剂量治疗组OPG有明显差异(P<0.01)。3.4透射电镜观察模型组与正常组对比,软骨细胞及骨细胞超微结构对比差异明显。与模型组相比温阳补肾方各剂量治疗组细胞结构都有所好转。3.5Western-blot检测骨组织中VEGF、TGF-β1的表达模型组VEGF、TGF-β1的表达明显低于正常组(P<0.01)。各剂量治疗组VEGF、TGF-β1的表达明显高于模型组(P<0.01)。中剂量治疗组VEGF、TGF-β1的表达高于低剂量治疗组(P<0.05)。而中、高剂量治疗组对比无明显差异(P>0.05)。4结论4.1温阳补肾方促进血清OPG、BGP、PINP含量增加,提示其可以提高成骨细胞活性,促进骨生长。4.2温阳补肾方抑制骨髓内脂肪细胞肥大坏死,抑制脂质在髓腔内大量堆积。4.3温阳补肾方提高坏死股骨头组织中VEGF的表达,促进血管新生,从而增加股骨头坏死区的血供。4.4温阳补肾方中、高剂量组效果明显优于低剂量组,中、高剂量组效果相当。
张文进[3]2016年在《中药活骨注射液在兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表达情况的实验研究》文中提出研究目的：本研究通过动物实验的方法,从细胞分子水平,研究中药活骨注射液对VEGF、bFGF、IGF-1、OPG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3表达的影响,探讨活骨注射液治疗股骨头缺血性坏死的作用机制,为活骨注射液治疗股骨头缺血性坏死提供理论依据。研究方法：随机分为两组,即空白组(30只)、模型组(90只)。模型组行兔股骨头坏死动物造模后再随机分为3组：盐水组、对照组、实验组各30只动物。空白组正常饲养,不给予任何药物治疗。盐水组给予0.9%生理盐水0.70ml/次,每叁日一次髋关节腔灌注。对照组给予冠心宁注射液每叁日一次髋关节灌注0.70ml/次。实验组给予活骨注射液每叁日一次髋关节灌注,剂量0.70ml/次。造模术后两周开始治疗,各组按1、3、6、9、12周时间点分批处死动物,每批每组6只,进行检测。实验一,我们采用免疫组化、Real-time PCR及Western blot叁种方法检测兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1蛋白的表达情况；实验二,我们采用Real-time PCR及Western blot两种方法检测兔股骨头缺血性坏死修复过程中蛋白及mRNA的表达情况及OPG/RANKL比值；实验叁,我们采用Real-time PCR及Western blot两种方法检测兔股骨头缺血性坏死修复过程中凋亡调节基因bcl-2、bax、Caspase-3的表达情况。结果：实验一1.VEGF的表达空白组及盐水组在各个阶段表达量无显着变化；对照组随着给药时间的延长,表达逐渐增强,且有统计学差异(P<0.05或P<0.01)；实验组随着用药时间的延长,表达能持续上调且有统计学差异(P<0.01),并且表达量相比对照组有明显增多,但无统计学差异。2.bFGF的表达空白组在各个阶段表达量无明显变化；盐水组在各时间点上与空白组比较无差异：对照组随着给药时间的延长,表达能持续上调,并有统计学差异(P<0.05或P<0.01),且表达量能持续稳定增高至第12周；实验组随着时间的延长,表达能持续上调,与空白及盐水组有显着性差异(P<0.0 1),且表达量也能持续稳定增高至第12周,且在每一时间点相对对照组有明显增多,并有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。