云溪区路口中心卫生院 湖南省岳阳市 414011
摘要：目的：以大鼠为例，研究消渴丸研究对α-葡萄糖苷酶是否存在抑制作用。方法：取大鼠小肠的上段，从中提取α-葡萄糖苷酶，将α-葡萄糖苷酶以1：5比例稀释达到酶反应试剂盒的要求后，将10g?L-1蔗糖作为底物，10g?L-1阿波蔗糖作为阳性对照，加入浓度不同的格列本脲、消渴丸全药、消渴丸中药，37°C反应40分钟后，通过550nm波长测定吸光度，通过测定结果计算酶活性的抑制率，并判断消渴丸中药成分对大鼠肠黏膜α-葡萄糖苷酶活性的影响。结果：消渴丸中药成分对α-葡萄糖苷酶的抑制率为18.8%~35.8%%，阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率为86.4±1.9%。结论：消渴丸中药成分对大鼠小肠黏膜α-葡萄糖苷酶可起到一定抑制作用。
关键词：消渴丸；α-葡萄糖苷酶；抑制
消渴丸具有滋肾养阴、益气生津的作用，可用于治疗气阴两虚型糖尿病，对预防糖尿病的并发症也具有一定作用。消渴丸中的中西药成分格列本脲具有明显降糖作用，但目前临床研究中对消渴丸中的中药成分防治糖尿病的并发症研究还不明确[1]。本文通过研究消渴丸中药成分对α-葡萄糖苷酶的抑制机制，以明确临床治疗糖尿病时的用药指征以及药量情况，为临床治疗提供借鉴。
1、材料与方法
1.1 材料本次研究中采用的大鼠为雄性Wistar大鼠，从大鼠中提取肠粘膜α-葡萄糖苷酶。选用消渴丸全药（国药准字Z44020045，广州中一药业有限公司）、消渴丸中药粉末以及格列本脲粉末、阿卡波糖（国药准字H19990205，拜耳医药保健有限公司）以及葡萄糖测定试剂盒（批号第2400089号，辽宁泰科医学科学有限公司）。电子分析天平（上海丙林电子科技有限公司），85-2A磁力搅拌器（上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司），Allegra X-15R台式冷冻离心机（美国贝克曼库尔特有限公司），冰箱（海尔公司），37°C温育箱（上海精密仪器设备有限公司），MK3酶标仪（安徽爱心医疗科技有限公司）。
1.2 研究方法给予Wistar大鼠禁食3h后断头处死，并用预冷的生理盐水冲洗小肠上段两次，取其黏膜层，按照1：10的比例采用0.5mol?L-1NaCl-KCl缓冲液进行稀释，4°C20000r?L-1离心30分钟，按1：5生理盐水稀释后4°C500r?L-1离心10分钟，取上清液放置于-20°C冰箱保存。将提取的酶液按照2倍、5倍、10倍、20倍、50倍以及100倍的生理盐水进行稀释，取25μL加入5μL10g?L-1蔗糖溶液，20μL0.1mol?L-1磷酸盐缓冲液，250μL葡萄糖氧化酶液，反应40分钟后，放置于550nm波长下测定吸光度，α-葡萄糖苷酶浓度根据试验结果中葡萄糖的生成量进行测定。本次试验中，将酶浓度稀释5倍后，酶反应的速度符合试验要求，因此研究时将提取的酶液进行1：5倍稀释。测定α-葡萄糖苷酶活性抑制试验时，用阿卡波糖作为阳性对照药物，反应载体采用96孔微板，最终反应的体积为50μL，根据试验要求设定底物空白对照情况，并设置酶空白对照以及酶活性对照，并将试验样品分为渴丸全药、消渴丸中药、格列本脲、阿卡波糖4种。
1.3 统计学处理采用SPSS17.0软件进行统计学分析，计数资料采用平均数±标准差表示，计数资料采用%表示，组间比较采用t检验，P＜0.05具有统计学意义。
2、结果
注：P＜0.05具有统计学意义。
通过表1可以看出，阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率为（86.4±1.9）%，消渴丸中药成分的浓度 不同，对α-葡萄糖苷酶的抑制率不同，各个浓度间成分比较差异不显著，P＜0.05具有统计学意义。消渴丸全药对α-葡萄糖苷酶的抑制率较低，但明显高于格列本脲对α-葡萄糖苷酶的抑制率，两组间比较差异显著，P＜0.05具有统计学意义。
3、讨论
糖尿病是一种需要长期服用药物的慢性疾病，长期高血糖状态引起大血管、微血管病变，严重的甚至可引发心血管、神经系统发生障碍，给患者的身体健康以及正常生活造成严重不良影响[2]。中医理论中认为糖尿病属“消渴病”范畴，但对于中药控制血糖的研究机制不明确。消渴丸是一种中、西药复方制剂，已广泛应用于糖尿病的临床治疗中。临床研究消渴丸的中药成分对糖尿病疾病的作用机制，可以明确临床治疗糖尿病时的消渴丸用药指征以及药量情况。有研究显示，消渴丸全药与格列本脲相比，其餐后的降糖作用更为明显，持续时间更长、效果更为显著，而各类降糖药物中，阿卡波糖作为一种α-葡萄糖苷酶抑制剂餐后降糖作用明显。α-葡萄糖苷酶主要存在于动物小肠粘膜中，以有效促进葡萄糖药物的吸收[3]。通过本组研究可以看出，阳性对照阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制率较高，阴性对照格列本脲的抑制率较低，消渴丸中药成分对α-葡萄糖苷酶的抑制率为18.8%~35.8%，与格列本脲相比，差异显著，P＜0.05具有统计学意义。充分说明消渴丸中药成分α-葡萄糖苷酶活性具有一定的抑制作用。
参考文献：
[1]邬伟魁，张海燕，宋伟，等．糖尿病血管并发症的中药防治［J］． 中国实验方剂学杂志，2011，17（19）：292．
[2]KIM Y M，HYEON M，RHOE H I． A novel α-glucosidase inhibitor from pine bark［J］． Carbohydr Res，2004，339（3）：715．
[4]吴金环，顾红岩，喇孝瑾，等． 地黄与熟地黄对糖尿病小鼠血糖血脂的影响［J］． 中国实验方剂学杂志，2011，17（8）：161．
论文作者:易红梅
论文发表刊物:《健康世界》2015年6期
论文发表时间:2015/10/29
标签：糖苷酶论文; 葡萄论文; 抑制论文; 中药论文; 成分论文; 统计学论文; 作用论文; 《健康世界》2015年6期论文;