李 琼 何 静
兰州市中医医院检验科 甘肃兰州 730050
摘要：目的：调查兰州地区健康人群尿沉渣中各类有形成分的生物参考范围。方法：选用2466例健康查体者，采用非离心直接尿，使用一次性定量计数板法和全自动流式细胞技术相吻合，直接计数随机尿中红细胞，白细胞及上皮细胞数量。结果：一次性定量计数板直接计数尿液有形成份参考范围：
男性：红细胞：0—5 /uL 白细胞0—10/uL 上皮细胞0--7/uL
女性：红细胞：0—11/uL 白细胞 0—20/uL 上皮细胞0—35/uL
UF-50尿液分析仪尿液有形成份参考范围：
男性：红细胞：0—8/uL 白细胞0—12/uL 上皮细胞0--6/uL
女性：红细胞：0—12/uL 白细胞 0—24/uL 上皮细胞0—36/uL
两种方法参考范围非常接近。结论：本次检测中，使用不破坏尿中有形成份的定量计数法，可提供接近真实情况的参考范围，为尿液有形成份检查的真实结果规范化，标准化和临床应用提供依据。
关键词：尿液有形成份；UF-50尿液定量分析仪；一次性计数板直接计数法
参考范围
尿液细胞成分分析是临床试验常用的分析指标，尿沉渣检验又是尿液分析的重要组成部分，对泌尿系统疾病的诊断，鉴别诊断，预后判断及群体普查具有重要意义。长期以来，尿液有形成分的检验一直依赖人工显微镜检查，随着科技的进步，尿沉渣检验向着标准化，规范化和快速化的方向不断改进和进步，因为尿液标本的特殊性，尿中有形成分发生改变，尿中有形成分形态的检验还没有十分完善的方法能满足于临床检验的要求，各种方法却各有其优缺点，但其标准化，自动化越来越重要。
在实际工作中，不同的方法在识别和计数各种有形成分时标准很不统一，参考范围也非常不一致，甚至相差胜远，由于经典的形态学镜检操作要求高，费时重复性差，不易定量报告结果和临床动态观察，所以在临床诊断和治疗预后观察疾病等方面，采用定量分析法，定量分析患者尿液中的有形成分变化情况，要比定性分析更有价值，故目前国内外正在推行一次性尿沉渣定量计数板法和使用全自动尿沉渣分析仪做尿沉渣有形成分定量分析，许多医院用一次性尿沉渣定量分析板法和全自动尿沉渣分析仪，对一些地区健康人群参考范围也有一些研究报告，报告显示，地区之间还是存在一定的差异，可能是由于检验误差导致检测结果差异，一是标本采集过程中，采集不同尿段，不同时段结果引起差异，二是检测时间与技术问题。故我们采用非离心直接尿有形成分定量计数法，以最少影响尿液中细胞成分改变的原则来计数尿液中实际存在的白细胞，红细胞，上皮细胞的数量，调查兰州地区健康人群中尿液中各类有形成分的参考范围，根据实验室自身条件建立适合自己区域的健康人群生物参考区间。
材料和方法
1：调查对象：2014年5月至10月在我院体检的健康人群，收取近其无服药史，发热，泌尿系统疾病，高血压，糖尿病，肝炎，风湿等完全性疾病，无浮肿现象，女性在非月经其内的20—60岁各年龄段的健康查体者。分析和统计有效人数2466例正常健康人随机尿液，其中男性1405例，女性1065例。
2：标本：用一次性尿杯收集体查者随机中段尿标本，要求尿量在20UL以上。
3：方法：计数板直接计数：收集中段尿，尿量在15mL以上，标本混合均匀，用一次性塑料吸管取混合尿液，滴入计数板内，自然沉淀3—5分钟，用高倍镜计数10个大方格共1UL体积尿液内红细胞数，白细胞数，上皮细胞数及管型数量，每个标本检测两次，取平均值。
4：UF-50尿液分析仪检测法：同时直接取未离心尿用UF-50尿液分析仪检测，每个标本检测两次，取平均值。
5：数据处理：所检测的尿液有形成份参数数据在被调查的人群中呈正态分布，得出中位数和生物参考区间（计数方法采用NCCLS和IFCC建议使用的统计方法，即以检测健康人群的0—95%为生物参考范围，95%上限值为基准界限值），所有检测结果采用CHISS统计软件进行统计分析（包括RrusRal—Wallis秩和检验，中位数，95%上限）
结果
2466例正常健康人随机尿液有形成份调查结果见下表1和表2：
讨论