3.IGF-1的表达空白组在各个阶段表达量无明显变化；盐水组在第3周时表现出高表达,且有明显统计学差异(P<0.01),随后随着用药时间的延长,表达量逐渐下降,并逐渐低于正常水平；对照组随着给药时间延长,表达逐渐上调,且有统计学差异(P<0.05或P<0.01),但到第6周以后表达量基本稳定无显着增多；实验组随着给药时间的延长,表达能持续显着增强,与空白及盐水组有显着性差异(P<0.01),且表达量能够持续稳定增高至第1 2周,并与对照组有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。实验二OPG、RANKL及OPG/RANKL比值空白及盐水组OPG、RANKL和mRNA的表达均无明显变化,也无统计学意义；OPG/RANKL比值也始终无明显改变。对照组随着给药时间的延长,表达能明显升高,到第9周时显着增高,且有明显统计学差异(P<0.01),但到第12周时表达量虽略有升高,但与空白及盐水组比较却无明显差异(P>0.05)：RANKL蛋白和mRNA在第1周时表达也明显升高,且有统计学差异(P<0.05或P<0.01),随着用药时间的延长表达量逐渐升高,到第12周时达到一个相对高点,并有显着性差异(P<0.01)；OPG/RANKL比值随着用药时间的延长能够逐渐增高,并有统计学差异(P<0.01)。实验组随着用药时间的延长OPG蛋白量及mRNA表达逐渐升高,并有显着性差异(P<0.01),并能持续稳定升高至第12周,且表达量在每一时间点都高于对照组,并有统计学差异(P<0.01)。：而RANKL蛋白和mRNA表达虽随着用药时间的延长,表达量逐渐升高,但到第6周时已与空白及盐水组比较有显着性差异(P<0.01),且能够持续稳定高表达至第12周,但表达量上却无显着变化；其OPG/RANKL比值也能逐渐增高,且在每一时间点上均始终高于空白、盐水处理及对照组,并有统计学差异(P<0.05或P<0.01)。实验叁1.bcl-2、bax表达及bcl-2/bax比值空白组bcl-2在各个阶段表达量无变化；盐水组在每一时间点上与空白组比较无差异(P>0.05)；对照组随着给药时间的延长表达能持续上调,与空白及盐水组比较有明显统计学差异(P<0.01)；实验组随着给药时间的延长表达能持续上调,与空白及盐水组比较有明显统计学差异(P<0.01),且每一时间点上表达量都比对照组要高。空白组bax在各个阶段表达量无变化；盐水组在每一时间点上与空白组比较无差异(P>0.05)；对照组随着给药时间的延长表达能持续下调,与空白及盐水组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01)；实验组也能随着给药时间的延长,表达持续下调,与空白及盐水组比较有显着性差异(P<0.01),且在每一时间点上表达量较对照组要低,并有统计学差异(P<0.05)。空白及盐水组bcl-2/bax比值无变化；对照及实验组bcl-2/bax比值在每一时间点都逐渐增高,且有空白及盐水组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01),实验组在每一时间点的bcl-2/bax比值也较对照组有显着提高,并有统计学差异(P<0.05)。2.Caspase-3的表达空白组在各个阶段表达量无变化；盐水组在给药第1、3周时且与空白组比较有明显差异(P<0.05或P<0.01),随着给药时间的延长,其表达量逐渐减低至第12周,但与空白组比较无差异(P>0.05)；对照组随着给药时间的延长,其表达持续下调,且有显着性差异(P<0.01),表达量也表现出逐渐减低；实验组在用药第1、3周时也出现高表达,与空白组比较有显着性差异(P<0.01),到第6周后表达量逐渐减低并逐渐低于正常水平,且与空白组比较有显着性降低(P<0.01),随着用药时间的延长,表达量能够持续显着降低至第12周,且明显低于正常水平,并与空白及盐水组比较有显着性差异(P<0.01),相同时间点较对照组有明显减低。结论：1.活骨注射液能够增强兔坏死股骨头局部VEGF、bFGF和IGF-1的表达使血管再生增强,有利于缺血性股骨头坏死的修复。2.活骨注射液能够上调兔坏死股骨头的OPG表达,同样上调RANKL表达,稳定并升高OPG/RANKL比值。有利于促进坏死骨的吸收,改善了骨代谢,使骨代谢恢复一个动态平衡,促进了骨修复及新骨形成。OPG/RANKL比值可能是活骨注射液的药物作用靶点之一。3.活骨注射液通过上调兔坏死股骨头的bcl-2表达,下调bax及Caspase-3表达,升高bcl-2/bax比值,从而能够调控股骨头坏死局部细胞的凋亡,使骨细胞存活时间延长,并能抑制破骨细胞的活性及功能,促进骨的修复和再生。
齐振熙, 曹阳[4]2002年在《不同治法防治激素性股骨头缺血性坏死的实验研究》文中认为目的 比较不同治法对激素性股骨头缺血性坏死的防治效果。方法 实验动物激素造模 ,分别喂服活血化瘀、渗湿化痰和补肾壮骨中药或自来水 ,6周处死取材 ,通过组织病理学、骨生化、血液生化及流变学等指标的观测 ,进行分析比较。结果 活血化瘀中药可抑制激素性股骨头缺血性坏死的发生和发展 ,较渗湿化痰和补肾壮骨中药的作用全面、显着。结论 活血化瘀中药可对抗激素的作用 ,有效防治股骨头的坏死
王培荣[5]2013年在《通过观察ET、BGP指标变化研究通络补肾法治疗激素性股骨头缺血性坏死》文中认为目的：通过观察ET、BGP指标变化研究通络补肾法治疗激素性股骨头缺血性坏死,为通络补肾法防治激素性股骨头缺血性坏死提供理论依据。方法：将96只日本大耳兔随机分为正常组(24只)和造模组(72只),造模完成后,每组随机抽取8只,检测造模是否成功,造模成功后再将造模组随机分为活血通络汤高剂量组、中剂量组、低剂量组及模型组。按贺西京造模法造模,治疗组按高、中、低剂量分别灌服活血通络汤混悬液,模型组和正常组均灌服等量蒸馏水。分别于给药后第6周、第8周进行血浆ET、BGP和股骨头BGP相关数据的检测与分析,同时观察股骨头病理切片的骨小梁、骨小粱中的骨细胞、空骨陷窝、骨髓中造血细胞、脂肪细胞,以及电镜观察股骨头组织空骨陷窝数,求空骨陷窝率。结果：给药后第6周：与正常组比较,模型组血浆ET含量升高(P<0.05),血浆BGP含量、股骨头BGP免疫组化1ID值明显降低(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显升高(P<0.01)；与模型组比较,高、中、低剂量组血浆ET含量降低(P<0.05),血浆BGP含量、股骨头BGP免疫组化IOD值升高(P<0.05),股骨头空骨陷窝率降低(P<0.05)；高、中、低剂量组间比较差异显着(P<0.05)。给药后第8周：与正常组比较,模型组血浆ET含量升高(P<0.05),血浆BGP含量、股骨头BGP免疫组化IOD值明显降低(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显升高(P<0.01)：与模型组比较,高、中、低剂量组血浆ET含量降低(P<0.05),血浆BGP含量、股骨头BGP免疫组化工OD值明显升高(P<0.01),股骨头空骨陷窝率明显降低(P<0.01);高、中、低剂量组间比较差异显着(P<0.05)。第6周与第8周比较：高剂量组的血浆ET、血浆BGP和中剂量组的血浆BGP、股骨头BGP、空骨陷窝率以及低剂量组的血浆ET、空骨陷窝率差异显着(P<0.05)；高剂量组的股骨头BGP、空骨陷窝率和低剂量组的血浆BGP、股骨头BGP差异极显着(P<0.01)；中剂量组的血浆ET无显着差异(P>0.05)。结论：活血通络汤能够明显降低SANFH模型家兔的血浆ET含量和空骨陷窝率,能够明显升高血浆和股骨头组织的BGP含量,从而促进SANFH模型家兔坏死骨的修复和新骨的形成,对激素性股骨头缺血性坏死有明显的防治作用。