尿液有形成份的检测在泌尿系感染中具有重要的诊断与鉴别意义是勿需置疑的，同时亦是健康体检及用药检测的重要手段之一。另外由于采集尿液标本分析，无创伤性，长期以来成为临床医生应用最普通而又十分有用的诊疗手段。
1：本次实验以正常人为调查对象，测定出尿液有形成分的数据，与全国范围内有地区差异，但差异不大，总体趋势是一致的，可能是由于实验误差导致检测结果出现地区差异，一是标本采集过程中，采集不同尿段，不同时段结果引起的差异，二是检测时间与技术问题，由于尿液中有形成分的复杂性及可变性，以及各地区之间各种原因使尿液有形成分存在地区差异，所以各实验室应根据自身条件建立适合自己的健康人群生物参考区间。
2：上述实验表明，尿液中有形成分红细胞，白细胞，上皮细胞，男女性别之间存在差异，特别是上皮细胞，女性明显多于男性，这与女性特殊的生理特点有关，一般情况下无显著意义，但当数量急剧增加，且伴有白细胞数量增多时，则考虑是否有急慢性尿道炎，但须排除来自阴道的感染。
3：尿液有形成份的检测方法较多，但基本分为三大类：显微镜检查法，干化学检查法，流式细胞仪检测尿液有形成份测定方法。显微镜检查法可分为离心法和非离心法，在确认尿液有形成份的性质方面，其金标准应该是显微镜检查法，离心镜检法可以最大浓缩尿液中各类有形成份，提高阳性率和各病理成份的检出率，但离心镜检法对尿液中有形成份的破坏和影响同时存在，实验证明离心对尿液有形成份的影响非常大，使细胞破坏，所以我们检测时为得到比较准确的参考范围，采取非离心法直接计数，实验证明不离心镜检法直接计数红细胞，白细胞，上皮细胞时，只要在计数范围达到一定量时，可较直观的反映尿液中细胞浓度。
4：全自动尿沉渣分析仪UF-50检测原理是直接对尿液标本染色后利用流式技术和电阻抗原理，以荧光，散射光和电阻抗的信号技术识别和计数红细胞，白细胞，上皮细胞，细菌，结晶，精子，酵母样细胞等，此种方法具有快速，简单且重复性好等优点。以上实验表明，UF-50测定结果高于不离心直接计数法。经镜检确定，有21例是由草酸钙结晶引起红细胞计数增高，这可能是草酸钙结晶的形态与红细胞的形态非常相似有关，也有细菌和真菌引起红细胞增高，细菌重叠计数红细胞增高，而真菌细胞的体积与红细胞差别不是很大，且染色后真菌的荧光强度和前向散射光的强度较低，检测结果的分布区域与红细胞分布区域有交叉范围，所以可引起红细胞增高，经镜检确认有一些小圆上皮细胞，扁平上皮细胞，滴虫，脂肪滴等因素，导致UF-50尿液分析仪测定尿白细胞结果偏高，这些物质与白细胞非常接近，检测结果的分布区域或与白细胞分布区域存在交叉范围，所以在UF-50尿液分析仪检测的结果，如有报警信息的标本须以镜检复判为标准。
5：使用显微镜镜检时，对放大400倍的高倍镜来说，景深远远小于计数池高度，致使镜下同一视野范围内的有形成分不能同时看清楚，非常容易造成漏检，由于一次体检标本过多，可能造成在规定的时限内不能有效地完成检测任务，这是显微镜定量检测法偏低的主要原因。
6：尿中有形成分的检查，由于标本留取的不同，性别的不同而有所差异，但反应差异不会很大，应在参考范围之内，如出现较大差异，则与操作方法，操作者的水平及各种干扰因素有关，所以我们应当尽量减少各种影响因素，提高操作水平，获得真实，可靠的参考范围。
7：本次尿沉渣生物参考范围仅以本地区正常人为调查对象出的数据，而在临床诊断中使用的是病理判断值，因此其计算需要同时积累疾病人群和非疾病人群的检查值，即原则上通常把基准界限值与病理判断值分开来考虑，另外尿中有形成分的检查，因为对象疾病及检查的实施情况多种多样，在纵向上很难求得适合不同国家及地域使用的病理判断值。因此，我们调查的本地区内健康人群生物参考范围，只为推广尿沉渣定量检测临床应用提供参考依据，最好各实验室应根据自身条件建立适合自己的健康人群生物参考区间。
论文作者:李琼,何静
论文发表刊物:《健康世界》2015年14期供稿
论文发表时间:2015/11/19
标签：尿液论文; 红细胞论文; 白细胞论文; 成份论文; 标本论文; 成分论文; 定量论文; 《健康世界》2015年14期供稿论文;