吴敏瑞[6]2014年在《羟基红花黄色素A促进兔激素性股骨头缺血性坏死修复机制的研究》文中认为目的：观察活血化瘀中药红花主要有效成分羟基红花黄色素A对激素诱导兔股骨头缺血性坏死的修复作用,从MAPK信号通路探讨其作用机制,为防治激素性股骨头缺血性坏死提供理论依据。方法：1.采用贺氏造模法,通过对新西兰兔臀肌注射醋酸泼尼松龙建立兔激素性股骨头缺血性坏死模型,并通过透射电镜观察、组织形态学观察、空骨陷窝率计算等方面进行鉴定。2.造模成功后,将实验动物随机分为5组,分别采用不同方法进行干预。空白组：正常饲料喂养；对照组A：髓芯减压+生理盐水50μl局部注射；对照组B：耳缘静脉注射生理盐水2ml/d；治疗组A：髓芯减压+羟基红花黄色素A50μl局部注射；治疗组B：耳缘静脉注射羟基红花黄色素A2ml/d。3.上述5组动物于干预2周后取出股骨头,行透射电镜、组织形态学观察、空骨陷窝率计算、ALP检测、PCR法检测I型胶原表达、免疫组化法检测MAPK信号通路JNK的表达、Western blot法对MAPK信号通路相关蛋白ERK1、ERK2、P38的表达进行分析检测。结果：1.光镜观察：空白组股骨头软骨层较厚,成骨活跃,骨小梁排列较规则,骨细胞清晰可见,核较大,多位于中央,偶见骨陷窝空虚,髓腔内可见增生活跃的骨髓组织。对照组股骨头软骨层较薄,软骨下骨小梁变细,结构紊乱,部分有断裂现象,骨陷窝空虚现象明显增多,骨细胞减少,脂肪细胞增多,且髓腔几乎完全为脂肪组织代替。治疗组股骨头软骨层明显增厚,软骨下骨小梁变粗,排列较规则,骨细胞增生活跃,核大居中,脂肪细胞减少、变小,骨陷窝空虚现象明显减少,髓腔内可见增生活跃的骨髓组织逐渐取代脂肪组织。2.电镜超微结构观察：空白组骨细胞形态基本正常,胞内细胞器比较完整,胞浆丰富,未见明显脂滴；对照组骨细胞结构模糊不清,数量减少,多发生退变坏死,胞核固缩,骨细胞内有大小不等、多少不一的脂滴出现,胞核被挤向一侧；治疗组骨组织表面有一层梭形成骨细胞覆盖,骨细胞细小,核仁可见,浆少,有少量线粒体及粗面内质网、溶酶体,个别骨细胞结构模糊不清,细胞内脂滴明显减少或消失。3.空骨陷窝率计算：空白组空骨陷窝率较低,为14.38%；对照组空骨陷窝率明显增高,A高达26.43%、B高达25.47%；治疗组空骨陷窝率与对照组相比明显降低,A为14.63%、B为16.32%。4.ALP检测：对照组比空白组ALP含量明显降低,而羟基红花黄色素A治疗组比对照组含量明显升高,且治疗组中A与B相比有差异。与对照组A、B相比,治疗组A、B的ALP含量均有明显升高。5. RT-PCR检测：对照组比空白组I型胶原表达均有明显下调,而羟基红花黄色素A治疗组比对照组I型胶原表达均有明显升高,且治疗组中A与B相比无显着差异。与对照组A、B相比,治疗组A、B的I型胶原表达均有明显升高。6.免疫组化：对照组、治疗组JNK表达比空白组均有上调,而对照组上调更加明显。治疗组与对照组相比JNK表达均有显着降低。7. MAPK信号转导相关蛋白表达：通过Western blot法对MAPK信号通路相关蛋白ERK1、ERK2、P38的表达进行分析检测,发现对照组与空白组相比,P-ERK1、P-ERK2的表达明显下调,而P-P38的表达则明显上升。治疗组与对照组相比,P-ERK1、P-ERK2的表达均明显上升,而P-P38的表达则明显下降。同时P-ERK1、P-ERK2的表达在治疗组A、B之间差异显着,而P-P38蛋白表达差异不明显。结论：1.通过对股骨头组织进行透射电镜、组织形态学观察、空骨陷窝率计算、ALP检测、以及I型胶原表达的检测,表明羟基红花黄色素A可促进BMSCs的成骨分化,有利于坏死股骨头骨组织的修复。2.通过实验发现髓芯减压联合局部注射HSYA比单纯耳缘静脉注射HSYA对坏死股骨头的修复作用更强,表明两者联合治疗激素性股骨头缺血性坏死可能与通过减轻骨内压,改善局部血液循环同时通过活血化瘀,促进BMSCs的成骨分化,加快破损骨组织修复有关。3.羟基红花黄色素A对激素性股骨头缺血性坏死的治疗作用可能是通过激活MAPK信号通路,调节相关因子ERK1、ERK2、JNK、P38的表达,从而达到抑制骨髓基质细胞向脂肪细胞转化促进其向成骨细胞转化实现的。
曹阳[7]2001年在《不同治法防治激素性股骨头缺血性坏死的实验研究》文中进行了进一步梳理目的：通过观察中药对激素性股骨头缺血性坏死相关指标的影响，比较活血化瘀、渗湿化痰、补肾壮骨叁种治法的防治效果，探讨发病机制和中药作用机理，为临床提供最有效的治法和方药。 方法：40只健康成年新西兰大白兔，随机分为八组，每组5只。A组为正常对照组；B组为激素对照组，每周二次臀肌注射7.5mg/kg醋酸氢化泼尼松，经6周诱导出激素性股骨头缺血性坏死的早期模型；C组为活血预防组，造模同时服用活血方；D组为渗温预防组，造模同时服用渗湿方；E组为补肾预防组，造模同时服用补肾方，上述5组于6周后处死取材。F组为活血治疗组，造模，6周后服用活血方；G组为渗湿治疗组，造模，6周后服用渗湿方；H组为补肾治疗组，造模，6周后服用补肾方，上述3组于12周后处死取材。 结果：①大体观察：A组全身状况明显好于其它各组，体重逐渐增加，B组体重一直下降，C、D、E组全身状况好于B组，体重后期回升，F、G、H组用药后全身状况改善，体重回升。②组织病理学观察：A组正常，B组空缺骨陷窝数明显增多，骨小梁细疏，髓腔脂肪细胞增大、增多，肝细胞肿大脂肪变，结构不清，余组病变较B组减轻，空缺骨陷窝数C、F组明显低于B组（P＜0.01）。③电镜观察：A组正常，B组骨细胞数量减少，退变固缩或出现脂滴，成骨细胞减少，髓内脂肪细胞增大，余组病变较B组为轻，以C、F组最接近A 组。④骨生｛匕检测：B组骨h、HOM、Ca／HOP、HOWHOP明显低 于各 组，其中C、F、H组较高（P＜O．001－P＜O．01）．、⑤血脂检坝：B组 TC、TG明显高于各组，其中 D、G、F组较低（P＜0．001－P＜0．05）。－。⑤血清钙磷检测：B组钙、钙磷乘积明显低于各组，其中C、F、H组 较高P＜0．0OI斗＜0．of）。①血液流变学检测：B组全血高切和低切 粘度、血浆粘度、红细胞压积明显高于各组，其中C、F、G组较低O ＜0．01一P＜0．05）。 结论：短期内大剂量使用激素，可以引起股骨头缺血性坏死，中 药活血化瘀可有效防治激素性股骨头缺血性坏死的发生和发展，其机 理如下：①改善血液高粘滞状态，降低骨内压，改善股骨头娜环； ③纠正脂肪代谢紊乱状态，降低高血脂，减少脂肪栓子的形成；③增 强骨细胞活力，预防脂肪的异常堆积，防止和减轻骨细胞坏死；④提 高成骨细胞活性，促进骨基质的生成和钙磷的沉积，防止和减轻骨质 疏松；①提高机体免疫力，改善整体状态，保护肝脏。
张弛[8]2006年在《活血通络法防治激素性股骨头坏死的实验研究》文中认为目的：研究活血通络法防治激素性股骨头坏死的作用机制，为活血通络法防治激素性股骨头坏死提供理论依据。 方法：将40只家兔随机分为活血通络方治疗组(高、中、低叁组)，模型组，空白对照组，每组8只。用糖皮质激素造成激素性股骨头坏死模型，治疗组按高中低剂量分别灌服活血通络汤混悬液，模型组和空白对照组均灌服等量蒸馏水。分别于治疗4、6、8周进行血液流变学及脂质代谢相关数据变化的观察和比较；并于第8周进行血浆血栓素B2(TXB2)、6-酮-前列腺素(6-keto-PGF1a)及股骨头空骨陷窝数观察与测定。 结果：在全血高切、中切、低切粘度、血浆粘度、总胆固醇、甘油叁酯、TXB_2及股骨头空骨陷窝率的比较上，治疗组均低于模型组(P＜0.01)；模型组明显高于空白对照组，差异显着(P＜0.01)；治疗组与对照组比较有差异，治疗组中高中低剂量组间有显着差异(P＜0.05)。在6-keto-PGF_(1a)方面，治疗组均高于模型组(P＜0.01)；模型组明显低于空白对照组，差异显着(P＜0.01)；治疗组中高中低剂量组间比较有差异(P＜0.05)，其中，高剂量组的效果最优。 结论：活血通络汤可明显降低全血粘度、血浆粘度、血脂、TXB2和股骨头空骨陷窝率，提高6-keto-PGF_(1a)从而改变股骨头的局部微循环，调节激素后脂肪在体内的转移过程，减少血管壁的受损和减少动脉硬化、抗血栓，促进坏死骨的修复和新生骨的再生，对激素性股骨头坏死有明显的防治作用。
齐振熙, 曹阳[9]2002年在《不同治法对激素性股骨头缺血坏死防治作用的比较研究》文中研究指明激素性股骨头缺血性坏死是骨科临床难治症之一。相关动物模型的实验研究表明,中药能够确实有效地阻止和逆转早期激素性股骨头缺血性坏死的发生和发展。由于目前中医界对该病认识不一,方药多样化,疗效差异大,严重阻碍了临床的推广应用。为此,本课题选择最常用、最基本的活血化瘀、渗湿化痰和补肾壮骨叁种方法来组方,利用动物模型进行不同治法防治早期激素性股骨头缺血性坏死的实验研究,客观比较不同治法、中药的防治效果,从中确立一种最佳的治法和方药,为临床有效防治激素性股骨头缺血性坏死提供理论和实验依据。
柴巍巍[10]2009年在《复阳活骨丸配合髓芯减压术对激素性股骨头坏死血磷血钙影响的实验研究》文中研究表明目的:本课题以中医理论为指导,结合现代医学手术治疗,为观察中药制剂“复阳活骨丸”配合髓芯减压术对实验动物激素性股骨头坏死血磷血钙的影响,探讨其防治股骨头坏死的作用机制。方法:实验采用健康家兔45只为研究对象,除空白对照组外,其余家兔均每周两次臀肌注射醋酸氢化泼尼松(7.5mg/kg),6周后诱导出激素性股骨头缺血性坏死的早期模型,将造模家兔随机分组。整个实验分组:空白对照组(正常组)、模型对照组(激素组)、髓芯减压组(减压组)、复阳活骨丸组(中药组)、复阳活骨丸配合髓芯减压组(中药并减压组)。造模6周后,正常组随机处死1只取材,造模组处死4只取材。治疗6周后全部处死取材,并测定家兔治疗前后的血磷血钙和钙磷乘积指标,进行分析比较。结果:①各造模家兔体重在治疗前均明显低于正常组,髓芯减压组体重治疗前较治疗后略有增加,中药治疗组体重治疗后较治疗前有所增加,以中药配合减压组增加明显;②组织病理学观察:正常组正常,激素组骨小梁细疏,髓腔脂肪细胞增大、增多,减压组、中药组、中药并减压组病变较激素组为轻,以中药并减压组较接近正常组;③血磷血钙及血磷血钙乘积检测:中药组、中药并减压组的血钙及血磷血钙乘积明显低于激素组(P<0.01),减压组与空白组相比(P>0.05),其中中药配合减压组最接近正常水平。结论:短期内大剂量使用激素,可以引起股骨头缺血性坏死,中药复阳活骨丸配合髓芯减压可有效改善股骨头微循环,保证组织的有效灌注,给骨细胞的代谢提供一个良好的环境,使其代谢产物及时得到输送,营养物质及时得到补给增强骨细胞活力;能够提高血钙浓度及其钙磷乘积,预防激素所致的骨质疏松,维持正常骨组织的力学框架,有利于血管的长入和骨细胞功能的正常发挥。防止和减轻骨细胞坏死;降低骨内压,促进骨小梁再生和修复。达到预防激素性股骨头坏死的发生和发展。
参考文献：
[1]. 补肾活血汤促进兔激素性股骨头缺血坏死修复机制的研究[D]. 周李学. 福建中医药大学. 2016
[2]. 温阳补肾方治疗兔激素性股骨头坏死的实验研究[D]. 魏迎辰. 福建中医药大学. 2014
[3]. 中药活骨注射液在兔股骨头缺血性坏死修复过程中VEGF、bFGF、IGF-1、0PG、RANKL、bcl-2、bax和caspase-3的表达情况的实验研究[D]. 张文进. 黑龙江中医药大学. 2016
[4]. 不同治法防治激素性股骨头缺血性坏死的实验研究[J]. 齐振熙, 曹阳. 中国骨伤. 2002
[5]. 通过观察ET、BGP指标变化研究通络补肾法治疗激素性股骨头缺血性坏死[D]. 王培荣. 成都中医药大学. 2013
[6]. 羟基红花黄色素A促进兔激素性股骨头缺血性坏死修复机制的研究[D]. 吴敏瑞. 福建中医药大学. 2014
[7]. 不同治法防治激素性股骨头缺血性坏死的实验研究[D]. 曹阳. 福建中医学院. 2001
[8]. 活血通络法防治激素性股骨头坏死的实验研究[D]. 张弛. 成都中医药大学. 2006
[9]. 不同治法对激素性股骨头缺血坏死防治作用的比较研究[J]. 齐振熙, 曹阳. 中国医药学报. 2002
[10]. 复阳活骨丸配合髓芯减压术对激素性股骨头坏死血磷血钙影响的实验研究[D]. 柴巍巍. 河南中医学院. 2009